中国蜜蜂微孢子虫种质分布及侵染意蜂中肠的蛋白质组分析

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1、密级：论文编号：中囯农业科学院学位论文中国蜜蜂微孢子虫种质分布及侵染意蜂中肠的蛋白质组分析GermplasmDistributionofNosemaspp.inApismelliferainChinaandProteomicAnalysisinApismelliferaMidgutInfectedbyNosemacerana硕士研宄生：张建燕指导教师：王强副研宄员申请学位类别：农业推广硕士专业领域名称：养殖培养单位：蜜蜂研宄所2015年4月独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注

2、和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：时间：年S月y日关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定，即：中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研究生签名：武達疼时间：1/>代

3、年V月巧日中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表论文题目我国蜜蜂微孢子虫种质分布及侵染意蜂中肠的蛋白质组分析特种经济论文作者张建燕专业养殖研宂方向动物饲养指导教师王强培养单位（研宄所）蜜蜂研宄所硕（博）姓名职称单位专业签名导师评阅人答辩主席北京市农林科学院硕导口张芝利研宄员植物保护环境保护昆虫学.博导0研宄所硕导口中国科学院张润志研宄员昆虫学博导0动物研究所硕导口中国农业大学农学与高希武教授昆虫学博导0<生物技术学院答硕导口中国农业大学农学与彩万志教授昆虫学博导0生物技术学院辩硕导口中国农业大学农学与秦玉川教授昆虫学博导0生物技术学院委员

4、会议记录（秘书）杨磊论文答辩时间地点2015年5月22号蜜蜂所会议室Secrecy:No.ChineseAcademyofAgriculturalSciencesDissertationGermplasmDistributionofNosemaspp.inApismelliferainChinaandProteomicAnalysisinApismelliferaMidgutInfectedbyNosemaceranaM.S.Candidate：ZhangJianyanSupervisor：ViceProf.WangQiangDegree：Maste

5、rofAgriculturalExtensionSpecialty:RearingApril2015摘要蜜蜂作为昆虫模式生物，是自然界中的一种重要的授粉昆虫。微孢子虫病是由微孢子虫所引起的危害成年蜜蜂健康的一种重要疾病。它不仅影响了蜜蜂的消化系统，降低了蜜蜂的抵抗力，而且导致蜂王繁殖能力下降，使群势大幅下降。目前已知危害蜜蜂的微孢子虫有两种：一种是蜜蜂微孢子虫（Nosemaapis）；另一种是东方蜜蜂微孢子虫（Nosemacerana）。据目前国际上的报道发现，东方蜜蜂微孢子虫（Nosemacerana）已成为西方蜜蜂群中微孢子虫病的主要病原，对西方

6、蜜蜂造成了更大的损失。鉴于我国这方面的系统研究尚少，有必要对我国主要意大利蜜蜂养蜂地区微孢子虫的种群分布进行进一步调查。此外，虽然关于微孢子虫病的相关报道越来越多，但蜜蜂的微孢子虫病致病机理及蜜蜂的免疫应激反应尚不是很清楚。为了明确蜜蜂的病原微孢子虫种群分布以及微孢子虫的致病机理，本研究通过采用多重PCR的方法对蜜蜂微孢子虫在全国主要养蜂地区的种群分布情况进行了调查；并采用iTRAQ技术，对东方蜜蜂微孢子虫（Nosemacerana）侵染前后意蜂（Apismellifera）中肠组织进行了差异蛋白质组分析；结合受侵染蜜蜂蛋白质组分析结果对东方蜜蜂微孢

7、子虫侵染意蜂的致病机理及蜜蜂的免疫反应进行了初步的探究。本实验所得到的主要结果如下：1.对采集自全国16个养蜂地区的69份样品进行了微孢子虫种质鉴定。鉴定结果发现，所有69份样品均发现了东方蜜蜂微孢子虫（Nosemacerana），而仅在山东寿光的一份样品中同时检测到了东方蜜蜂微孢子虫（Nosemacerana）和蜜蜂微孢子虫（Nosemaapis）。初步明确了东方蜜蜂微孢子虫在中国西方蜜蜂群中已成为主要的病原种，同时进一步验证了前人所报道的同一个蜂场可以同时感染2个种微孢子虫的现象。82.选取浓度为2×10个/mL的东方蜜蜂微孢子虫（Nosemac

8、erana）对意蜂（Apismellifera）进行人工侵染，采用iTRAQ技术对侵染后24h、48h、96