最新天然药物提取工艺课件--色谱分离技术教学讲义ppt课件.ppt

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1、天然药物提取工艺课件--色谱分离技术特点色谱分离技术最大的特点：分离效率高能分离各种性质极其类似的物质；应用化学物质的分析鉴定的同时，可用于大量物质的分离纯化制备；如：胰岛素注射药品——以凝胶色谱去除胰岛素中的二聚体什么叫作色谱法：色谱法（chromatography）又称层析法，是利用混合物中各个组分的化学、物理性质的差异，基于被分离物质分子在两相（一为固定相，一为流动相）中分配系数的微小差别进行分离。一、色谱分离技术的基本概念与理论固定相流动相色谱柱被分离组分是色谱分离过程的一个固定介质。可以是固体物质(如吸附剂、凝胶、离子交换剂等），也可以是液

2、体物质（如固定在硅胶、纤维素或树脂上的溶液），这些基质能与待分离的化合物进行可逆的吸附、分配、溶解、交换等作用；它对色谱分离的效果起着关键的作用。1.固定相在层析过程中，推动固定相上待分离的物质朝着一个方向移动的液体、气体或超临界流体等都称为流动相。柱层析中一般称为洗脱剂，薄层层析称为展层剂。它是层析分离中的重要影响因素之一。2.流动相保留时间待分离物质从进样开始到组分流出浓度最大时所经过的时间，称为该组分的色谱保留时间，用tR表示。保留体积待分离物质从进样开始到组分流出浓度最大时所用洗脱液的体积，称为该组分的保留体积，用vR表示。3.保留时间和保留

3、体积死时间非保留溶质从进样开始到流出色谱柱所经历的时间，称为死时间；用t0表示；死体积非保留溶质从进样开始到流出色谱柱所用的洗脱液的体积，称为死体积；用v0表示。4.死时间和死体积调整保留时间某种物质扣除死时间后的在色谱柱上的保留时间称为该物质的调整保留时间；调整保留体积某种物质扣除死体积后的在色谱柱上洗脱所用的洗脱剂的体积称为该物质的调整保留体积。5.调整保留时间和调整保留时间6.容量因子表示某一溶质在色谱柱中任意位置达到平衡后，该溶质在固定相中量和在流动相中的量之比。7.塔板理论色谱柱的理论塔板数越大，塔板高度越小，色谱柱的分离效率越高。8.分配

4、系数在一定的条件下，某种组分在固定相和流动相中含量（浓度）的比值，常用K表示。9.迁移率（比移值）在一定条件下，在相同的时间内某一组分在固定相移动的距离与流动相本身移动的距离之比值，常用Rf表示。10.分辨率（分离度）11.操作容量（交换容量）在一定条件下，某种组分与固定相反应达到平衡时，存在固定相上的饱和容量。操作容量大，与固定相的亲和力越大，加入样量可越大。反之，相反。正相色谱：是指固定相的极性高于流动相在层析过程中，非极性分子或极性小的分子比极性大的分子移动的速度快，先从柱中洗脱出。12.正相色谱和反相色谱反相色谱：是指固定相的极性低于流动相在

5、层析过程中，极性大的分子比极性小的分子移动的速度快，而先从柱中洗脱流出。12.正相色谱和反相色谱根据不同的标准可以分为多类：A.根据固定相基质的形式分类：纸层析：以滤纸为基质；薄层层析：是将基质在玻璃或塑料等光滑表面铺成一薄层，在薄层上进行层析；柱层析：将基质填装在管中形成柱形，在柱中进行层析。13.层析法的分类B.根据流动相的形式分类：液相层析：流动相为液体的层析；气相层析：流动相为气体的层析；13.层析法的分类吸附层析：以吸附剂为固定相，根据待分离物与吸附剂之间的吸附力不同达到分离目的；分配层析：是根据在一个由两相同时存在的溶剂系统中，不同物质的

6、分配系数不同而达到分离目的；C.根据分离原理的不同分类：凝胶过滤层析：以具有网状结构的凝胶颗粒作为固定相，根据物质的分子大小进行分离的一种层析方法；离子交换层析：以离子交换剂为固定相，根据物质的带电性质不同而进行分离的一种层析方法；C.根据分离原理的不同分类：亲和层析：根据生物大分子和配体之间的特异性亲和力，将某种配体连接在载体上作为固定相，而对能与配体特异性结合的生物大分子进行分离的一种层析分离。C.根据分离原理的不同分类：色谱法液相色谱法气相色谱法平板色谱法柱色谱法纸色谱法气液色谱法气固色谱法分配色谱法吸附色谱法离子交换色谱法排阻色谱法超临界流体

7、色谱法亲和色谱法薄层色谱法二、吸附色谱法(adsorptionchromatography)1.原理：吸附色谱为色谱固定相与流动相在相对移动过程中，溶质和溶剂分子在吸附剂表面上的活性位点相互竞争的吸附过程。简单的说:依据吸附剂对混合物中各成分吸附性能的不同，使各成分得到分离。在天然有机化合物分离及精制工作中，吸附现象利用得十分广泛。其中又以固-液吸附用得最多.2.常用吸附剂：硅胶、氧化铝、活性炭、聚酰胺.3.固-液吸附可分为:①物理吸附(表面吸附)：硅胶、氧化铝及活性炭②化学吸附③半化学吸附：聚酰胺层析4.物理吸附的特点：①无选择性;②吸附与解吸是可

8、逆的;③速度快;④实际应用最多。5.化学吸附的特点：①具有选择性；②吸附十分牢固,有时甚至是不可逆的。③化学