四川省内江市威远中学校2022-2023学年高二下学期第二次阶段性考试理综生物Word版含解析

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威远中学高2024届高二下第二次阶段性考试生物试题一、单项选择题:本题共6小题,在每小题给出的四个选项中,只有一项是符合题目要求的。1.如图①表示两种物镜及其与装片的位置关系,②是低倍镜下的视野。下列相关叙述正确的是()A.甲物镜被乙物镜替换后,视野亮度增强,视野中的细胞数量增多B.观察紫色洋葱细胞质壁分离及其复原实验使用甲物镜即可,可以不使用乙物镜C.换用乙物镜的操作顺序是:转动转换器→调节光圈→移动装片→转动细准焦螺旋D.要想换用高倍镜观察②中的细胞a,需要将装片向右移动【答案】B【解析】【分析】显微镜成像的特点:显微镜成像是倒立的虚像,即上下相反,左右相反,物像的移动方向与标本的移动方向相反,故显微镜下所成的像是倒立放大的虚像,若在视野中看到细胞质顺时针流动,则实际上细胞质就是顺时针流动。由低倍镜换用高倍镜进行观察的步骤是:移动玻片标本使要观察的某一物像到达视野中央→转动转换器选择高倍镜对准通光孔→调节光圈,换用较大光圈使视野较为明亮→转动细准焦螺旋使物像更加清晰。题图分析,物镜镜头越长放大倍数越大,与载玻片的距离越近,因此,图①中乙的放大倍数大于甲。【详解】A、甲物镜被乙物镜替换后,是由低倍镜转换为高倍镜,放大倍数增加,视野的亮度会变暗,A错误;B、观察紫色洋葱细胞质壁分离及其复原实验低倍镜下观察即可,即需要使用甲物镜观察可,可以不使用乙物镜,B正确;C、换用乙物镜的操作是低倍镜转换为高倍镜,顺序是:移动装片→转动转换器→调节光圈→转动细准焦螺旋,移动装片的目的是由于在高倍镜下观察到的实际面积小,若不移动装片,可能会导致看不到想要观察的目标,C错误;D、要想换用高倍镜观察②中的细胞a,细胞a位于视野的左方,说明细胞a在标本中的位置是右方,故需要将装片向左移动,D错误。

1故选B。2.下列有关细胞结构和功能的叙述不正确的是()A.吞噬细胞与肌肉细胞相比,前者溶酶体的含量较多B.原核细胞没有成形的细胞核,但都有核糖体C.叶绿体中含有DNA并能合成ATPD.没有线粒体细胞不能进行有氧呼吸【答案】D【解析】【分析】细胞的功能是由其结构决定,例如吞噬细胞要吞噬其他物质,之后要进行水解,所以吞噬细胞中溶酶体的含量多,在分泌蛋白旺盛的细胞中,内质网与高尔基体的分布较发达。【详解】A、吞噬细胞吞噬物质以后要进行水解,而溶酶体是细胞内物质消化的车间,内含多种水解酶,故吞噬细胞与肌肉细胞相比溶酶体的含量较多,A正确;B、原核细胞没有成形的细胞核,有拟核,有核糖体,B正确;C、叶绿体中含有少量的DNA和RNA,能将光能转化化学能,同时合成ATP,C正确;D、没有线粒体的细胞也能进行有氧呼吸,例如有些原核生物虽然没有线粒体但是可以进行有氧呼吸,D错误。故选D。3.下列人体细胞内的生理活动中,不在生物膜系统上进行的是()A.抗体的合成与分泌B.细胞呼吸产生CO2C.葡萄糖分解为丙酮酸D.分解衰老细胞中的细胞器【答案】C【解析】【分析】生物膜系统包括细胞膜、细胞器膜和核膜。【详解】A、抗体的化学本质为蛋白质,合成与分泌涉及内质网、高尔基体、囊泡和细胞膜等膜结构,A错误;B、细胞呼吸产生二氧化碳,发生在有氧呼吸第二阶段位于线粒体基质,线粒体具有双层膜结构,B错误;C、葡萄糖分解为丙酮酸发生在细胞呼吸的第一阶段,位于细胞质基质,不涉及膜系统,C正确;D、分解衰老细胞中的细胞器是溶酶体的功能,溶酶体具有单层膜结构,D错误。

