组织学 第1章 绪论

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1、授课人：韩伊林组织学Histology内蒙古基础医学院组织学与胚胎学教研室组织学（histology）：研究正常人体微细结构及其相关功能一门学科。由于借助显微镜观察又称-显微解剖学第一章绪论Introduction一、组织学研究内容：白细胞细胞、组织、器官和系统1、细胞(Cell)：人体形态结构和功能的基本单位。神经细胞肌细胞组成人体的细胞有1×1015个，形态各异约210余种2、组织(Tissue)：四大基本组织：●上皮组织●结缔组织●肌组织●神经组织细胞群+细胞外基质（细胞分泌）3、器官和系统：(Organ&System)几种不同的组织发育分化相互结合

2、→器官。许多功能相关的器官联合在一起→系统。细胞群+细胞外基质组织上皮组织结缔组织肌肉组织神经组织器官和系统人体二、组织学研究方法：（一）一般光镜技术⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎光学显微镜(Lightmicroscope，LM):微米(µm)。(1µm=0.001mm)。2.电子显微镜(Electronmicroscope,EM):纳米(nm)。(1nm=0.001µm)。分辨率：能够区分物体相近两点的最小距离。肉眼分辨率：0.2mm（毫米）光镜（LM）：0.2µm（微米）电镜（EM）：0.2nm（纳米）1、石蜡切片方法：(1)取材:取新鲜的组织块3—5mm3(2)固定

3、:使蛋白质凝固，防止组织细胞自溶和腐败。（3）脱水与包埋：①用酒精逐渐脱去组织内的水分②将组织块放入熔化的石蜡中包埋，冷却后修整成小块状。（4）切片：用石蜡切片机将组织块切成5—10µm的薄片，粘贴在载玻片上，脱去蜡。（5）HE染色:苏木精（Hematoxylin）伊红（Eosin）苏木精细胞核、染色质核糖体染成蓝色——嗜碱性伊红细胞质内蛋白质染成红色—嗜酸性对上述两种染料亲和力不强的—嗜中性。（6）封片：HE染色后，经脱水处理，用盖玻片封存细胞核细胞质2、冷冻切片方法取新鲜组织立即投入到液氮中（-196℃）快速冻结，用恒冷箱切片机制成冷冻切片，可很好的保

4、存细胞内的酶。3、涂片法取血液或分泌物直接涂于玻片上染色后观察。（二）电子显微镜技术1、透射电镜：以电子束穿透样品，经聚合放大后显像于荧光屏上，进行观察和拍摄照片。标本制作：取材固定包埋超薄切片电子染色透射成像用途:观察细胞内部结构图像暗的部位——电子密度高；反之电子密度低。2、扫描电镜取材固定干燥喷金扫描成像用途:观察组织或细胞表面的立体结构红细胞白细胞（三）组织化学方法是利用化学试剂与组织、细胞内的某些物质发生化学反应，在局部形成有色沉淀物。用显微镜观察，并对组织、细胞内的化学成分进行定位、定性和定量的研究。例如：过碘酸希夫氏反应（Periodicac

5、idSchiffreaction,PAS反应）：（显示细胞内糖原或多糖）HIO4糖原乙二醛基+Schiff试剂[O]→紫红色沉淀物（糖原所在部位）小肠上皮杯状细胞的糖蛋白（PAS+）杯状细胞，肝细胞内的糖原（PAS+）（四）免疫组织化学方法蛋白质（抗原）→动物→特异性抗体→提取抗体+荧光染料（标记抗体）；标记抗体+相应组织蛋白质→标记抗体—抗原特异性结合。（抗原分布部位）。抗原抗体荧光素免疫组化（荧光素标记）皮肤毛细血管内皮细胞辣根过氧化物酶标记示胰岛B细胞（五）原位杂交（核酸分子杂交组织化学技术）通过检测细胞内mRNA和DNA序列片段,原位研究细胞合成某

6、种多肽和蛋白质的表达.原位杂交显示脐静脉内皮细胞内的心房钠尿肽（地高辛—碱性磷酸酶标记心钠素）常用的标记物两有两种：1、放射性核素（35S、32P、3H）经放射性自显影技术处理后观察。2、非放射性药物（地高辛）经免疫组化处理后观察32P标记胰岛B细胞cRNA探针原位杂交放射自显影（六）细胞培养将人体或动物的活细胞、活组织在体外培养。（七）组织工程是用细胞培养技术在体外模拟构建组织和器官的技术。三、组织学与胚胎学研究进展（一）干细胞研究与前景干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。特点：在一定条件下，能发育分化成各种功能的细胞；在细胞形态上、生长特征、细胞

7、表面标记、细胞核型等方面都具有一些特性。目前已证实成体中有多种干细胞：生殖干细胞、间充质干细胞、造血干细胞、神经干细胞、皮肤干细胞、肠干细胞等；从胚胎分离的干细胞—胚胎干细胞（全能）。干细胞工程在医药领域的应用：1、生物学研究培养干细胞进行分化调控等研究2、干细胞治疗骨髓移植3、胚胎干细胞→器官雏形→移植（治疗性克隆）放射自显影胃小凹底部的干细胞Thankyou！