资源描述：
《抗草甘膦基因aroa-转化陆地棉胚性愈伤组织的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、棉花学报CottonScience2014袁26渊3冤院237~243抗草甘膦基因转化陆地棉胚性愈伤组织的研究1112211*章郑专袁汤磊鹏袁王钰袁何军光袁蔡文珑袁戎均康袁李飞飞渊1.浙江农林大学农业与食品科学学院／浙江省农产品品质改良技术研究重点实验室袁浙江临安311300曰2.浙江新安江化工集团股份有限公司袁浙江建德311600冤摘要院为了建立以草甘膦为选择标记的农杆菌介导的棉花胚性愈伤组织转化体系袁本研究将草甘膦抗性基因渊冤转化陆地棉WC和YZ-1的胚性愈伤组织袁分别以5mg窑L-1和10mg窑L-1的草甘膦浓度作为选
2、择压袁经过2～3轮筛选袁获得了抗性胚性愈伤组织袁诱导出胚状体并发育成苗遥对T0再生植株进行PCR及草甘膦抗性检测袁以WC和YZ-1为受体的转抗草甘膦基因渊冤分别获得了33株和10株阳性植株袁转化效率分别为82.5%和62.5%遥该体系为棉花遗传转化提供了实验方法袁获得的抗草甘膦棉花为棉花育种提供种质资源曰同时抗除草剂基因还可以作为筛选标记与其它基因串联在一起转化棉花袁进行基因功能验证遥关键词院草甘膦曰基因曰胚性愈伤组织曰陆地棉曰农杆菌介导法转化中图分类号院S562.035.3文献标志码院A文章编号院1002-7807渊201
3、4冤03-0237-071112211*ZhangZhengzhuan,TangLeipeng,WangYu,HeJunguang,CaiWenlong,RongJunkang,LiFeifei(1.311300,;2.311600,)Forproducingtheglyphosate-resistantcottonplants,wedevelopedan-mediatedtransformationsystemfromembryogeniccalli(EC)inwhichglyphosatewasusedasaselect
4、iveagent.Inthisstudy,glyphosate-resistantgenewastransformedtoembryogeniccalli(EC)ofL.cv.WCandYZ-1.Andthecalliweretransferredontoculturemedium,respectively,with5and10mg窑L-1glyphosateforselection.Aftertwoorthreecyclesofglyphosate-resistantscreening,resistantECwasobta
5、inedandtransgenicplantletswereregeneratedfromembryoidandgraftedingreenhouse.Glyphosate-resis-tantpositiveplantswereidentifiedbyPCRanalysisandglyphosate-resistantscreening.Inthisstudy,33and10glyphosate-resis-tantpositiveplantswereobtainedfromWCandYZ-1,respectively,a
6、ndthecorrespondingtransformationefficiencywas82.5%and62.5%.Thistransformationsystemprovidesnotonlyanefficientmethodforcottongenetictransformationbutalsoimpor-tantgermplasmresourcesforcottonbreeding.Meanwhile,theselectionmarkergenecanbetransformedintocottongenometog
7、etherwithothertargetgeneforfunctionalanalysis.Glyphosate;gene;embryogeniccalli(EC);L;-mediatedtransformatiom棉花在生长过程中经常受到多种生物胁迫毒尧低残留尧无污染以及杂草不易产生抗性等优[1]和非生物胁迫危害袁杂草是生物危害中最严重的良的综合性能袁因此袁广泛应用于玉米尧大豆和[2]因子之一遥棉田杂草不仅与棉花争夺水肥袁而且棉花播种前或出苗后的田间定向处理遥草甘膦为病虫提供栖息地袁传播病虫害袁严重影响棉花专一性地抑制5-
8、烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶生长袁造成棉花明显减产遥草甘膦是具有高效尧低渊EPSP合酶冤的活性袁阻断芳香族氨基酸和一些收稿日期院2013-07-03作者简介院章郑专(1991-)袁男袁农学学士曰*通讯作者袁lifei-fei@163.com基金项目院浙江省教育厅科研项目渊Y20112061
