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1、园艺学报2014,(4111):2281–2390http://www.ahs.ac.cnActaHorticulturaeSinicaE-mail:yuanyixuebao@126.com换锦花LsMYB4基因的克隆与表达分析*许振渊,高燕会,周芬静,李国庆,熊艳,童再康(浙江农林大学亚热带森林培育国家重点实验室培育基地,浙江临安311300)摘要:以换锦花(Lycorissprengeri)为材料,采用RT-PCR方法和RACE技术相结合的方法,从花瓣中克隆了MYB基因的cDNA全长序列,命名为LsMYB4。该序列全长793bp,包含606bp
2、完整开放阅读框,编码201个氨基酸,具有明显的R2R3-MYB结构域,与中国水仙NtMYB相似性达96%。实时荧光定量PCR分析结果表明,LsMYB4在换锦花不同组织和不同花期均有表达,其中在花瓣中的相对表达量比叶中多9~10倍,在盛花期的相对表达量比花苞期多20倍。不同花色无性系花瓣中表达量存在差异,花色较浅的无性系高于其它无性系,推测LsMYB4在调控换锦花花色形成的过程中起着负调控作用。关键词:换锦花;MYB基因;克隆;表达分析中图分类号:S68文献标志码:A文章编号:0513-353X(2014)11-2281-10CloningandEx
3、pressionAnalysisofLsMYB4GeneinLycorissprengeri*XUZhen-yuan,GAOYan-hui,ZHOUFen-jing,LIGuo-qing,XIONGYan,andTONGZai-kang(TheNurturingStationfortheStateKeyLaboratoryofSubtropicalSilviculture,ZhejiangAgricultureandForestryUniversity,Lin’an,Zhejiang311300,China)Abstract:AMYBgenenam
4、edLsMYB4wasclonedbyRT-PCRandRACEmethodsfrompetalsofLycorissprengeri.Sequencesanalysisshowedthatthefull-lengthMYBcDNAwas793bpandcontainedaORFof606bpencoding201aminoacids.TheLsMYB4proteinhadaconservedR2R3-MYBdomainandtheaminoacidssequencesharedupto96%homelogieswithanthycyaninbio
5、synthesis-relatedR2R3-MYBtranscriptionfactorinNarcissustazetta.TheexpressionanalysisbyrealtimeqRT-PCRshowedthatLsMYB4wasexpressedindifferenttissuesandfloweringperiods.Theexpressionlevelinpetalwasalmosttentimeshigherthaninleaf.AndinflorescenceperiodtheexpressionofLsMYB4wastwent
6、ytimeshigherthaninearlybuddingperiod.TheLsMYB4expresseddiscrepantlyinfourclonesofL.sprengeri,andresultsofitimplicatedthatthelighterflowercolor,thehigherexpressionlevel.ThisshowedthatLsMYB4playedapossiblynegativeroleinanthocyaninbiosynthesisofLycorissprengeri.Keywords:Lycorissp
7、rengeri;MYB;cloning;expressionanalysis石蒜属(Lycoris)植物花形及花色丰富(秦卫华等,2003),又因为开放在少花的夏末秋初闷热时节,而被广泛应用于园林绿化等(刘志高等,2008;黄春红等,2013)。换锦花(Lycorissprengeri)为石蒜属植物的一种,其花为喇叭状,花色多为红色、紫红色(时剑等,2011),其中花被裂片顶收稿日期:2014–06–03;修回日期:2014–09–12基金项目:浙江省花卉新品种选育重大科技专项重点项目(2012C12909-14)*通信作者Authorforcor
8、respondence(E-mail:gaoyanhui408@126.com)2282园艺学报41卷端的蓝紫色非常少有,
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