利用啤酒酵母提取rna的氨法工艺研究

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1、精品毕业论文目录0.题目…………………………………………………………………………………2一.前言………………………………………………………………………………2二.正文………………………………………………………………………………21.材料…………………………………………………………………………………22.方法…………………………………………………………………………………32.1啤酒酵母RNA含量的测定………………………………………………………32.2氨法破壁工艺……………………………………………………………………32.3沉淀提取RNA

2、……………………………………………………………………42.4核酸纯度测定……………………………………………………………………43.结果…………………………………………………………………………………43.1啤酒酵母泥的核酸含量测定……………………………………………………43.2不同酵母浓度对RNA提取率的影响……………………………………………43.3不同氨浓度对酵母RNA提取率的影响…………………………………………53.4　分步沉淀法去除蛋白质试验…………………………………………………54.结论……………………………………………………

3、……………………………6三.致谢………………………………………………………………………………7四.参考文献…………………………………………………………………………8精品毕业论文利用啤酒酵母提取RNA的氨法工艺研究摘　要：采用氨法破壁提取RNA，当酵母质量分数为10%，氨为1.0%时，采用分步沉淀法，调蛋白质的等电点后，再加入复合蛋白质沉淀剂去除蛋白质，可获得纯度在83%的优质酵母RNA，核酸的提取率是干酵母的2%以上。关键词：啤酒酵母；RNA；氨法工艺StudyonBeerYeastRNAExtractionwithAmmoniaM

4、ethodAbstract:Thecellwallofbeeryeastwasbrokenwithammoniamethod.Thebestyeastandammoniaconcentrationforbreakingcellwas10%and1.0%respectively.Theproteinwasremovedbyregulatingtheisoelectricpointandchemicalagents.ThenthehighqualityyeastRNAwiththepurityof83%wasobtained.KeyWo

5、rds:Beeryeast,RNA,Ammonia,Process　　一、前言酵母含有的较高的核酸（RNA），在医药、食品、化妆品以及农业等行业都有重要的用途。随着我国啤酒业的日益发展，啤酒厂淘汰的废弃啤酒酵母泥不断增多。综合利用大量的废弃啤酒酵母泥提取核酸，不仅可以增加经济效益，还能解决饲料酵母存在高核的问题。RNA的提取方法多有报导［1～3］，但国内用氨法破壁提取核酸的方法较为罕见。目前工业上常用的方法是：食盐法、混合盐法以及氢氧化钠破壁法［4］。由于被淘汰的啤酒酵母菌龄较老，蛋白含量较高而核酸含量较低，因此采用工业上常用的一次

6、沉淀提取工艺［4］，难以获得高纯度的优质核酸（RNA企业质量：经定磷法测定RNA含量≥80%，水分≤8%为优质品，RNA含量≥70%，水分≤8%为一级品）［1］。我们就淘汰的啤酒酵母进行氨法提取工艺研究，旨在为大工业化生产提取核酸，提供切实可行的工艺。二、正文精品毕业论文1　材　料啤酒酵母泥：在徐州工业职业技术学院生物化工实验中心培养，酵母培养基的配制为10克葡萄糖+300ml水+30克干酵母，用葡萄液培养,在1000ml的地烧杯里加10克葡萄糖和100ml蒸馏水中，加热置煮沸，取出冷却置25℃以下，才可以将30克干酵母倒入葡萄糖液

7、培养基中，用玻璃棒稍加搅拌均匀后，然后把烧瓶放在25～30℃的恒温恒湿箱培养，然后经离心，酵母含水量为75%～78%左右。　　标准啤酒酵母RNA：生化试剂，上海生化试剂厂。　　氨水：化学纯（含量25%～28%，），福建三明化工厂产品。　　三氯乙酸：化学纯，北京化工厂。　　三氯化铁：化学纯，北京化工厂。2　方　法2．1　啤酒酵母RNA含量的测定　　高氯酸法：称取一定量的酵母泥，用5%高氯酸在100℃条件下水解破壁15min，3600r/min离心15min，取其上清液，用752-G紫外分光光度计测定，波长260nm、280nm，石英比

8、色皿，光程1cm。　　研磨破碎法：称取一定量的酵母泥，加入适量石英砂置于研钵中，研磨数十分钟，3600r/min离心15min，取其上清液，用752-G紫外分光光度计测定，波长260nm、280nm，石英比色皿，光程1cm。2．2　氨