东方蜜蜂微孢子虫孢子冷冻保存后对意蜂工蜂的侵染性

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1、2014年4～6月下第65卷中国蜂业APICULTUREOFCHINA33东方蜜蜂微孢子虫孢子冷冻保存后对意蜂工蜂的侵染性游信毅　叶坤婷　应碧华　苏欣　梁勤　黄少康（福建农林大学蜂学学院，福州350002）摘　要：东方蜜蜂微孢子虫是成年蜜蜂的重要传染性病原真菌。试验对10%的甘油、乙二醇、二甲亚砜及水在-80℃低温下冷冻保存东方蜜蜂微孢子虫孢子5个月后，孢子对意蜂工蜂的侵染性进行了考查。每只初出房工蜂接种3×104个孢子，结果发现，接种后15天，各组的孢子量无显著差异（P>0.05），产孢量为3.05～4.13×107个/只。10%甘油和10%二甲亚砜2种保存孢子感染工蜂

2、的22d累计死亡率分别高达74%和68%，而水保存的累计死亡率仅12.5%。所以得出结论，10%甘油和10%二甲亚砜是比水更好的孢子冷冻保护剂。关键词：东方蜜蜂微孢子虫；冷冻保护剂；侵染；工蜂；意大利蜜蜂中图分类号：S895文献标识码：AInfectivityofNosemaceranaesporetoworkerhoneybee(Apismelliferaligustica)aftercryopreservationYouXinyi，YeKunting,YingBihua,SuXing,LiangQing,HuangShaokang（CollegeofBeeScienc

3、e,FujianAgricultureandForestryUniversity,Fuzhou350002）Abstract:Nosemaceranaeisanimportantchronicinfectiousparasiticfungusinadulthoneybees.Toevaluatethesporeinfectivitytoadulthoneybeeworker(Apismellieferaligustica)aftercryopreservationforfivemonthsat-80℃in10%glycerol,10%ethalylglycol,10%di

4、methylsulfoxide(DMSO),andwaterrespectively.Newlyemergedadultworkerwasinoculatedindividuallyatthedoseof3×104spores/bee.Theresultsshowed,therewasnosignificantdifferenceofsporeloadbetweenbeesinfectedbydifferentcryopreservedspores（P>0.05）,whichreached3.05～4.13×107spore/bee.Thecumulativemortal

5、itiesofworkerswere74%and68%after22dayspostinfectionin10%glyceroland10%DMSOrespectively,whilethatofwaterwasonly12.5%.Weconcludedthat10%glyceroland10%DMSOweresignificantly(P<0.01)betterthanwaterascryopreservants,Keywords:Nosemaceranae；cryopreservation；infection；workerbee；Apismellieferaligus

6、tica东方蜜蜂微孢子虫（Nosemaceranae）最早由低温冷冻保存是最广泛使用的细胞和微生物的[7]瑞典科学家IngemarFries在中华蜜蜂（Apiscerana保存方法，在物种保存中有重要意义。在低温保[1]cerana）体内发现，2005年，第1次在西方蜜蜂工存中，常用不同的保护剂，以减轻冷冻对细胞的伤[2]蜂中发现，但东方蜜蜂微孢子虫侵染西方蜜蜂可害，如甘油，乙二醇，二甲基亚砜（DMSO）等。[3][8]追溯到20世纪90年代中期。现在，东方蜜蜂微孢McGowan开展了保护剂对微孢子虫冷冻保存的研[4]子虫已广泛传播于世界各地的西方蜜蜂，而且逐究。通过荧光

7、染色法对冷冻保存的孢子活力进行了渐取代了西方蜜蜂微孢子虫（N.apis）成为西方蜜评价，结果认为，10%甘油保存的孢子活性比相同浓[3-4]蜂上的主要孢子种类；大蜜蜂（A.dorsata）、小度的DMSO、乙二醇更好。然而，与染色法相比，[5][6]蜜蜂（A.florea）和熊蜂（Bumblebee）上也发生物测定孢子活力较为准确，并更具实用参考价值现东方蜜蜂微孢子虫的感染。的方法。因此，本试验对DMSO、乙二醇、甘油等基金项目：现代农业产业技术体系建设专项资金(CARS-45-KXJ7)。作者简介：游信毅（1988.12-）