食品中阪崎肠杆菌的鉴定计数.doc

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1、品种名称：阪崎肠杆菌显色培养基　　阪崎肠杆菌显色培养基用途：　　供婴儿奶粉以及其它食品中阪崎肠杆菌的鉴定和计数。　　阪崎肠杆菌显色培养基使用原理：　　蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;胆盐抑制革兰氏阳性菌，氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生;显色底物5-溴-4-氯-3-吲哚-ɑ-D葡萄糖苷与阪崎肠杆菌中的α-葡萄糖苷酶发生反应，水解底物，释放出5-溴-4-氯-3-吲哚基显色基团，在淡黄色平板上产生绿-蓝绿色的菌落。　　阪崎肠杆

2、菌显色培养基配方(每升)：　　蛋白胨11g　　牛肉膏粉5g　　氯化钠5g　　柠檬酸铁铵　1g　　硫代硫酸钠1g　　胆盐1.5g　　5-溴-4-氯-3-吲哚-ɑ-D葡萄糖苷0.1g　　琼脂15g　　最终pH7.3±0.2　　阪崎肠杆菌显色培养基使用方法:　　1.取瓶内干粉39.6克，加入蒸馏水或去离子水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min;冷却至50℃，摇匀倒平板。在室温可保存一天或在冰箱里贮存数天(避光，4℃)。　　2.取样品333克按MPN三管法分别取100克、

3、10克和1克分装在各三个2000ml、250ml和100ml的三角瓶中，在三角瓶中已装有经45℃预热的9/10(样品为1/10)的无菌蒸馏水或缓冲蛋白胨水，摇匀，在36℃培养18-22小时(SN和FDA方法)。　　3.各取10ml上述悬浮液加到装有90mlEE肉汤()/mLST-Vm()的150mL的三角瓶中，在36℃/44℃增菌培养18-22小时。　　4.用划线或涂布法把混匀的肉汤接种到阪崎肠杆菌显色琼脂平板上，35-37℃培养18-24小时。　　5.可使用MicrogenTMGN-ID或AP

4、I20E或生化管试验，对疑似阪崎肠杆菌菌落进行生化鉴定。　　阪崎肠杆菌显色培养基质量控制：　　阪崎肠杆菌显色培养基倾注平皿后呈淡黄色，下列菌株接种后36±1℃培养18-24小时生长情况如下表：　　质控菌株　　　　　　　　　接种量(cfu/平板)　生长情况　　　菌落色泽　　阪崎肠杆菌ATCC51329　　　　30–300　　　　　良好　　　　绿-蓝绿色　　普通变型杆菌HK7132　　　　30–300　　　　　良好　　　　　灰黑色　　粘质沙雷伯氏菌HK7121　　　5000　　　　　　　不长　　　　

5、　　-　　粪肠球菌ATCC29212　　　　5000　　　　　　　不长　　　　　　　-　　贮存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。　　规格：可配置1L的培养基干粉。