化学键合固定相.ppt

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1、液-液分配色谱与化学键合固定相色谱固定相极性>流动相极性正相分配色谱(正相柱)组分极性越大,保留时间越长;使用极性化合物的分离。反相分配色谱(反相柱)固定相极性<流动相极性组分极性越小,保留时间越长;适用非极性化合物的分离。2正相与反相的出峰顺序相反待测物极性:A>B>C利用硅胶表面存在的硅羟基,通过化学反应将有机分子键合到硅胶表面。A.硅氧碳键型:≡Si—O—CB.硅氧硅碳键型:≡Si—O—Si—CC.硅碳键型:≡Si—CD.硅氮键型:≡Si—N化学键合固定相特点:非常稳定,在使用中不易流失。可将各种极性的官能团键合到载体表面,

2、适用于种类繁多样品的分离。ODS(C18)键合相硅胶十八烷基氯硅烷双重分离机制:(键合基团的覆盖率决定分离机理)高覆盖率:分配为主;低覆盖率:吸附为主。硅胶为基质键合的C18填料2.键合固定相类型类型反相柱正相柱氨丙基氰乙基、醚和醇等极性基团不同碳原子数的烷烃(C8和C18)、苯基等疏水基团C8——硅胶键合辛烷基C18——硅胶键合十八烷基C8和C18都是反相色谱柱的一种,适用于分析弱极性的物质,C8适合分析弱极性物质里极性稍强的一类物质,C18适合分析弱极性物质里极性更弱的物质。例:以ODS键合色谱柱、甲醇-水为流动相分离以下两种

3、苯甲酸,试判断出峰次序。没食子酸3,4-二羟基苯甲酸因此,保留时间:<没食子酸3,4-二羟基苯甲酸固定相:非极性;流动相:极性组分极性:3,4-二羟基苯甲酸<没食子酸没食子酸先出峰

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