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时间:2021-04-20
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1、第1章:组织学绪论实验室:北实验教学楼三层东侧。注意事项:1.穿隔离衣2.带实验报告册、红蓝铅笔和橡皮,绘图。目录组织学发展简史和当代组织学组织学的学习方法组织学技术简介组织学的内容和意义二、组织学发展简史和当代组织学发展简史:1665年英国人Hooke首先利用显微镜发现细胞(cell)。随后意大利学者、荷兰学者又相继发现了精子、红细胞、肌细胞、神经细胞等。1831年发现了细胞核,对细胞的结构有了初步认识。1838年德国植物学家Schladen(施来登)、1839年动物学家Schwann(施万)分别发现植物和动
2、物都是由细胞组成的,细胞是植物和动物的结构、功能和发生的基本单位。创立了“细胞学说”。二、组织学发展简史和当代组织学19世纪后叶是组织学和细胞学发展的黄金时代,放大倍数较高的显微镜,切片机和各种染料的应用。已能较为正确地描述细胞结构,使组织学发展为一门独立而系统的学科。二、组织学发展简史和当代组织学当代组织学:20世纪后期,新仪器、新技术的发明和应用;免疫组织化学技术、原位杂交技术将组织学引入分子水平;组织工程学技术拓展了组织学的临床应用前景。三、组织学的学习方法审视角度平面与立体形态与功能审视角度组织水平:层
3、次顺序、特征性结构和细胞细胞水平:主要细胞的分布、结构特点及功能亚细胞水平:细胞的超微结构分子水平:主要在生物化学课程讲解平面与立体形态与功能舒张状态收缩状态光镜技术四、组织学技术简介(一)光镜技术石蜡切片术:适用于大多数组织样品的制作。主要步骤:取材→固定→水洗→脱水→透明→包埋→切片→贴片→染色→封片。其它制片方法:适用于某些特殊样品的制作,如涂片法、铺片法、磨片法、火棉胶包埋法等。染色染料性质碱性染料:具有阳电荷。含氨基(-NH2)、二甲氨基〔-N(CH3)2〕等碱性助色团。酸性染料:具有阴电荷。含羧基(
4、-OOH)、羟基(-OH)或磺基(-SO3H)等酸性助色团。光镜技术染色原理嗜碱性:细胞和组织中的酸性物质或结构与碱性染料亲和力强,易被着色。嗜酸性:细胞和组织中的碱性物质或结构与酸性染料亲和力强,易被着色。中性:与两种染料的亲和力均不强。光镜技术染色方法苏木精(hematoxylin):蓝色,碱性染料,可使细胞核和胞质内的酸性物质或结构着蓝紫色。伊红(eosin):红色,酸性染料,可使细胞质、溶酶体等大多数细胞器,以及细胞间质内的胶原纤维等碱性物质或结构着红色。(1)、苏木精和伊红染色(简称HE染色)光镜技术
5、染色方法HE染色苏木精伊红嗜碱性结构:细胞核粗面内质网游离核糖体等嗜酸性结构:细胞质基质溶酶体、线粒体等细胞器胶原纤维等光镜技术染色方法HE染色法以外的所有染色法,通常是为了显示某些用HE染色法显示不出的细胞和结构。如:苏丹法——显示脂肪镀银法——显示神经细胞、嗜银颗粒铁苏木素法——显示心肌闰盘马氏三色法——显示胰岛细胞甲苯胺蓝法——显示糖胺多糖(2)、特殊染色光镜技术四、组织学技术简介几种特殊显微镜的应用荧光显微镜相差显微镜暗视野显微镜倒置显微镜其它:共焦激光扫描显微镜、偏光显微镜、紫外光显微镜、隧道扫描显微
6、镜、X-射线显微镜等。光镜技术电镜技术四、组织学技术简介(二)电镜技术发明:1932年德国学者卢斯卡和科诺尔⒈ 透射电镜术(transmissionelectronmicroscope,TEM)电子束穿透样品(超薄切片)。放大倍数为几万至几十万倍,分辨率可达0.2nm。标本在荧光屏上呈黑白反差的结构影像。被重金属浸染呈黑色的结构,称高电子密度(electron-dense);反之,浅染的部分称低电子密度(electron-lucent)。电镜技术四、组织学技术简介⒉扫描电镜术(scanningelectronm
7、icroscope,SEM)观察组织表面的立体结构。如细胞表面的突起、微绒毛、纤毛及细胞的分泌与吞噬行为等。组织化学术四、组织学技术简介(三)组织化学术(histochemistry):通过化学或物理反应原理显示组织或细胞内化学成分,通常是使其形成有色终末产物,以便在镜下观察,可进行定位和定量。四、组织学技术简介1.一般组织化学术PAS反应(过碘酸希夫反应,periodicacidSchiffreaction)。形成紫红色反应产物,反应显示糖类。Feulgen反应。显示DNA的传统方法,先用稀盐酸处理,使DNA
8、分子中脱氧核糖与嘌吟之间的连接键打开,形成醛基,再与Schiff试剂作用显色,故此反应显示DNA。组织化学术四、组织学技术简介⒉免疫组织化学术(immunocytochemistry)利用组织化学技术的原理,再结合免疫学方法,则为免疫细胞化学术。主要的检测对象为肽和蛋白质。组织化学术四、组织学技术简介组织化学术⒊原位杂交术(insituhybridization)为核酸(DNA和RNA
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