2故选C。4.下列关于生物学实验中涉及到的部分实验操作及观测指标的叙述错误的是(  )实验部分实验操作观测指标A人鼠细胞融合实验用红色和绿色荧光染料分别标记人和鼠细胞膜上的蛋白质观察融合后细胞膜上荧光的分布状况B研究分泌蛋白合成和运输途径的实验用3H标记亮氨酸追踪放射性标记的物质出现的场所及顺序C证明DNA半保留复制的实验用15N标记大肠杆菌的DNA分子通过密度梯度离心法分离含有不同相对原子质量氮元素的DNAD噬菌体侵染大肠杆菌的实验用同时含有放射性同位素35S和32P的培养基培养大肠杆菌,进而标记T2噬菌体一般情况下,检测离心管中上清液和沉淀物的放射性物质A.AB.BC.CD.D【答案】D【解析】【分析】由于病毒无细胞结构,必须寄生在活细胞内才能完成正常的生命活动,所以在噬菌体侵染大肠杆菌的实验中,不能直接标记噬菌体,而是分别用含有放射性同位素35S和32P的培养基培养大肠杆菌,进而标记T2噬菌体。【详解】A、人鼠细胞融合实验,融合实验用红色和绿色荧光染料分别标记人和鼠细胞膜上的蛋白质,通过观察融合后细胞膜上荧光的分布状况,从而推出细胞膜具有一定的流动性,A正确;B、研究分泌蛋白合成和运输途径的实验,用3H标记亮氨酸,根据放射性标记的物质出现的场所及顺序推测分泌蛋白加工和运输的过程和参与的细胞器,B正确;C、用15N标记大肠杆菌的DNA分子,通过密度梯度离心法分离含有不同相对原子质量氮元素的DNA,根据重带、中带和轻带的比例分析,DNA的复制方式为半保留复制,C正确;D、在噬菌体侵染大肠杆菌的实验中,分别用含有放射性同位素35S和32P的培养基培养大肠杆菌,进而标记T2噬菌体,D错误。故选C。5.关于酶及其特性的实验设计,下列叙述正确的是()A.探究温度对酶活性的影响,可利用淀粉酶、淀粉和斐林试剂设计实验

3B.探究酶的专一性,可利用淀粉酶、淀粉、蔗糖和碘液设计实验C.探究pH对酶活性影响的实验步骤:加底物→调pH→加酶→混匀→观察D.探究酶的高效性,因作用机理不同,加酶组比加FeCl3组产生的气体量多【答案】C【解析】【分析】酶是由活细胞产生的具有催化作用的有机物,绝大部分酶是蛋白质,少数是RNA。酶具有专一性、高效性和作用条件温和的特性。【详解】A、探究温度对酶活性的影响时,温度是自变量,而使用斐林试剂需要水浴加热。故可利用淀粉酶、淀粉和碘液来设计实验,A错误;B、淀粉遇碘液变蓝,但碘液不能检测蔗糖,而蔗糖和淀粉水解的产物都是还原糖。故探究酶的专一性,可利用淀粉酶、淀粉、蔗糖和斐林试剂设计实验,B错误;C、探究pH对酶活性影响,自变量是pH,实验步骤为:加底物→调pH→加酶→混匀→观察;由于酶具有高效性,不可将酶与底物混合后再调节pH,C正确;D、探究酶的高效性(与无机催化剂相比,酶降低的活化能更显著),加酶组比加FeCl3组产生的气体量多。但二者的作用机理均是降低化学反应所需要的活化能,D错误。故选C。6.下列实例中不能用图中曲线表示的是()A.H2O2分解产生O2的量随时间的变化,限制a点的因素是H2O2被消耗完B.水稻种子萌发过程中自由水与结合水比值随时间的变化,a点新陈代谢速率较大C.人成熟红细胞吸收葡萄糖速率随O2浓度的变化,限制a点的因素是膜上葡萄糖载体蛋白数量有限D.绿色植物光合作用速率随光照强度的变化,限制a点的因素是光合作用的色素和酶的数量有限【答案】C【解析】【分析】由图可知纵坐标是随着横坐标的增加在一定范围内增加,到一定程度后不再增加,且曲线的起点不为零。【详解】A、H2O2分解产生O2的量随时间的变化,限制a点的因素是H2O2被消耗完,A正确;

