壳聚糖的脱乙酰度酸碱滴定法测定

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1、脱乙酰度测定酸碱滴定法测定：测定原理壳聚糖的自由氨基呈碱性，可与酸定量地发生质子化反应，形成壳聚糖的胶体溶液，溶液中游离的H+离子用碱进行滴定。这样从用于溶解壳聚糖的酸量与滴定用去的碱量之差，即可推算出壳聚糖自由氨基结合酸的量，从而计算出壳聚糖中自由氨基的含量。一、测定方法1、水分含量的测定称取0.3g壳聚糖样品，在105℃下烘干至恒重，计算失重，即得水分含量。水分(%)=[(W1-W2)/(W1-W0)]×100式中，W1为105℃烘干前样品及称样皿质量(g),W2为105℃烘干后样品及称样皿质量

2、(g)W0为已恒重的称样皿质量(g)。2、脱乙酰度的测定准确称量8g壳聚糖样品(相当于0.2g壳聚糖，样品中壳聚糖含量为25mg/g)，置于250ml锥形瓶中，加入标准0.1mol/L盐酸溶液20ml。将锥形瓶置于电磁搅拌器座上，在20℃条件下搅拌使样品溶解,再加50ml蒸馏水。加入2-3滴甲基橙-苯胺蓝混合指示剂(1g/1L甲基橙:1g/1L苯胺蓝=1:2,体积比，其中苯胺蓝为水溶性)。用标准0.1mol/L氢氧化钠溶液进行滴定，滴定至溶液由紫红色变为蓝绿色，为滴定终点。计算公式：氨基含量=[(C

3、1V1-C2V2)×0.016]/[G×(100-W)]×100%式中，C1为酸盐标准溶液的浓度(mol/L)C2为氢氧化钠标准溶液的浓度(mol/L)V1为加入的酸盐标准溶液的体积(ml)V2为滴定用消耗的氢氧化钠标准溶液的体积(ml)G为样品的重量W为样品的水分(%)0.016为1ml的1mol/L盐酸溶液相当的氨基量(g)。脱乙酰度=[氨基含量(%)]/(9.94%)×100%