小鹅瘟疫苗简介幻灯片

《小鹅瘟疫苗简介幻灯片》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

小鹅瘟疫苗简介KevinBryant

1一小鹅瘟简介小鹅瘟（GoslingPlague，GP）是鹅细小病毒(GooseParvoviruse,GPV)引起的雏鹅和雏番鸭的急性或亚急性的败血性传染病。1956年我国学者方定一于扬州首次发现并分离到GPV。Derzsy病

2小鹅瘟简介本病主要侵害出壳后4～20日龄的雏鹅和雏番鸭，具有传播快，发病率和致死率高的特点。最典型的病变：小肠后段出现整条脱落的上皮渗出物混合凝固而形成长条状或香肠状的栓塞。GPV感染目前无有效的治疗药物，防制本病主要依靠疫苗、高免血清和卵黄抗体。

3小鹅瘟简介对外界因素有强大的抵抗力，能耐受脂溶剂和较高温度的处理。其基因组为单股、线性DNA，大小约为5Kb

4二小鹅瘟疫苗分类1，常规疫苗2，基因疫苗3，高免血清和卵黄抗体

5

6鹅胚化疫苗方定一等于1961年扬州市流行的小鹅瘟分离的毒株，连续通过鹅胚绒毛膜传21代的弱毒株，在当时起到很好的控制作用。缺点：毒力返强

7鸭胚化疫苗猪瘟兔化弱毒疫苗1980年陈伯伦等将小鹅瘟病毒采用鸭胚诱变，使病毒适应鸭胚。优点：1，对母鹅的安全性非常可靠。2，可以避免来自鹅体的潜伏病原带入种蛋和疫苗的危险。3，种蛋来源方便，价格便宜。缺点：鹅鸭之间存在着可相互传递的疾病

8灭活苗优点：不存在毒力返强现象，易于储存和运输缺点：1，死苗通常需要多次接种才能激发有效的免疫记忆2，需用甲醛灭活，还需添加免疫佐剂，这些物质在应用时有一定的毒副作用

9基因疫苗Genevaccine，也称为核酸疫苗或DNA疫苗，是一种携带外源抗原基因的真核重组表达质粒，将其直接注射机体，可在宿主细胞中表达外源基因，诱导特异性的体液免疫应答和细胞免疫应答，达到预防和控制疾病的目的。Wolff等1990年最早报道。

10基因疫苗优点：易于构建，生产成本低;易于嵌入佐剂;安全性好;免疫维持时间长;对于新生动物，能够诱导比较强的免疫反应，不受母源抗体的影响;不会产生抗DNA抗体，能够重复使用等优点

11基因疫苗缺点：1，依赖宿主产生抗原2，宿主细胞内外屏障3，抗原表达量低

12小鹅瘟VP3基因疫苗首先构建了pcDNA-VP3真核表达载体。为了增强其免疫原性，将鹅IL-2基因插到该载体上。为了增加免疫刺激，还插入了一段CpG序列。最后构建成了pcDNA-gIL2-VP3/CpG基因疫苗载体。

13高免血清和卵黄抗体GPV单抗（1989年朱少漩等最早应用）优点：1，治疗效果高于常规抗血清治疗效果。2，避免了因同源血清中可能携带有其它病源微生物而造成的传染危害。3，克服了常规抗血清的效价因免疫原不同或随不同生产批次而异的缺点缺点：抗体与病毒的中和机制常常是复杂多样，单抗的作用又太专一。

14三分离毒的Western-blot鉴定图A图B图1-7GPV分离毒Western-blot结果。M,蛋白质分子量标记;1,正常鹅胚尿囊液;2,GPV-SZM;3,TXG20090622;4,TZJY20100316;5,JTG20100319;6,LDG20100422;7,GPV-JDG;8,WJG20100325;9,ZJG20100318;10,GPV-YZM;11,SYG61-42;12,GPV-CZM;13,SYG6120100225;14,GPV-P.1;15,YZLD20100130118Kd34Kd26Kd19Kd

