学位（毕业）论文题目穹窿海马伞切割大鼠海马内brn-4

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1、南通大学硕士学位论文中文摘要学位（毕业）论文题目：穹窿海马伞切割大鼠海马内Brn-4mRNA的表达变化人体解剖学和组织胚胎学专业2003级硕士生姓名：王磊指导教师：金国华教授摘要目的：观察切割穹窿海马伞大鼠海马与正常海马内Brn-4mRNA表达的差异，探讨穹窿海马伞切割后海马内神经再生与修复的分子生物学机制。方法：（1）RT-PCR：42只SD大鼠随机分成7组，每组6只。1组为正常对照组，其余6组分别为切割双侧穹窿海马伞后1、3、7、14、21和28d组。取各组大鼠的海马组织，提取总RNA，采用半定量RT-PCR法分析穹窿海马伞切割后海马内Brn-4mR

2、NA表达水平的变化。以各泳道中Brn-4与GAPDH条带的光密度比值表示Brn-4mRNA的相对表达量，使用Stata7.0统计学软件进行单因素方差分析和两两比较。（2）原位杂交：取6只SD大鼠，切割右侧穹窿海马伞。切割后14d，灌注固定，制备海马部位冰冻切片；采用体外转录法制备地高辛标记的Brn-4RNA探针，进行原位杂交，观察两侧海马组织内Brn-4mRNA的表达变化。每只动物取前、中、后3张切片，分别对每张切片切割侧和正常侧Brn-4mRNA阳性细胞进行计数和光密度值检测，并应用Stata7.0统计学软件对两侧Brn-4mRNA阳性细胞的数量和平均

3、光密度值进行配对t检验分析。结果：（1）海马内Brn-4mRNA的表达量在正常组为0.138±0.06，在切割后第3d（0.256±0.54）开始升高，14d（0.719±0.124）达到最高水平，随后下降，28d（0.189±0.059）左右恢复至正常水平。（2）切割侧和正常侧海马-4-南通大学硕士学位论文中文摘要锥体细胞层和齿状回颗粒层细胞均有Brn-4mRNA表达，Brn-4mRNA阳性细胞数量无明显差异，但切割侧Brn-4mRNA阳性细胞的平均光密度值（0.27±0.06）较正常侧（0.14±0.02）明显增加，t值为11.4709，P<0.01

4、。在切割侧齿状回门区和颗粒下层中观察到Brn-4mRNA阳性细胞（40.5±9.37），平均光密度值为0.28±0.05，而正常侧仅有少量阳性细胞（6.5±2.07），且平均光密度值仅为0.09±0.02，两侧阳性细胞数和平均光密度值相比较，P均<0.01。结论：切割穹窿海马伞后的海马组织内Brn-4mRNA表达明显上调，并且呈现由低到高再逐渐恢复正常，切割后14d时最高的时相性特点；Brn-4mRNA的表达见于切割侧和正常侧海马锥体细胞层和齿状回颗粒层细胞，但Brn-4mRNA的表达量切割侧明显高于正常侧；Brn-4mRNA的表达还见于切割侧和正常侧齿

5、状回门区和颗粒下层的细胞中，其阳性细胞数和表达量切割侧远较正常侧明显升高。提示切割穹窿海马伞后海马中Brn-4mRNA表达的增高可能与促进其中的神经干细胞向神经元分化有关。[关键词]穹窿海马伞切割；海马；Brn-4；逆转录－聚合酶链反应；原位杂交；神经干细胞；神经元；分化；大鼠-4-