《组织学绪论》课件

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1、武俊芳组胚教研室电话：0373-3029126组织学与胚胎学HistologyandEmbryology课程安排本学期：理论课48学时（组胚学38学时，胚胎学10学时）实验课20学时。大二：组织病理学实验。必修课70%理论成绩，30%实验成绩。Introduction绪论内容简介组织学与胚胎学研究内容（掌握）常用的技术简介（熟悉）学习方法（了解）一、组织学与胚胎学的研究内容组织学（histology）是研究正常机体细微结构及其相关功能的科学。借助显微镜显微解剖学结构和功能内容：细胞，基本组织，器官和系统1.细胞：结构和功能的基本单位。光镜结构

2、电镜结构2.组织：细胞和细胞外基质构成。4大基本组织：上皮组织、结缔组织肌组织、神经组织3.器官和系统分子亚细胞细胞组织器官系统生物大分子包括核酸、蛋白质、多糖和脂细胞器等超微结构细胞质、细胞核等上皮、结缔、肌组织和神经组织肝、胃等消化系统、呼吸系统等生物学解剖学组织学细胞外基质细胞人体胚胎学（humanembryology）研究人个体发生、发育的规律的科学。研究从受精卵到胎儿的发育过程中复杂的结构和功能变化。组织学与胚胎学的地位和意义以解剖学为基础。结构是功能的基础，学习生理学的基础。学习病理学的基础。学习妇产科学等的基础。二、常用的研究方法

3、（一）显微镜光学显微镜（lightmicroscope，LM）电子显微镜（electronmicroscope，EM）光学显微镜普通显微镜：普通光线荧光显微镜：紫外光或蓝紫光激光共聚焦扫描显微镜：激光电子显微镜：电子束为光源透射电子显微镜扫描电子显微镜裸眼0.2mm，1mm=103µm=106nm光镜放大倍数以千计，电镜放大倍数以万计显微镜不同，所见结构大小不一种类结构分辨率度量单位光镜光镜结构0.2µmµm电镜超微结构0.2nmnm分辨率：人眼分辨两点之间最小距离的能力。普通光学显微镜荧光显微镜激光共聚焦扫描显微镜：激光采用共轭聚焦原理和装置

4、，利用计算机进行数字图像处理。对切片进行连续扫描，对各个层面的结构图像进行3维重建，解决了标本中结构相互重叠的问题。透射电镜扫描电镜（二）常用标本制备光、电镜标本技术离体标本缺陷变腐柔软大块无色变硬冰冻涂铺磨切5-7微米50-80纳米染色化成包埋石蜡树脂扫描电镜：固定、脱水、表面喷镀金属膜相应措施结构染料重金属盐醋酸铀、枸橼酸铅固定光学显微镜甲醛电子显微镜戊二醛锇酸取材—固定—脱水—透明—浸蜡-包埋--切片--染色--脱水—透明—封片常用染色法：苏木素—伊红（HE)显示光镜结构的常用染色法苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosinst

5、aining),简称HE染色染料组织名称化学性质色彩化学性质嗜好着色部位苏木精碱蓝酸嗜碱性细胞核大量核糖体伊红酸红碱嗜酸性大部分成分特殊染色如硝酸银、甲苯胺蓝、醛复红等活体染色台盼蓝活体注射HE染色法银染法：组织浸入硝酸银。亲银性；嗜银性甲苯胺蓝染色：异染性肥大细胞醛复红染色，台盼蓝活体染色透射电镜标本：取材，固定，脱水，包埋，切片，电子染色等染色：重金属盐，醋酸铀和柠檬酸铅电子密度高电子密度低电镜结构图透射电镜结构图扫描电镜结构图三、组织化学和细胞化学技术利用某些化学试剂与组织中某种物质发生反应，反应终产物形成可见的有色沉淀物，间接对某种组织

6、细胞成分的进行定性、定位及定量显示。例如：糖类－－PAS反应（过碘酸希夫反应）脂类－－苏丹染色肝糖原小肠粘原颗粒PAS反应阳性（过碘酸希夫反应）：紫红色脂类—苏丹染色脂肪组织（四）免疫组织化学（immunohistochemistry）利用抗原和抗体结合的原理，用标记的抗体检测　组织中多肽和蛋白质的技术。抗体的标记物荧光素辣根过氧化物酶胶体金光镜或电镜荧光显微镜电镜免疫组织化学（荧光素标记）免疫组织化学（辣根过氧化物酶标记）免疫组织化学电镜像（A胶体金标记B辣根过氧化物酶标记）（五）原位杂交术（insituhybridization)原理：根据

7、ＤＮＡ或ｍＲＮＡ核苷酸碱基互补规律，用已知的被标记碱基序列（核酸探针）,与细胞内待检的ＤＮＡ或ｍＲＮＡ片段进行特异性结合,即杂交,通过标记物的显示，观察待测基因的定位和定量。碱基的标记物１．放射性核素：放射自显影后观察（涂感光乳胶、暗处曝光、显影、定影）２．非放射性：地高辛，免疫组化处理后观察原位杂交放射自显影术（autoradiography）利用放射性核素的可观察和显示性，研究放射性物质在组织或细胞内消长分布的变化来显示细胞的功能状态或该物质在组织和细胞内的代谢过程的方法。将放射性核素或放射性核素标记的物质注入体内，有规律地间断取材、制片，

8、放射性自显影，光镜或电镜观察。放射自显影像(3H-TdR掺入)（六）细胞培养术（cellculture）把机体细胞在体外模拟体内条件下进行培养的技术。