不同脱乙酰度壳聚糖的抑菌性

不同脱乙酰度壳聚糖的抑菌性

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1、第10卷第4期上海水产大学学报vol.10,No.42001年12月JOURNALOFSHANGHAIFLSHEEWESUNIVERSITYDectlull文章编号:1004一7271(2001)04一0380一03·研究简报·不同脱乙酞度壳聚糖的抑菌性Theantibioticactivitiesofchitosanwithdifferentdeacetyldegrees王鸿,沈月新(上海水产大学食品学院,上海2000%WANGHong,SHENYue-xin(CollegeofFoodScieace,Slu

2、rnghai,FisheriesUoiaursay,Shanghai2000%,China关键词:壳聚糖;抑菌性;脱乙酞度Keywords:南tosaa;antibiodcactivity;deaeety卜leg-中图分类号:S986.2文献标识码:A甲壳素又称无水一N一乙酞基一D氨基葡萄糖缩聚体,许多乙酞胺葡萄糖单体通过1,4糖昔键连接在一起。甲壳素经浓碱液处理后,分子中乙酞胺基会部分水解脱除,当分子中半数以上的乙酞基脱除便成为壳聚糖。由于甲壳素单体G2位上乙酞胺基取代了经基,它不溶于稀酸稀碱和有机溶剂,其性

3、质类似纤维素。当半数以上的乙酞基被脱除就可以在酸中溶解川。当壳聚糖溶解在酸性溶液中,单体分子上的游离胺基(-NH2)质子化而带正电(一NH3+)变成阳离子聚合物,能吸附一些带负电荷的物质。基于此,人们对壳聚糖的抑菌机理有着不同的解释,也研究了不同的分子量壳聚糖的抑制效果,但对不同脱乙酞度壳聚糖的抑菌性研究甚少。夏文水等2曾对分子量较小的甲壳低聚糖(M,=1500)其脱乙酸度与抑菌率的关系作过研究。本实验就分子量较大的壳聚糖(9.3x1护一9.8x1护)中三种不同脱乙酞度的抑菌性进行研究,以有助于壳聚糖机理的探讨

4、,更好地为壳聚糖应用于水产品、果蔬等食品的防腐、保鲜提供理论依据。1材料与方法口壳聚*:M,=9.83x105,D.D二81.8%;M,二9.64x1OS,D.D=78.4%;M,=9.26x105,D.D=61.3%0由晰江省玉环县夭宝壳聚糖有限公司提供。菌种,大肠杆菌(Escherichiacoli)·金黄色葡萄球菌(Staphyloroecusuureus)由上海水产大学渔业学院微生物教研室提供。液体蛋白拣培养基:中国医药(集团)上海化学试剂公司生产。壳聚糖分子量的测定:采用乌氏粘度剂稀释法,参考文献[3

5、]0三种壳聚糖的分子量分别为M=9.83x105,峡=9.64xW,M,=9.26x105,脱乙酞度的测定:采用碱量法测定壳聚糖的胺基含量,据文献仁4]。三种壳聚糖的脱乙酞度分别为81.8%,78.4%,61.3%,菌种母液的制备:参考文献[5]。在无菌条件下,挑取一环经斜面复壮的E.wli,St.aureus菌种分收稿日期:2001-05-21作者简万方数据介:王鸿(197(一)"Y,新疆石河子人,本校1999级研究生,专业方向为食品冷冻科学4期王鸿等:不同脱乙酞度壳聚糖的抑菌性381别放到经事先灭菌的100

6、ML蛋白陈液体培养基中,置于电热培养箱中,30℃培养24h后供接种[6],即为菌种母液。接种前用显微镜计数法测定每毗菌种母液所含菌体的个数,用以换算成接种量。含不同脱乙1t度壳聚糖培养基的配制:分别称取不同脱乙酞度的壳聚糖各。.1g,将三种壳聚糖均溶解在50mL,0.2NHAC一NaCl溶液中制成浓度为0.2%的壳聚糖溶液,然后将壳聚糖溶液与液体蛋白陈培养基棍合,用40%的NaOH调溶液的pH值为6.0,即成为含不同脱乙酞度的壳聚糖样品A(M,=9.26x7护,D.D二61.3%),B(呱二9.64x1护,D.

7、D=78.417,),C(M,=9.83x1护,D.D=81.8%)的液态培养基。对照样品为等量不含壳聚糖溶液的液体蛋白陈培养基。所有培养基经121`C湿热灭菌后备用。生长曲线的测定:据文献[5]。逐次将菌种母掖用移液枪取1ML加人对照样品和样品A,B,C中,然后将含有菌液的样品置于培养箱中,在30℃条件下培养,每隔24h取样,稀释,用显微镜直接计数法测定细菌生长量[6]。直到所有样品及对照中的菌体数量不再增长,在图中绘制不同样品中细菌的生长曲线。2结果和讨论2.1不同脱乙酞度壳聚糖的抑菌性图1,图2为大肠杆菌

8、、金黄色葡萄球菌在三种不同脱乙酞度壳聚糖液态培养基(A,B,C)和对照组中的生长曲线。由图可知,大肠杆菌在样品A,B,C中的生长量都要比对照组低,说明三种壳聚糖都有抑菌作用。24h后明显出现不同脱乙fk度样品A,B,C中生长量依次递减的现象(A>B>C),这种趋势持续到48h时最大,即随脱乙酞度增加抑菌性能增强。其后又逐渐减小,96h后趋于接近。从图2的金黄色葡萄球菌生长曲线可知,三种

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