低温胁迫下茶树花粉管相关基因的分离与表达分析

《低温胁迫下茶树花粉管相关基因的分离与表达分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号学号南复羞犬夸硕士学位论文低温胁迫下茶树花粉管相关基因的分离与表达分析蒋芯指导教师黎星辉教授干花专业名称茶学研究方向茶树育种与栽培答辩日期二一三年六月ISOLATIONANDEXPRESSIONOFGENESINTEA(Camelliasinensis(L.)O.Kuntze)POLLENTUBEUNDERCOLDSTRESSbyJiangXinSupervisedbyProf.LiXinghuiAssociate-ProfessorWangYuhuaTheDissertationSubmittedtoNanjingAgric

2、ulturalUniversityInPartialFulfillmentoftheRequirementsForMasterDegreeofAgricultureSciencesCompletedinApril,2013CommencementinJune,2013原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中己经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律

3、结果由本人承担。学位论文作者(需亲笔)签名：挤芯年月对日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权南京农业大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密口,在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密口。请在以上方框内打“,、学位论文作者(需亲笔)签名：稗卞、年月曰导师(需亲笔)签名目录目录录第一章文献综述花粉、花粉萌发及花粉管生长花粉

4、、花粉萌发及花粉管生长低温对花粉及花粉管的影响花粉萌发与花粉管生长的分子水平研究技术在植物基因差异表达分析上旳应用技术技术的关键技术在植物基因差异表达分析上的应用植物丙酮酸脱氢酶复合物类钙调蛋白的研究现状植物丙酮酸脱氧酶复合物研究现状植物中类钙调蛋白研究现状研究目的意义与技术路线研究目的及意义本研究的技术路线第二章低温胁迫下茶树花粉管差异分析材料与方法材料实验方法实验结果及分析低温对茶树花粉萌发及花粉管生长的影响茶树花粉管提取差异分析低温胁迫下茶树花粉管相关基因的分离与表达分析讨论第三章茶树丙酮酸脱氢酶亚基基因克隆及表达分析材料与方

5、法材料实验方法实验结果与分析基因的克隆推导的氨基酸序列的同源性及系统进化分析的生物信息学分析基因的时空特异性表达分析讨论第四章茶树类钙调蛋白基因的克隆及表达分析材料与方法材料实验方法实验结果与分析基因的克隆推导的氨基酸序列的同源性及系统进化分析的生物信息学分析基因的时空特异性表达分析讨论離参考文献顏攻读学位期间发表的学术论文隨摘要低温胁迫下茶树花粉管相关基因的分离与表达分析摘要原产于热带及亚热带,是一种喜暖喜湿的叶用植物。近年来全球气候变化异常,春茶频繁的遭遇低温灾害,进而造成产量减少、品质下降和上市时间推后等问题,严重影响了春季名

6、优茶的生产和经济效益。与大多其它被子植物花粉(如百合)不同,茶树花粉管在低温下仍能萌发、生长。本实验利用的方法进行茶树花粉管低温胁迫下基因差异表达分析,获得低温胁迫下表达的差异片段,并对这些片段进行分析,克隆获得与低温胁迫下茶树花粉管生长相关的基因,并对这些基因的序列、生物信息学及相关功能进行初步分析。具体研究结果如下：利用技术构建茶树花粉管低温胁迫下基因差异表达图谱。比较了常温培养和低温胁迫下茶树花粉管基因表达差异,结果表明两者存在明显差异。选择性回收了条差异条带,克隆测序,并与数椐库中的序列进行比对,其中有个序列与已知功能的蛋白

7、序列有一定程度的相似有个功能未知。其中与完菁的丙同酸脱氢酵亚基高度相似与葡萄巧沿的类钙调蛋白具有较高的同源性与茶树的蛋白相似；与舊麻的磷脂酶有相似性与葡萄沿的硫氧还原蛋白相似；与矮奪午的…半乳糖苷酶相似。根据前期获得的差异片段通过比对显示与其他物种的丙酮酸脱氢酶亚基高度相似,通过’’分别获得其’’端序列,从而获得该基因的序列全长,命名为茶树基因,登录号为。利用荧光定量技术分析显示,该基因在花粉中高度表达；在花粉培养过程中,在花粉萌发分钟时表达量最高,即花粉萌发时期沐合状态,而花粉管生长时期培养、、其表达基本保持不变。艮据前期获得的差

8、异片段,通过比对显示与其他物种的类钙调蛋白具有较高的同源性,通过’’分别获得其’端序列,从而获得该基因的全长,命名为茶树基因,登录号为。荧光定量技术分析显示,该基因在花粉中大量表达；在花粉培养过程中,的表达量在花粉中表达量最高,随着培