4B、水稻种子萌发过程中自由水与结合水比值随时间的变化,a点新陈代谢速率较大,B正确;C、人成熟红细胞吸收葡萄糖的方式属于协助扩散,不消耗能量,所以人成熟红细胞吸收葡萄糖的速率与О2浓度无关,C错误;D、绿色植物光合作用速率随光照强度的变化,限制a点的因素是光合作用的色素和酶的数量有限,D正确。故选C。二、非选择题7.某课外学习社团为巩固“植物细胞的质壁分离与复原”相关知识,分别进行了甲、乙两组实验:甲组:同学们将紫色洋葱鳞片叶表皮剪成大小相等的若干小块,分别置于不同浓度的KNO3溶液中,制成临时装片,在显微镜下观察到的实验结果如下表所示(“-”表示未发生):叶表皮小块编号ABCDEFKNO3溶液浓度(mol/L)0.110.120.1250.130.140.50质壁分离程度--初始分离分离显著分离显著分离质壁分离复原状况--自动复原自动复原诱发复原不能复原(1)参照表中提供的数据,可推知该洋葱鳞片叶表皮的细胞液浓度大约在______mol/L之间,细胞发生质壁分离的结构基础是______。(2)C和D均发生质壁分离后自动复原,你对这种现象作岀的合理解释是______。乙组:同学们发现洋葱鳞片叶内表皮容易撕取,但内表皮无色透明,实验效果不理想。已知伊红是植物细胞不吸收的红色染料,而中性红能被植物活细胞吸收并进入液泡,死细胞用中性红染色后,不产生液泡着色现象,但可使细胞核染色。下图1、图2和图3是该组观察到的实验现象。请回答下列问题:(3)用添加少量伊红的蔗糖溶液进行洋葱内表皮细胞质壁分离实验,观察到的实验现象最可能的是图______(填数字),该图中红色区域的边缘紧挨着原生质层中的______(填结构名称)。

5(4)若用添加少量中性红的蔗糖溶液对内表皮进行染色,观察到的实验现象如图2所示,其中Ⅰ所指空白处的物质是______,Ⅱ所指的细胞核被着色,而其他结构没有着色,可能的原因是______。【答案】(1)①.0.12~0.125②.原生质层伸缩性大于细胞壁的伸缩性(2)K+和NO3-进入液泡,使细胞液浓度增大而吸水(3)①.1②.细胞膜(4)①.蔗糖溶液②.该细胞已死亡【解析】【分析】1、植物成熟的细胞具有大液泡可以通过渗透作用失水或吸水,当细胞液浓度小于环境溶液浓度时,细胞通过渗透作用失水,由于原生质层的伸缩性大于细胞壁的伸缩性,进而出现质壁分离现象,细胞失水越多,质壁分离的效果越明显;2、发生质壁分离的细胞放在清水中,由于细胞液浓度大于环境溶液浓度,细胞会通过渗透作用吸水,原生质层体积增大,原生质层向细胞壁靠拢,发生质壁分离复原现象;3、若细胞失水过度,细胞会死亡,不再发生质壁分离复原;利用细胞质壁分离实验可以判细胞是死细胞还是活细胞,也可以估测细胞液的浓度,细胞液的浓度介于未发生质壁分离和开始发是质壁分离的溶液浓度之间。【小问1详解】分析表格中的实验结果可知,紫色洋葱叶表皮细胞在0.125mol/L的溶液中发生质壁分离的初始分离,在0.12mol/L的溶液中未发生质壁分离,因此万年青叶表皮细胞的细胞液浓度在0.12~0.125mol/L之间。质壁分离中的“质”是指原生质层,“壁”是指细胞壁,细胞发生质壁分离的结构基础是原生质层伸缩性大于细胞壁的伸缩性。【小问2详解】K+、NO3-是植物细胞需要的无机盐,细胞会主动吸收这些无机盐,K+、NO3-进入细胞液使细胞液浓度增大,使细胞由失水转为吸水,使得C组和D组均发生质壁分离的自动复原。【小问3详解】由题意知伊红是植物细胞不吸收的红色染料,故不能通过原生质层,但可以通过具有全透性的细胞壁,故观察到的实验现象最可能的是图1,该图中红色区域的边缘紧挨着原生质层中的细胞膜。【小问4详解】图2中Ⅰ表示质壁分离后细胞壁与原生质层之间部分,由于细胞壁具有全透性,因此此部分充满了外界溶液,由题意知中性红能被植物活细胞吸收并进入液泡,清水漂洗后细胞壁与原生质层间隙中的物质是蔗糖溶液,即Ⅰ所指空白处的物质是蔗糖溶液。若细胞的细胞核被着色,而其他结构没有着色,可能的原因是该细胞已经死亡。

