核酸的检测技术及相关标准物质研究-硕士论文

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1、北京化工大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。作者签名：妇壶壶日期：关于论文使用授权的说明学位论文作者完全了解北京化工大学有关保留和使用学位论文的规定，即：研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属北京化工大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的

2、复印件和磁盘，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以允许采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。保密论文注释：本学位论文属于保密范围，在土年解密后适用本授权书。非保密论文注释：本学位论文不属于保密范围，适用本授权书。作者签名：趣壶壶一日期：导师签名匕当手扯日期：伽f2．6々————————J————————————————————。——‘v陟f中——j‘I-●，-h莨一，。一、冬≯”篷漆囊警t-’、01絮譬二≯一。：j!：}!；：i置”。-：≤。慧j：味。．r，．警彳：；产L

3、蠢乏，=．谣。?。：'．^。．一学位论文数据集中图分类号0657学科分类号530．64论文编号1001020121250密级否学位授予单位代码1001O学位授予单位名称北京化工大学作者姓名柳方方学号2009001250获学位专业名称化学工程与技术获学位专业代码核酸的定性以及定量分课题来源基本科研业务费项目研究方向析论文题目核酸的检测技术以及相关标准物质的研究关键词核酸；定性分析；定量分析；不确定度论文答辩日期2Ol2．05．27；论文类型应用研究学位论文评阅及答辩委员会情况姓名职称工作单位学科专长指导教师秦培勇副

4、教授北京化工大学评阅人l苏海佳教授北京化工大学评阅人2陈必强北京化工大学评阅人3评阅人4评阅人5答辩委员会主席陆俊教授北京化工大学答辩委员1张丽叶教授北京化工大学答辩委员2刘云教授北京化工大学答辩委员3陈光副教授北京化工大学答辩委员4李媛副教授北京化工大学答辩委员5)王：一．一’一‘一二．四．论文类型：1．基础研究2．应用研究3．开发研究4．其它中图分类号在《中国图书资料分类法》查询。学科分类号在中华人民共和国国家标准(CB／T13745-9)《学科分类与代码))中查询。论丈编号由单位代码和年份及学号的后四位组成

5、。{．一-：．：‘”碗?-’j。≯+．I譬。’t‘i．●V·’?’、．“’t⋯2．’’々一、、⋯二。j．‘。’o’j?1≯、●J}}?4始麓。t．!一．’式暑一：o：～÷?：2一++囊’。毪一一～．，o一·。?：i‘：■j一：ij’!．==．，．、．乙，‘：r一。．‘=。一’。’j一?≤．；譬i⋯，j照’‘警i蔓囊⋯：‘毫．_．。：；．≯≥-≤0．·曩‘‘』ir-。≯’、。。÷；0。：．-≯rj_·、0～一。!．i一謦鬻-黪。

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9、r．q_-．℃基奠。．拿．。摘要核酸的检测技术及相关标准物质研究作为生命体中遗传信息的携带者，核酸在生命体的延续以及进化过程中发挥着极其重要的作用。由于其在遗传学、法医鉴定、亲子鉴定以及物种进化研究等方面的广泛应用，从而使对于核酸的研究显得越来越重要。对于核酸的研究主要包括核酸的定性和定量研究。在核酸的定量研究中主要应用聚合酶链式反应技术(PCR)、高效液相色谱技术(HPLC)以及基础的化学分析方法电位滴定法和新技术数字PCR技术进行定量分析的。在核酸的定性研究中，质谱分析技术以及红外光谱分析技术被应用其中。对于

10、核酸方面的研究，本论文研究如下：1．核酸碱基腺嘌呤以及胞嘧啶标准物质的研制腺嘌呤以及胞嘧啶是脱氧核糖核酸(DNA)中的两种碱基，由于两种物质都含有氨基基团，因此具有一定的弱碱性。实验采用非水电位滴定法对两种碱基的含量进行测定。通过进行滴定剂种类、滴定剂浓度、溶剂种类等因素进行选择优化，最终确定了0．05mol／L的无水高氯酸溶液作为滴定剂，无水冰醋酸作为溶剂定性实验。并且在后续的研究中采用了高效液相法对两种碱基进行了稳定性研究，采用质谱以及红外光谱检测对两种碱基进行了定性分析，并进行了灰分以及样品含水量的测定，经

11、过进一步的分析得到两种碱基标准物质的含量为：腺嘌呤以及胞嘧啶两种标准物质的含量分别为99．40+0．37％，99．50-t-1．07％。北京化工大学硕士学位论文2．数字PCR测定lambdaDNA的含量数字PCR芯片技术是一项新兴起来的检定技术，由于其在测定过程中不需要标准品的校准，且具有检测浓度低、用量少等特点，目前被应用到了核酸含量的检测研究中。本研究中采用数字PCR