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《基于抗草甘膦基因的棉花茎尖农杆菌介导转化方法的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、棉花学报CottonScience2013袁25渊5冤院410~416基于抗草甘膦基因的棉花茎尖农杆菌介导转化方法的研究*欧婷袁何秋伶袁陈进红袁祝水金渊浙江大学农业与生物技术学院袁杭州310058冤摘要院以中棉所49尧珂字棉201和YZ-1为受体材料袁通过对培养基草甘膦浓度尧农杆菌侵染时间和浓度尧共培养时间以及恢复培养条件等因素的优化袁建立了基于抗草甘膦基因的棉花茎尖农杆菌转化技术体系袁并将抗草甘膦基因渊6冤导入3个受体材料袁获得转基因抗草甘膦棉花植株遥研究结果表明袁适合于棉花茎尖农杆菌介导的草甘膦筛选浓度为
2、10mg窑L-1曰茎尖转化体系为农杆菌菌液OD为0.9～1.0袁侵染时间为20600min袁共培养时间为48h袁选用SH培养基并加入适量活性炭渊0.5g窑L-1冤作为恢复培养基遥用本研究创制的转化技术体系袁转化处理3个陆地棉受体360个茎尖袁共获得60株抗性再生植株袁经PCR检测袁获得阳性抗性植株26株袁移栽成活23株遥以茎尖外植体数计算袁本体系的转化成功率6.4%遥该转化体系适合于转化抗草甘膦基因或以抗草甘膦基因为筛选基因的外源基因袁具有转化频率高尧嵌合体少尧转化周期短等优点遥关键词院农杆菌曰棉花曰茎尖曰转
3、化曰草甘膦中图分类号院S562.035.3文献标志码院A文章编号院1002-7807渊2013冤05-0410-07*OUTing,HEQiu-ling,CHENJin-hong,ZHUShui-jin渊310058,冤Agenetictransformationsystemviacottonshoottip-mediumbasedonaglyphosateresistantgenewasestablishedthroughtheoptimizationoftheglyphosateconcentration
4、duringscreening,infectionperiodandinfectionconcentra-tionofthe,periodofco-culturewiththe,andtheconditionsofrecovercultureetc.,usedCCRI49,Coker201,andYZ-1asthematerials,andtheirtransgenicherbicideresistantcottonplantswith6wereobtainedaswell.Astheresultsshowe
5、dthat,theoptimalglyphosateconcentrationforscreeningtransgeniccottonshoottipswas10mg窑L-1,theoptimaldensitywas0.9-1.0inOD600;theinfectionperiodwasabout20min;theco-cultureperiodwithwas48hours;andSHmediumcontaining0.5g窑L-1activatedcarbonwasthebestrecoverymedium
6、forthetrans-genicshoottiptogrow.Usingthistransformationsystem,60glyphosateresistantplantletswereobtainedfromthe360cottonshoottipsofthreeuplandcottoncultivarorgermplasms.Fromthem,26plantletsweretransgenicaccordingtothePCRproducts,and23plantswiththeglyphosate
7、resistantgenesurvivedaftertransplanting.Basedonexplantnumbers,thesuccessrateoftrans-formationinthisexperimentwas6.4%.Thepresentedtransformationsystemisanexcellentmethodtotransformtheglyphosategene,oranexogenousgenewithglyphosateasascreeninggene,withtheadvan
8、tagesofhightransformationrate,lesschimera,andshorttransformationperiodetc.;cotton;shoottip;transgenic;glyphosate棉花是重要的经济作物袁在我国国民经济发种珂201和珂312以来袁棉花转基因技术飞速发[1][2-3]展中占有重要的地位遥自1987年Umbec等首展遥目前棉花转基因方法主要有农杆