68.图1为动物细胞亚显微结构,图2表示葡萄糖、Na+进出小肠上皮细胞过程的示意图,其中a、b、c表示转运蛋白,“□”“▽”的个数代表分子(或离子)的浓度。据图分析回答:(1)图1中_____(填细胞结构名称)与核糖体的形成有关,具有双层膜的细胞结构有_____(填细胞结构名称)。细胞器膜和细胞膜、核膜等结构共同构成细胞的_____。(2)图1中初级溶酶体的形成与_____(填细胞结构名称)有关,图1中的分泌物若是抗体,细胞合成抗体的场所是_____。(3)若要将细胞中的线粒体分离出来,常采用的方法是_____;若图1中分泌物为胰岛素,要研究细胞中该分泌物的合成和运输过程,常采用的方法是_____。(4)图2中的葡萄糖进入小肠上皮细胞的方式是_____,Na+进入小肠上皮细胞的方式是_____,据图2可知膜蛋白具有的功能有_____(答出两点即可)。(5)当动物细胞吸水膨胀后,细胞膜的厚度会变小,说明细胞膜具有_____性。木糖和葡萄糖均为小分子单糖,细胞膜能转运葡萄糖却不能转运木糖,这说明细胞膜具有_____性。【答案】(1)①.核仁②.细胞核/核膜、线粒体③.生物膜系统(2)①.高尔基体②.核糖体

7(3)①.差速离心法②.放射性同位素标记法(4)①.主动运输②.协助扩散(易化扩散)③.运输物质载体、催化作用/运输、催化ATP水解(5)①.流动②.选择透过【解析】【分析】物质跨膜运输方式包括自由扩散、协助扩散和主动运输,自由扩散不需要载体协助,也不需要消耗能量,自由扩散的速率与物质的浓度差呈正相关;协助扩散需要载体协助,不需要消耗能量,自由扩散和协助扩散都是从高浓度向低浓度运输,属于被动运输;主动运输可以从低浓度向高浓度运输,既需要载体蛋白协助,也需要消耗能量。【小问1详解】核仁与某种RNA的合成以及核糖体的形成有关,图1中核仁与核糖体的形成有关,细胞核/核膜、线粒体具有双层膜结构,细胞膜、核膜以及内质网、高尔基体、线粒体等由膜围绕而成的细胞器膜,在结构和功能上是紧密联系的统一整体,它们形成的结构体系,叫做细胞的生物膜系统。【小问2详解】高尔基体与初级溶酶体的形成有关,抗体的本质是蛋白质,细胞合成抗体(蛋白质)的场所是核糖体。【小问3详解】研究各种细胞器的结构和功能,需要将这些细胞器分离出来,要将细胞中的线粒体分离出来,常采用的方法是差速离心法。胰岛素是一种分泌蛋白,可以利用放射性同位素标记法研究其合成与运输的过程。【小问4详解】图2中葡萄糖逆浓度梯度进入小肠上皮细胞属于主动运输,Na+顺浓度梯度进入小肠上皮细胞的属于协助扩散,从图中可知,膜蛋白在分子(或离子)的运输中发挥作用,也催化水解了ATP,故体现了膜蛋白具有运输物质的载体、催化的功能。【小问5详解】动物细胞吸水膨胀时细胞膜的厚度变小,说明细胞膜具有流动性;细胞膜能转运葡萄糖,却不能转运木糖,表明细胞膜具有控制物质进出细胞功能,体现了细胞膜的选择透过性。9.霍乱是因摄入被霍乱弧菌污染的食物或水而引起的一种急性传染病,患者往往剧烈腹泻。霍乱弧菌可粘附于小肠黏膜上皮细胞,产生霍乱肠毒素。霍乱肠毒素是一种蛋白质,由一个A亚单位和多个B亚单位组成,A亚单位又含有A1和A2两条多肽链,A1催化ADP-R的合成。ADP-R修饰可以改变蛋白质的活性。霍乱肠毒素的作用机理如下图所示。

