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《奶粉中阪崎肠杆菌pcr检测方法研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、INSPECTIONANDQUARANTINESCIENCE检验检疫科学Vol.15No.42005年第4期研究报告奶粉中阪崎肠杆菌PCR检测方法研究高旗利张霞罗茂凰张海滨张海英姚霞张宏伟刘寅黄熙泰(天津出入境检验检疫局,天津塘沽,300456)(南开大学,天津,300071)摘要:目的建立和提出奶粉中阪崎肠杆菌PCR检测方法。方法利用细菌16S和23SrDNA的保守区作为通用引物,对6株阪崎肠杆菌16S~23SrDNA间区序列(ISR)进行了扩增和测序,在比较阪崎肠杆菌与其近源株1
2、6S1~23SrDNA间区序列的基础上,设计了11条阪崎肠杆菌PCR检测引物,组合成30对PCR引物并筛选出一对阪崎肠杆菌PCR检测的特异性引物,建立了奶粉中阪崎肠杆菌PCR检测方法。结果用10株阪崎肠杆菌,18株近源菌验证试验表明,本文所建立的PCR方法特异性强;加菌试验表明,奶粉样品中阪崎肠杆菌检测低限为2.2~5.4cfu/100g,灵敏度高;新建的PCR方法与FDABAM方法比较试验表明,两种方法的检测结果完全符合。结论本文提出的奶粉中阪崎肠杆菌PCR检测方法填补了国内空白,达到了国际先进水平,可在实际工作中推广。关键词:奶粉;阪崎肠杆菌;PCRD
3、ETECTIONOFEnterobactersakazakiiFROMDEHYDRATEDPOWDEREDMILKBYPCRGaoQili,ZhangXia,LuoMaohuang,ZhangHaibinZhangHaiying,YaoXia,ZhangHongwei.LiuYin,HuangXitai(TianjinExit-EntryInspectionandQuarantineBureau,Tianjin,300456)(TianjinNankaiUniversity,Tianjin,300071)Abstract:[Objective]Toestab
4、lishaPCRmethodfordetectionofEnterobactersakazakiiindehydratedpowderedmilk.[Method]Theconservedsequencesin16SrRNAand23SrRNAgenesofbacteriawereusedasapairofuniversalprimerstoamplifythe16S-23Sinterspacerregionof6strainsofEnterobactersakazakii.Onthebasisofcomparativesequenceanalysisofthe16
5、S-23Sinterspacerregions,11primersweredesignedand30pairsoftheseprimerswerecombinedsothatapairofprimersspecificforEnterobactersakazakiiwasscreenedout.Even-tually,weestablishedthePCRmethodfordetectionofdehydratedpowderedmilkfromdehydratedpowderedmilk.[Result]ThePCRmethodestablishedinthisa
6、rticleishighlyspecificandsensitivefordetectionofEnterobactersakazakiithroughthetestingof10strainsofEn-terobactersakazakiiand18strainsofotherrelativebacteriaandartificialinoculation.Thesensitivitycanreachto2.2~5.4cfu/100g.[Conclu-sion]ThisPCRmethod,whichfillsthedomesticblankandreachesto
7、internationaladvancedlevel,shouldbegeneralizedandappliedtoroutinedetection.Keywords:Dehydratedpowderedmilk;Enterobactersakazakii;PCR1前言10人为阪崎肠杆菌阳性,其原因是使用了某批阪崎肠杆菌(Enterobactersakazakii),又名黄色阴Portagen的婴儿配方奶粉,而且在该批奶粉中也检查沟肠杆菌,为肠杆菌科肠杆菌属的一个种,1980年出了阪崎肠杆菌,结果导致Portagen婴儿配方奶粉[1][2]改名为阪
