啤酒酵母中RNA、β（1，3）D葡聚糖和蛋白质的提取及应用研究

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2、规定。论文作者签名：导师签名：毪签盘彩声日期：旦垃山东农业大学硬士学位论文摘要啤酒酵母营养丰富，蛋白质48．8％，赖氨酸含量较高；B．(1，3)-D．葡聚糖290．6，是生物多糖中最具抗癌活性的多糖物质；RNA2．67～10．O％，在医药、食品化妆品以及农业等行业中具有重要的用途。我国是世界第一大啤酒生产国，年产干燥废啤酒酵母lO万多吨。利用啤酒废酵母生产有用物质，既能减少环境污染，又能实现废物的增值增效，延长拓宽产业链条。本文以啤酒酵母为原料，研究了RNA、B．(1，3)-D．葡聚糖和蛋白质的分离

3、、提取方法，主要研究结果如下：l以啤酒酵母粉为试验原料，稀碱法提取RNA，最佳提取条件为；NaOH浓度O．4％、温度100℃、时间lh、碱料比15mL：lg、醇料比10mL：lg；RNA提取率为5．25％，RNA含量为83．8％。2对比不同的争(1，3)．D-葡聚糖提取方法，确定碱．酶法提取啤酒酵母粉中的B．(1，3)．D．葡聚糖。最佳提取条件为：NaOH浓度3％、温度80℃、时间2h、碱料比15mL：lg、碱性蛋白酶600U／g；争(1，3)·D·葡聚糖提取率13．8％、含量85．20．6，粘均分

4、子量为192KD；薄板层析显示，提取物水解后只含有葡萄糖；红外光谱分析证明，提取物是纯度较高的13-(1，3)．D．葡聚糖．3分步法提取蛋白质，第一步，RNA提取后离心上清液中pH4．2～4．5沉淀蛋白质，第二步，p．(1，3)-D．葡聚糖提取后离心上清液中pH3．8～4．1沉淀蛋白质。蛋白质提取率13．2％、粗蛋白含量79．1％．氨基酸全分析显示，八种必需氨基酸的含量及组成与FAO标准非常一致．4通过单因素和正交试验，影响}(1，3)-D．葡聚糖水解的各因素顺序依次为：预水解硫酸浓度>水解温度>水

5、解硫酸浓度>水解时间。水解参数为：预水解硫酸浓度12moFL、水解硫酸浓度2mol／L、水解温度100℃、水解时间24h。5试验结果表明：经口给予小鼠酵母13-(I，3)．D．葡聚糖30天后，能提高小鼠足跖肿胀度、抗体生成细胞数，对巨噬细胞吞噬指数无影响。提示13-0，3)．D．葡聚糖具有增强细胞免疫功能、体液免疫功能的作用，对巨噬细胞吞噬功能无影响。对体重无影响。关键词：啤酒酵母，RNA，p-(I,3)-D．葡聚糖，蛋白质，提取AbstraotB鳅yeastisabundantinnutrient

6、s：48．8％ofproteinandhi【ghcontentoffirstlylimitingaminoacids-lysine；29％of队13)-D-Oucanwhichisthemostefficientanti-cancerpolysaccharidescompoundsinbiopolysaccharides；2．67～lO．O％ofImAthatisimportantinmedical。food,cosmeticandagricultureeta1．Chinajsthebiggestb

7、eerproducer,andmorethan100thousandtonsdrybeeryeastisproducedatthe＆Imetime．Makingllseofwastebeeryeasttoproduceusefulsubstancescannotonlydecrea∞environmentalpollutionbutalsoincreasetnemendouseconomicalandsocialbenefitbyextendingthebeerindusUy．Inthispap既9

8、technologyofextraction,isolationandpurificationofRNA,p-(1，3)-D—glu咖andproteinfromwastebeeryeastwasstudied．Themainresultsworeasfollows：1．Usingbeeryeastpowderasmaterial．RNAwasa(In嵋=tedformthembywateryalkalimethod．11圮optimalextractioncondi