8(1)霍乱弧菌与人体细胞最本质的区别是_____,霍乱肠毒素在核糖体上经过_____反应合成。(2)据图分析:霍乱肠毒素作用于肠细胞膜表面并进入细胞的过程中B亚单位的作用是_____________;ADP-R发挥作用并进一步引起患者腹泻的机理是_____________。(3)为了减少霍乱患者腹泻次数并有效缩短病程,临床上常使用多西环素、诺氟沙星等广谱杀菌药来清除病原菌。请结合题图信息,提出一个减轻霍乱患者腹泻症状的新思路_____。【答案】(1)①.无以核膜为界限的细胞核②.脱水缩合(2)①.和小肠黏膜上皮细胞上GM1受体结合,同时将A亚基释放进入细胞内②.ADP-R与GS蛋白特异性结合,活化腺苷酸环化酶产生CAMP,促进无机盐排出,使肠腔渗透压升高,最终导致肠腔大量积液和腹泻(3)抑制腺苷酸环化酶的活性或降低细胞内cAMP的含量或抑制细胞离子通道【解析】【分析】题图分析:霍乱肠毒素以B亚基和小肠黏膜上皮细胞上GM1受体结合,同时将A亚基释放进入细胞内,A亚基的A1单位催化ADP-R的合成,ADP-R与GS蛋白特异性结合,活化腺苷酸环化酶催化ATP生成cAMP,促进Na+、Cl-、H2O,K+、HCO3-排出体外引起腹泻。【小问1详解】霍乱弧菌是原核生物,人是真核生物,霍乱弧菌与人体细胞最本质的区别是无以核膜为界限的细胞核,霍乱肠毒素是一种蛋白质,在核糖体上经过脱水缩合反应合成。【小问2详解】霍乱肠毒素作用于肠细胞膜表面并进入细胞的过程,体现了细胞膜的选择透过性功能,B亚基和小肠黏膜上皮细胞上GM1受体结合,同时将A亚基释放进入细胞内,ADP-R作用是与GS蛋白特异性结合,活化腺苷酸环化酶产生CAMP,促进无机盐排出,使肠腔渗透压升高,最终导致肠腔大量积液和腹泻。【小问3详解】根据霍乱发病机理,可通过抑制腺苷酸环化酶的活性或降低细胞内cAMP的含量或抑制细胞离子通道等措施来治疗霍乱。10.

9胰脂肪酶是肠道内脂肪水解过程中的关键酶,板栗壳黄酮可调节胰脂肪酶的活性进而影响人体对脂肪的吸收。为研究板栗壳黄酮对胰脂肪酶活性的影响,科研人员进行了下列实验:在酶量一定且环境适宜的条件下,检测了加入板栗壳黄酮对胰脂肪酶酶促反应速率的影响,结果如图1。请回答下列问题。(1)图1曲线可知板栗壳黄酮对胰脂肪酶活性具有___________作用(填“促进”或“抑制”)。(2)图2中A显示脂肪与胰脂肪酶活性部位结构互补时,胰脂肪酶才能发挥作用,因此酶的作用具有____________性。图2中的B和C为板栗壳黄酮对胰脂肪酶作用机理的两种推测的模式图。结合图1曲线分析,板栗壳黄酮的作用机理应为_______(填“B”或“C”)。(3)为研究不同pH条件下板栗壳黄酮对胰脂肪酶活性的影响,科研人员进行了相关实验,结果如图3所示。①本实验的自变量有_______________。(需答出两点)②由图3可知,加入板栗壳黄酮,胰脂肪酶的最适pH变______________。③若要探究pH为7.4条件下,不同浓度的板栗壳黄酮对胰脂肪酶活性的影响,实验的基本思路是:在pH7.4条件下,设置一系列板栗壳黄酮的______________,分别测定对照组与加入板栗壳黄酮组的酶活性,并计算其差值。【答案】(1)抑制(2)①.专一②.B(3)①.是否加入板栗壳黄酮和不同pH②.大③.浓度梯度【解析】【分析】1、酶是由活细胞产生的具有催化活性的有机物,其中大部分是蛋白质、少量是RNA。2、酶的特性。①高效性:酶的催化效率大约是无机催化剂的107~1013

