动物细胞工程ppt课件

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1、专题2.2动物细胞工程知识目标：1、简述动物细胞培养的过程2、动物细胞培养的特点3、细胞株与细胞系的区别4、动物细胞培养的条件5、简述动物细胞培养的应用6、图示体细胞核移植的过程7、体细胞核移植选什么作受体细胞？为什么？知识目标：8、促进动物细胞融合的方法？9、单克隆抗体的制备过程10、传统抗体与单克隆抗体的特点11、杂交瘤细胞的特点12、10代以内的传代细胞具有什么特点？动物细胞工程的基本技术动物细胞培养动物细胞核移植动物细胞融合单克隆抗体制备动物细胞工程2003年４月７日下午，12岁的四川简阳少年小林放学路上捡了些

2、鞭炮，并把里面的火药抖出来，蹲在地上将其点燃，导致面部、四肢不幸被严重烧伤并感染，在当地医院治疗半月后，于4月22日转入武警四川消防总队医院烧伤整形科。为了挽救儿子的生命，小林的爸爸、妈妈向医生恳求：“割我们的皮给儿子吧！”烧伤整形科主任魏平经不起这份亲情的重托，最终“妥协”了：同意进行这种国内极其罕见的亲体皮肤移植手术。.细胞培养图阅读资料儿子捡鞭炮严重烧伤感染，父割千块皮肤思考一下！1、小林在皮肤烧伤之后，很容易得病，为什么？2、皮肤在我们人体当中是第几道防线，其他几道防线是什么？3、选取植皮时，理论上

3、选择谁的皮肤最好？为什么？4、自身的健康皮肤是有限的，能不能通过其他途径获得自身的皮肤？缺少皮肤的保护作用第一道防线，第二道防线是溶菌酶、吞噬细胞等，第三道防线是细胞、体液免疫系统自己的，不发生免疫排斥反应动物细胞培养一、动物细胞培养1、概念：就是从动物机体中取出相应的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。原理：细胞增殖2、过程①取材：选取动物胚胎或幼龄动物的组织、器官（分裂能力强）②分散成单个细胞：用胰蛋白酶(PH:8-9)或胶原蛋白酶一、动物细胞培养③制成细胞悬液：用培养液将分散的细

4、胞制成细胞悬液；④原代细胞培养：动物组织消化后的初次培养；⑤传代细胞培养：贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理后分瓶继续培养，让细胞继续增殖；一、动物细胞培养动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液胰蛋白酶10代细胞原代培养40-50代细胞传代培养细胞株无限传代细胞系单个细胞加培养液遗传物质未改变遗传物质已改变3、动物细胞培养过程的基本概念①细胞贴壁：细胞在培养过程中，分散的细胞贴附在瓶壁上。②接触抑制：贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖；一、动物细胞培养细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最

5、后形成一个单细胞层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。贴壁生长、接触抑制细胞贴壁过程■培养瓶或培养皿壁要求：表面光滑、无毒、易于贴附。3、动物细胞培养过程的基本概念③细胞株：细胞在传代培养中，传到10代左右就不容易传下去，少数细胞度过危机可继续传下去，这些存活细胞能传40—50代，这种传代细胞叫细胞株，其遗传物质没有改变。④细胞系：极少数细胞株细胞度过危机，遗传物质改变，带有癌细胞特点，可无限制的传下去，这部分细胞叫细胞系。(1)为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？答：因为这些

6、组织或器官，分裂能力旺盛，易于培养。讨论（过程）(2)为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？答：成块组织中细胞与细胞靠在一起，限制了细胞的生长和增殖，且细胞不能与培养液充分接触，不利于培养。(3)胰蛋白酶的作用是什么？由此可说明细胞间的物质是什么成份？能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？答：催化蛋白质水解。细胞间的物质主要是蛋白质(胶原蛋白等)。不能。因为两者的最适pH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适pH较接近。讨论（过程）（4）目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常在10代以内，为什么？因为10代以内的细

7、胞遗传物质不改变，保持正常二倍体核型。（5）用胰蛋白酶处理不会把所培养的细胞消化掉吗？控制好时间！长时间处理当然会损伤细胞。4、动物细胞培养条件①无菌、无毒环境可以培养基中加一些抗生素，以防培养过程的污染；定期更换培养液，以便清除代谢产物，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害；一、动物细胞培养②营养条件:水、无机盐、葡萄糖、氨基酸（作为氮源）、生长因子、维生素等；可加血清、血浆等天然成分。一、动物细胞培养③温度和PH值温度：36.5±0.5OCPH：7.2—7.4④气体环境95%氧气:细胞代谢所需;5%二氧化碳:维持培养液

8、的PH值;一、动物细胞培养5、实际应用①大规模生产生物制品，如单克隆抗体;②基因工程的受体细胞;③培养的动物细胞用于检测有毒物质;④培养正常或病变细胞，用于生理、药理、病理研究;一、动物细胞培养获得细胞细胞的全能性细胞株、细胞系植物体培养结果或细胞分泌蛋白快速繁殖、培育无病毒植株等培养目的葡萄糖、动物血清蔗糖、植物激