最新(课件)-组织学与胚胎学教学课件 绪论教学讲义PPT.ppt

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1、(课件)-组织学与胚胎学教学课件绪论Dr.JinsongZhou绪论(Introduction)I.什么是组织学(Histology)?组织学是研究人体正常细微结构及其相关功能的科学。A.微观结构:1.光学显微镜(Lightmicroscope，LM):计量单位是微米(μm)。(1μm=0.001mm)。2.电子显微镜(Electronmicroscope，EM):计量单位是纳米(nm)。(1nm=0.001μm)。2光学显微镜基本结构：1.照明灯(Lamp)2.聚光器(Condenser)3.载物台和切片夹(M

2、echanicalstageandspecimenretainer)4.推进器(Mechanicalstageadjustmentknob)5.物镜(Objectives)6.粗细螺旋(Courseandfinefocusknob)7.目镜(Oculars)8.照相机等接口(Connectiontocamera,etc.)3b.石蜡包埋(Paraffinembedding):*脱水(Dehydration):用浓度逐渐升高的酒精(70~100%)将组织中的水完全置换出来。*透明(Clearing):用二甲苯完全置

3、换出酒精。*浸蜡(Infiltration):在60~62◦C时，用液态石蜡完全置换出二甲苯。室温时石蜡凝固成固态，内含待切组织。7c.切片:用切片机将组织切成1~20μm厚的蜡片，然后将其放到温水上，待其完全展开后，裱到有粘附剂的载玻片上。8除切片外，还有其他处理组织的方法：*铺片(Wholemount):用于很薄的组织，如肠系膜。*磨片(Groundsection):用于很坚硬的组织，如骨和牙。*涂片(Smear):用于液态组织，如血液，精液和唾液。92.染色(Staining):染料可以将微观结构显示不同的

4、颜色以便观察鉴别。在染色前，需要脱蜡入水，因为染料是水溶性的。10a.最常用的染料是苏木素(Hematoxylin,H)和伊红(Eosin,E)。*苏木素是碱性染料，蓝紫色，可以使细胞核等着色。被苏木素着色的结构本身为酸性，具有嗜碱性(Basophilic)。11*伊红是酸性染料，粉红色。可以将大多数细胞的细胞质染成红色。被伊红着色的结构本身为碱性，具有嗜酸性(Acidophilic)。*不易被苏木素和伊红着色的结构具有嗜中性(Neutrophilic)。12肥大细胞的颗粒被甲苯铵蓝(一种蓝色染料)染成紫红色b.

5、如果某结构显示的颜色和染料本身的颜色不同，该结构具有异染性(Metachromasia)。c.如果某结构能将银离子还原成银原子，并吸附银原子而使自身显示棕黑色，该结构具有嗜银性(Argyrophilic)。13网状纤维具有嗜银性，因此可以用银盐染色来显示。14H&E染色的中等动静脉d.不同的染色方法，其结果不同。15醛复红染色的中等动静脉16在染色后，重新进入酒精和二甲苯，最后用中性树胶封片，以便长期保存。*切片:固定→梯度酒精→二甲苯→石蜡。*染色:石蜡→二甲苯→梯度酒精→水。*保存:水→梯度酒精→二甲苯→中性

6、树胶。17B.EM技术:1.EM可分为透射电镜(TEM)和扫描电镜(SEM)2类。2.EM的原理和LM相似，但用电子束代替光线，磁场代替玻璃透镜。分辨率约为0.2nm。183.EM的组织的制备与LM的相似，但有以下不同:a.通常使用戊二醛和四氧化锇作双重固定。b.切片超薄(厚度小于90nm)，塑胶包埋。c.用重金属盐如醋酸铀或醋酸铅等染色。因此，所有原始的电镜图片都是黑白的。19SEM显示巨噬细胞表面20TEM显示胰腺腺泡细胞内部结构。21C.特殊的染色方法:1.组织化学(Histochemistry,细胞化学)

7、法:通过生物化学的方法在原位产生不溶解的有颜色的反应产物，来显示微细结构的位置，然后用显微镜观察。PAS反应:用来显示多糖的分布。先用过碘酸(Periodicacid)将多糖氧化，在多糖表面形成戊二醛结构，然后用无色亚硫酸品红(Schiff试剂)还原戊二醛形成紫红色沉淀。22肝脏的PAS染色232.免疫细胞化学(Immunocytochemistry)染色法:a.待测结构或化学物质被看作抗原(Antigen)，通过非常敏感和专一的免疫反应使抗原和被标记的抗体(Antibody)结合，然后显示标记物，在原位产生不溶

8、有色的反应产物，最后用显微镜观察。24b.2种基本染色法:*直接法:第一抗体被标记。*间接法:第一抗体也被看作抗原，而第二抗体被标记。因为信号被放大，因此更加敏感。3.放射自显影(Autoradiography):给细胞所要代谢的物质分子上标记放射性物质如I125等，间隔照相，从而追踪该物质代谢途径。25D.学习组织学应注意的问题:1.体内结构为立体的，三维的，而课本、讲