10倍;②专一性:每一种酶只能催化一种或者一类化学反应;③酶的作用条件较温和:在最适宜的温度和pH条件下,酶的活性最高;温度和pH偏高或偏低,酶的活性都会明显降低。【小问1详解】据图1实验结果显示,加入板栗壳黄酮后酶促反应速率比对照组低,说明板栗壳黄酮对胰脂肪酶活性具有抑制作用。【小问2详解】图2中A显示脂肪与胰脂肪酶活性部位结构互补时,胰脂肪酶才能发挥作用,这说明酶促反应的发生需要酶与底物发生特异性结合,因此酶的作用具有专一性;图2中的B的作用机理显示板栗壳黄酮与酶结合后导致酶的空间结构发生改变,进而使脂肪无法与脂肪酶发生结合,从而实现了对酶促反应速率的抑制,该抑制作用会导致脂肪的分解终止,此种抑制不可以通过增加底物浓度而缓解,C图显示的作用机理为板栗壳黄酮和脂肪竞争胰脂肪酶上的活性位点,从而减少了脂肪与胰脂肪酶的结合几率,进而是酶促反应速率下降,此种抑制可以通过增加底物浓度而缓解,据图1可知,加入板栗壳黄酮组的酶促反应速率低于对照组,且增加脂肪浓度,反应速率依然比对照组低,因此板栗壳黄酮的作用机理应为B。【小问3详解】①本实验的目的是研究不同pH条件下板栗壳黄铜对胰脂肪酶活性的影响,根据实验目的可知,本实验的自变量有是否加入板栗壳黄酮和不同pH。②由图3可知,板栗壳黄酮对胰脂肪酶作用效率最高的pH值约为7.4;加入板栗壳黄酮,胰脂肪酶的最适pH变大,即由7.4变成了7.7。③若要探究不同浓度的板栗壳黄酮对胰脂肪酶活性的影响,则实验的自变量为板栗壳黄酮浓度,因变量为酶促反应速率,因此实验的基本思路是在pH7.4条件下,设置一系列板栗壳黄酮浓度梯度,分别测定对照组与加入板栗壳黄酮组的酶活性,并计算其差值。【生物-选修1:生物技术实践】11.猪、牛、羊或其它哺乳动物的红细胞中含有大量血红蛋白,可以选用这些动物的血液为实验材料来提取和分离血红蛋白。如图表示血红蛋白提取和分离的部分装置和操作方法,请回答下列问题:(1)蛋白质的提取和分离一般分为四步,图甲代表其中的_____。图乙代表向凝胶色谱柱中加样的操作,正确的操作顺序是_____(填图中数字序号)。(2)在进行样品处理时首先要使用_____对红细胞进行洗涤。在该过程中,若___________

11会使白细胞一同沉淀,达不到分离的效果。(3)将洗涤好的红细胞倒入烧杯中,加入___________使红细胞破裂,释放出血红蛋白,再通过离心的方法将血红蛋白从混合液中分离出来。在蛋白质分离过程中,如果红色区带在洗脱过程中_____,说明色谱柱制作成功。(4)通过凝胶色谱法将样品进一步纯化,最后经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。①装填色谱柱时不能有气泡存在,因为_________降低分离效果。②通过凝胶色谱法将样品进一步纯化。最后经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。加入SDS可以使蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率完全取决于_________________。【答案】(1)①.粗分离②.②③④①(2)①.生理盐水##质量分数为0.9%的NaCl溶液②.离心速度过高和时间过长(3)①.蒸馏水和甲苯②.均匀一致地移动(4)①.气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序②.分子的大小【解析】【分析】血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有:(1)样品处理:①红细胞的洗涤(低速短时间离心),②血红蛋白的释放(需要加入蒸馏水和甲苯),③分离血红蛋白(中速长时间离心)。(2)粗分离:①分离血红蛋白溶液,②透析。(3)纯化:调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质。(4)纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。【小问1详解】图甲为蛋白质的粗分离步骤,为透析,透析的目的是去除样品中分子量较小的杂质;图乙代表向凝胶色谱柱中加样的操作,正确的操作顺序是②(调整凝胶面)、③加样处理、④加缓冲液、①洗脱;小问2详解】在进行样品处理时首先要使用生理盐水(质量分数为0.9%的NaCl溶液)对红细胞进行洗涤,目的是去除杂蛋白(去除血浆蛋白),直至上清液不再呈现黄色,表明红细胞已经洗涤干净;若离心速度过高和时间过长会使红细胞与白细胞一同沉淀,达不到分离的效果。【小问3详解】对样品处理时,释放血红蛋白的操作中加入蒸馏水的目的是使红细胞吸水涨破,释放血红蛋白液;然后加入40%体积的甲苯,甲苯能溶解细胞膜,加速红细胞的破裂,在蒸馏水和甲苯的作用下,红细胞破裂,释放血红蛋白液;在蛋白质分离过程中,如果红色区带在洗脱过程中均匀一致地移动,说明色谱柱制作成功,这是衡量色谱柱是否装填成功的标志。

12【小问4详解】①气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果,故在装填色谱柱时不能有气泡存在。

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