阪崎肠杆菌显色培养基说明

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1、中文名称:阪崎肠杆菌显色培养基英文名称:ChromogenicEnterbacterSakazakiiAgar用途:供婴儿奶粉以及其它食品中阪崎肠杆菌的鉴定和计数。(GB4789.40-2010和SN/T1632-2005,ISO标准)图鉴:原理:蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;胆盐抑制革兰氏阳性菌,氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生;显色底物5-溴-4-氯-3-吲哚-ɑ-D葡萄糖苷与阪崎肠杆菌中的α-葡萄糖苷酶发生反应,水解底物,释放出5-溴-

2、4-氯-3-吲哚基显色基团,在淡黄色平板上产生绿-蓝绿色的菌落。配方(每升):胰蛋白胨15g大豆蛋白胨5g氯化钠5g柠檬酸铁铵1g脱氧胆酸钠1g硫代硫酸钠1g5-溴-4-氯-3-吲哚-ɑ-D葡萄糖苷0.1g琼脂15g最终pH7.3±0.2包装:使用方法:1.取瓶内干粉43.1克,加入蒸馏水或去离子水1L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min;冷却至50℃,摇匀倒平板。在室温可保存一天或在冰箱里贮存数天(避光,4℃)。2.取样品333克按MPN三管法分别取100克、10克和1克分装在各三个20

3、00ml、250ml和100ml的三角瓶中,在三角瓶中已装有经45℃预热的9/10(样品为1/10)的无菌蒸馏水或缓冲蛋白胨水,摇匀,在36℃培养18-22小时(SN和FDA方法)。3.各取10ml上述悬浮液加到装有90mlEE肉汤(022160)/mLST-Vm(022212)的150mL的三角瓶中,在36℃/44℃增菌培养18-22小时。4.用划线或涂布法把混匀的肉汤接种到阪崎肠杆菌显色琼脂平板上,35-37℃培养18-24小时。5.可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管试验,对疑似阪崎肠杆菌

4、菌落进行生化鉴定。质量控制:本品倾注平皿后呈淡黄色,下列菌株接种后36±1℃培养18-24小时生长情况如下表:质量控制质控菌株接种量(cfu/平板)生长情况菌落色泽阪崎肠杆菌ATCC5132930–300良好绿-蓝绿色普通变型杆菌HK713230–300良好灰黑色粘质沙雷伯氏菌HK71215000不长-粪肠球菌ATCC292125000不长-贮存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。规格:可配置1L的培养基干粉。

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