几种常见食用菌胞外酶活性测定方法的研究

《几种常见食用菌胞外酶活性测定方法的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、第５期（总第１２６期）中国林副特产Ｎｏ．５（ＧＳＮＯ．１２６）２０１３年１０月ＦｏｒｅｓｔＢｙ－ＰｒｏｄｕｃｔａｎｄＳｐｅｃｉａｌｉｔｙｉｎＣｈｉｎａＯｃｔ．２０１３几种常见食用菌胞外酶活性测定方法的研究１）吕春鹤，孙婷婷，张健，孟东阳，邹莉＊（东北林业大学林学院，哈尔滨１５００４０）摘要：食用菌胞外酶活性的变化规律与食用菌生长发育有着密切的关系，能在一定程度上检测菌种老化、退化和不利变异带来的危害。对近年来常见的几种食用菌胞外酶活性测定方法进行了总结与分析，简略的讨论了各种胞外酶活

2、性测定方法的利弊，为快速检测食用菌胞外酶提供理论依据。关键词：食用菌；胞外酶；酶活；测定方法ＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅＭｅａｓｕｒｅｍｅｎｔＭｅｔｈｏｄｓｏｆＳｅｖｅｒａｌＫｉｎｄｓｏｆＣｏｍｍｏｎＥｄｉｂｌｅＦｕｎｇｉＥｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒＥｎｚｙｍｅＡｃｔｉｖｉｔｙ＊ＬｖＣｈｕｎｈｅ，ＳｕｎＴｉｎｇｔｉｎｇ，ＺｈａｎｇＪｉａｎ，ＭｅｎｇＤｏｎｇｙａｎｇ，ＺｏｕＬｉ（ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＦｏｒｅｓｔｒｙ，Ｎｏｒｔｈｅａｓｔｆｏｒｅｓｔｒｙｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｒｂｉｎ１５００４０）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅｅｄｉｂｌｅｆｕｎｇｉｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｅｎｚｙｍｅｐｌａｙｓａｎｉ

3、ｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｔｈｅｇｒｏｗｔｈｏｆｅｄｉｂｌｅｆｕｎｇｉ．Ｔｈｅｐｕｒｐｏｓｅｏｆｔｈｉｓａｒｔｉｃｌｅｉｓｉｎｄｕｃｔｉｖｉｎｇｔｈｅｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｍｅｔｈｏｄｓｏｆｓｅｖｅｒａｌｋｉｎｄｓｏｆｃｏｍ－ｍｏｎｅｄｉｂｌｅｆｕｎｇｉｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｅｎｚｙｍｅａｃｔｉｖｉｔｙａｎｄＡｎａｌｙｚｉｎｇｔｈｅｐｒｏｓａｎｄｃｏｎｓｏｆｔｈｅｓｅｍｅｔｈｏｄｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｅｄｉｂｌｅｆｕｎｇｕｓ；Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｅｎｚｙｍｅ；Ｅｎｚｙｍｅａｃｔｉｖｉｔｙ；Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｍｅｔｈｏｄ食用菌在生长发育过程中产生胞外酶，食用菌子氧通过

4、自由基－催化反应机制来氧化各种芳香族［９］胞外酶可以分解培养料使多糖、蛋白质、核酸等天然和非芳香族化合物，是一种糖蛋白。是与木质素高聚物裂解成食用菌菌丝和子实体便于吸收的小分等大分子物质降解有关的酚氧化酶，它能加速木质子物质，为食用菌菌丝生长、原基形成、子实体生长素芳香族化合物的分解，为菌丝提供营养。胞外漆［１］发育提供营养物质。因此，食用菌胞外酶在食用酶活性越高菌株分解木质素能力就越强。目前测定菌生长发育过程中起着至关重要的作用，其胞外酶漆酶酶活的方法有分光光度法、测Ｏ２法、高效液相的酶活力也就成为了重要的测定对象。通过对酶活色谱法、极谱法、脉冲激光光声分析法、微量热法等。的测定

5、可以清晰地看出各种胞外酶对菌料的分解程其中最常用的方法为分光光度法，而在分光光度法度与分解效率，以便于使食用菌菌丝及子实体更好中比较常用的有邻联甲苯胺法，ＡＢＴＳ法，愈创木酚更快生长。并且就食用菌的生长发育过程来看，了法等。因为不同来源的漆酶与底物反应的亲和力不解食用菌胞外酶活性的变化趋势，可以进一步探究同，即使同一来源的漆酶，底物不同，反应的亲和力食用菌的营养生理，提高栽培技术。在食用菌胞外也不同，测得的酶活数值就不同。因而，目前也没有酶中，羟甲基纤维素酶、淀粉酶、漆酶、蛋白酶、多酚统一的方法来测定漆酶酶活。以下总结了最常用的氧化酶、半纤维素酶等均对食用菌生长起着很大的分光光度法

6、中的几种常见方法并进行了比较分析。［２－８］作用，但其中最为主要的酶有羟甲基纤维素酶、１．１邻联甲苯胺法淀粉酶、漆酶。所以下面将会对这几种酶的测定方邻联甲苯胺法测定漆酶酶活是以邻联甲苯胺为法进行主要分析。底物，以醋酸溶液反应体系为缓冲溶液，ｐＨ值为１漆酶４．０或４．６，缓冲溶液的浓度有０．０３９、０．０７７、０．０８５漆酶属于多铜氧化酶家族中的一大类，利用分ｍｏｌ／Ｌ３种。反应温度可选择在２５、２８、３０、４０℃，收稿日期：２０１３－０５－２８１）基金项目：东北林业大学本科创新实验（２０１２１０２２５０１３）９３２０１３年中国林副特产第５期

7、反应时间与反应温度有关，３０℃和４０℃一般反应方法，其中以羧甲基纤维素钠盐酶活性测定方法最［１９］５ｍｉｎ，２５℃和２８℃一般反应３０ｍｉｎ，分光光度计波为常见。长一般在６００ｎｍ。邻联甲苯胺容易购买且价格相在测定纤维素酶总酶活力时，可选择的底物是对ＡＢＴＳ便宜，可选择的反应温度多，在３０和４０℃多种多样的，有荧光定糖法、滤纸酶活（ＦＰＡ）测定法时反应时间短，但邻联甲苯胺毒性较强，且该底物水等多种方法。即使这样