152病毒尿囊液SDS-PAGE结果图A图B图1-5GPV分离毒SDS-PAGE结果。M,蛋白质分子量标记;1,正常鹅胚尿囊液;2,GPV-SZM;3,TXG20090622;4,TZJY20100316;5,JTG20100319;6,LDG20100422;7,GPV-JDG;8,WJG20100325;9,ZJG20100318;10,GPV-YZM;11,AHTC-42;12,GPV-CZM;13,SYG6120100225;14,GPV-P.1;15,YZLD2010013037Kd25Kd20Kd15Kd100Kd

16图A图B应用抗GPV单抗，对SYG6株第14代细胞毒感染的GEF进行间接免疫荧光实验的结果。A：SYG61株第14代细胞毒感染GEF后的IFA结果:在细胞核内出现特异性的绿色荧光B：未感染病毒的正常GEF的IFA结果：无特异性荧光出现3间接免疫荧光的方法检测病毒的存在

174细胞适应毒引起的CPEGPV适应毒引起的细胞病变（CPE）A:SYG61-g40感染GEF后第五天的光学显微镜照片B:未感染病毒的正常GEF培养第五天的光学显微镜照片图A图B

18毒株代次TCID50结果SYG61-g1510-5.7/0.2mlSYG61-g2010-5.1/0.2mlSYG61-g2510-5.1/0.2mlSYG61-g3010-5.5/0.2mlSYG61-g3510-4.5/0.2mlSYG61-g4010-4.9/0.2mlSYG61-g4510-4.1/0.2mlSYG61-g5010-5.1/0.2mlSYG61-g5510-4.7/0.2mlSYG61-g6010-5.1/0.2mlSYG61-g6510-4.7/0.2mlSYG61-g7010-5.1/0.2ml5细胞毒半数组织感染量（TCID50）的测定

191日龄无母源抗体的雏鹅以105，104，103个TCID50的SYG61接种每组4只雏鹅，颈部皮下注射0.2ml。PBS作为对照。所有鹅混合饲养于同一隔离器中。饲养20天，记录发病和死亡情况。6SYG61对雏鹅的安全性试验

20SYG61对雏鹅的安全性试验结果分组死亡数/饲养数死亡率死亡时间（天）SYG61105个TCID504/4100%第6，11，12，12104个TCID503/475%第9，11，12103个TCID500/40%PBS0/40%角弓反张

21SYG61-g70接种鹅胚死亡情况梯度1：101：1021：1031：1041：1051：106死亡数死亡率3/560%1/520%1/520%0/500/500/50经Karber法计算得出SYG61-g70的ELD50为10-1.5/0.2ml。接种GEF前的原始毒SYG61-g0的ELD50为10-6.0/0.2ml。细胞适应的SYG61-g70对鹅胚的致死力，比原始毒SYG61-g0降低了3.16×104倍表2-3SYG61-g0接种鹅胚死亡情况：Table2-3DeathofGooseembryoinoculatedbySYG61梯度1：1041：1051：1061：1071：108死亡数43203死亡率80%60%40%060%

221日龄雏鹅随机采取4只鹅的血液，分离血清。每组20只1日龄雏鹅免疫剂量：分别为5000，2500，1250，625TCID50/羽对照组PBS第5，10，15，20，25天，各组采取4只雏鹅血液，分离血清。7SYG61-g70诱导雏鹅产生中和抗体情况

23注射SYG61后雏鹅体内抗体变化情况纵轴所标数值为以10-1为底数

248SYG61免疫雏鹅的攻毒保护实验SYG61免疫1日龄雏鹅，5天后用102.1个LD50的JTG20100319病毒进行攻毒。

25SYG61免疫雏鹅的攻毒保护实验结果TheresultsofSYG61protectinggoslinginjectedJTG20100319分组死亡数/饲养数死亡率5000个TCID500/50%2500个TCID500/50%1250个TCID500/50%625个TCID500/50%正常对照0/50%强毒对照4/580%表明625个TCID50的SYG61就能保护住至少100个LD50的分离毒JTG20100319的感染

26欢迎多提宝贵意见