最新血清免疫球蛋白IgG提取幻灯片幻灯片.ppt

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1、血清免疫球蛋白IgG提取幻灯片目的掌握血清免疫球蛋白IgG提取原理；熟悉血清免疫球蛋白IgG提取操作过程和方法原理IgG是血清中主要的免疫球蛋白，占全部抗体含量的70％－75％，在临床免疫学检验技术中常用到的第二抗体就是通过用纯化人IgG作抗原免疫动物而来分离纯化IgG的技术有多种，通常采用综合技术，其中盐析沉淀法常用于IgG的粗制品的提取操作步骤1.25ML血清＋1.25ML生理盐水滴加饱和硫酸铵溶液2.5ML弃去上清液（含清蛋白）沉淀溶于生理盐水,使体积达1.25ML滴加饱和硫酸铵溶液0.625ML弃去

2、上清液（α、β球蛋白）沉淀（γ球蛋白及少量β球蛋白）上清液（β球蛋白）沉淀为γ球蛋白室温静置30min,离心4000rpm,10min重复一遍紫外分光光的计测定蛋白含量沉淀放入透析袋，充分透析，去除NH4+室温静置30min,离心4000rpm,10min注意事项蛋白质的浓度、盐的浓度、PH值、温度对盐析的效果有影响饱和硫酸铵溶液的滴加方式盐析后放置时间、离心操作的速度、时间透析袋的使用方法评价硫酸铵水中溶解度高，受温度影响小，不易使蛋白质变性，操作简单，为盐析中常用的中性盐硫酸铵中含有氮，会干扰蛋白质的测

3、定，且溶液的缓冲能力差，故多用于大量蛋白的粗提。若要获得纯化的免疫球蛋白，必须经过凝胶过滤、离子交换层析和亲和层析进一步提纯结果判断效价可用免疫双扩散试验判断特异性则可通过双扩、免疫电泳或交叉凝集试验进行考察思考题盐析法提取免疫球蛋白的实验原理？盐析法提取免疫球蛋白时，主要的影响因素有哪些？气血精液广东省第二中医院针灸康复科气、血、津液，是构成人体的基本物质，也是维持人体生命活动的基本物质。气、血、津液，是人体脏腑、经络等组织器官生理活动的产物，也是这些组织器官进行生理活动的物质基础。气，是不断运动着的具有

4、很强活力的精微物质；血，基本上是指血液；津液，是机体一切正常水液的总称。从气、血、津液的相对属性来分阴阳，则气具有推动、温煦等作用，属于阳；血和津液，都有是液态物质，具有濡养、滋润等作用，属于阴。气、血、津液的生成，及其在机体内进行新陈代谢，都依赖于脏腑、经络等组织器官的生理活动；而这些组织器官进行生理活动，又必须依靠气的推动、温煦，以及血和津液的滋润濡养。因此，无论在生理还是病理的状况下，气血津液与脏腑、经络等组织器官之间，始终存在着互相依存的密切关系。　　此外，构成人体并维持人体生命活动的基本物质中

5、还有“精”。“精”在中医学理论上的基本含义，有广义和狭义之分。广义之“精”，泛指一切精微物质，包括气、血、津液和从饮食中来的营养物质；狭义之“精”，即通常所说的肾中所藏之精，这种精与人的生长、发育和生殖，都有直接关系。气、血、津液均为构成人体和维持人体生命活动的最基本物质，都离不开脾胃运化的水谷精气，因而气和血，气和津液，血和津液在生理上相互依存、相互制约、相互为用，病理上相互影响，互为因果。一、气的生成（一）生成之源先天之精气自然界之清气水谷之精气肾藏精肺主呼吸脾胃运化人体之气相关脏腑1、肾为生之根2、脾

6、胃为生气之源3、肺为生气之主三、人体之气的运动与气化二、气的分类先天之精气自然界之清气水谷之精气A.元气B.宗气C.卫气D.营气A.元气通过三焦循行全身。具有推动人体生长发育和生殖，激发和调节各个脏腑、经络等组织器官生理功能的作用，为生命活动的原动力。B.宗气积聚于胸中。走息道以行呼吸；贯心脉以行气血；资助元气；与人体的视听言动等机能相关。C.卫气运行于脉外。温养脏腑组织；调节腠理开合，汗液排泄，维持体温的恒定；防御外邪。D.营气运行于脉内。化生血液；营养全身。分布与功能三、血的生成营气津液精髓脾胃运化水谷

7、精微、心肺化赤肾所藏之精四、血的功能一、濡养二、化神面色肌肉皮肤神志活动（血者，神气也）1.面色红润2.肌肉丰满壮实3.肌肤毛发光滑4.甚至活动正常毛发血的濡养功能五、津液的基本概念津液是人体一切正常水液的总称，包括各脏腑组织的内在体液及其正常分泌物，如胃液、肠液、涕、泪、唾等。津液津液性质较清稀，流动性较大，布散于体表皮肤、肌肉和孔窍，并渗注于血脉，起滋润作用。性质较稠厚，流动性较小，灌注于骨节、脏腑、脑、髓等组织，起濡养作用。病理：伤津和脱液六、气与血的关系气对血A.气能生血B.气能行血C.气能摄血气为

8、血之帅血对气A.血能生气B.血能载气血为气之母临床应用：①血虚时，补血＋补气；②血瘀时，活血＋行气③气虚出血时，补气＋止血病理：大出血时，气随血脱七、气与津液的关系气对津液A.气能生津B.气能行津C.气能摄津津液对气津能载气临床应用：①津液不足时，滋阴＋补气；②水液停滞时，利水＋行气③气虚津液流失时，补气＋固津病理：津液大量丢失时，气随津脱“吐下之余，定无完气”气血津液关系示意图气津液血气能生血气能行血气能摄血血