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时间:2018-08-31
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1、专题2细胞工程动物细胞工程单克隆抗体等动物细胞培养动物细胞核移植动物细胞融合是其他动物细胞工程技术的基础。动物细胞工程常用的技术1、动物细胞培养从动物机体中取出相关组织,将它们分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。1.1概念2.2.1动物细胞培养和核移植技术1、植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗?2、动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的吗?没有是思考题3、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢?4、如何将动物组织分散成单个的细胞呢?成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增殖先用剪刀剪碎,后用蛋白酶处理。思考题6、细胞膜的主要成份是什
2、么?蛋白质和磷脂5、胰蛋白酶的作用是什么呢?由此可说明细胞间的物质是什么成份?胰蛋白酶水解蛋白质细胞间的成份是蛋白质7、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗?能8、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗?为什么?不能,因为两者的最适pH不同,而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适pH较接近思考题9、动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒?易于培养细胞贴壁,进行生长增殖10、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖?当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞分裂就会停止分裂增殖,这种现象叫接触抑制。11、如此时细胞数量并未达到人们的需求,应该怎样办?将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理,然后继续增殖。这
3、样的过程叫做传代培养思考题12、传代培养的细胞能一直传代下去吗?13、有些为何能一直传下去?不都能发生突变,朝着癌细胞方向发展思考题14、人类一般保存的是哪类细胞呢?为什么?保存10代以内的细胞,因为10-50部分细胞的细胞核型可能发生变化,有少部分还发生突变向癌细胞方向发展。思考题15、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体?不能,动物细胞培养只能使细胞数目增多,不能发育成新的动物个体思考题1.2动物细胞培养过程胚胎或幼龄动物的组织器官比老龄动物的组织细胞增殖能力强,有丝分裂旺盛。分化程度越低,繁殖能力越强,越容易培养。剪碎胰蛋白酶1.2动物细胞培养过程胚胎或
4、幼龄动物的组织器官细胞悬液动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质,将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。细胞贴壁过程1.2动物细胞培养过程胚胎或幼龄动物的组织器官细胞悬液剪碎胰蛋白酶原代培养贴壁生长接触抑制传代培养洗涤、稀释、分离原代细胞原代培养:从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,配制成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养,称为传代培养。3、有关概念:1.2动物细胞培养过程胚胎或幼龄动物的组织器官细胞悬液剪碎胰蛋白酶原代培养贴壁生长接触抑制传代培养洗涤、稀释、分离原代细胞传代细胞10代以内,保持正常二倍体
5、核型1.2动物细胞培养过程胚胎或幼龄动物的组织器官细胞悬液剪碎胰蛋白酶原代培养贴壁生长接触抑制传代培养洗涤、稀释、分离原代细胞传代细胞细胞增殖缓慢,核型可能变化动物细胞培养不能最终培养成生物体原代培养和传代培养细胞悬浮液10代细胞50代细胞无限传代原代培养传代培养多数组织细胞固定在表面生长和分裂随细胞增多,细胞就会停止分裂增殖多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中,根据你所学的内环境的知识,思考以下问题:1.体外培养细胞时需要提供哪些物质?2.体外培养的细胞需要什么样的环境?葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等。适宜温度、PH和气体环境;无菌、无毒环境讨论1.3动物细
6、胞培养的条件1.无菌、无毒的环境2.必须的营养物质(葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、激素、促生长因子、动物血清等。)思考:为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清?血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等。血清激素有胰岛素、生长激素等及多种生长因子。血清中还含有多种未知的活性物质,能促进细胞的生长、增殖和贴附。3.适宜的温度:36.5±0.5度4.充足的氧气和适宜的酸碱度:O2和CO2(95%空气和5%CO2)1.3动物细胞培养的条件植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养原理培养基性质培养基特有成分培养结果培养目的植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项
7、目植物组织培养动物细胞培养原理细胞的全能性细胞增殖培养基性质固体培养基液体培养基培养基特有成分蔗糖植物激素葡萄糖动物血清培养结果植物体细胞群体培养目的快速繁殖、培育无病毒植株等获得细胞或细胞分泌蛋白等大规模培养生产生物制品(病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体)作为基因工程中的受体细胞培养的动物细胞可以用于检测有毒物质,判断某种物质的毒性为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据应用:2.动物细胞核移植技术和克隆动物将动物的一个细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成为一个新的胚
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