T细胞表位的研究总结.ppt

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1、第三章T细胞表位Antigen广州医学院免疫教研室黄俊1第一部分T细胞表位的基本概念23抗原结合价Antigenicvalence能与抗体分子结合的抗原表位的总数。半抗原——单价抗原完全抗原——多价抗原表位Epitope抗原决定基AntigenicDeterminant决定抗原特异性的特殊化学基团，是与抗体或抗原受体结合的基本结构单位。1、抗原表位的概念42、抗原表位的类型顺序表位（sequentialepitope)/线性表位由连续性线性排列的短肽构成。构象表位(conformationtialepitope)/非线性表位短肽或多糖残基在序列上不连续性排列，在空间上形成特定的

2、构象。T细胞表位与B细胞表位563、共同抗原表位(commonepitope)不同抗原间含有的相同或相似的表位。交叉反应(cross-reaction)抗体或致敏淋巴细胞对具有相同或相似表位的不同抗原的反应。MHCclassIpeptidesof8-10aminoacidsMHCclassIIpeptidesof>13aminoacidsb2-Ma-chainPeptidea-chainb-chainPeptide4.MHC分子和抗原肽的相互作用抗原肽和MHC相互作用的分子基础锚定残基（anchorresidue）在抗原肽-MHC分子复合物中，抗原肽的两个或两个以上专司和MHC

3、分子结合的氨基酸残基称为锚定残基。YIMHC分子YIMHC分子PSASIKSPSAIKS共用模体MHCI类分子胞外区的结构抗原肽和HLA相互作用的分子基础MHC限制性;CD4与CD8表位的差别；人和其他动物的差别1314T细胞表位的研究方法1.多肽片段的来源降解；表达；人工合成2.MHC分子的结合直接结合；预测3.抗原特异性T细胞的来源感染或者免疫动物或病人筛选方法细胞系的建立4.检测指标活化；增殖；细胞因子；杀伤作用15T细胞表位的研究意义1.检测刺激细胞使用Tetramer技术MHC2.疫苗表位疫苗3.治疗16第二部分SARS-CoVS蛋白T细胞表位的研究171.SARS-

4、CoVSDNA疫苗Zhi-yongYang(NIH)Nature.2004,428(1)2.免疫方法8wfemaleBALB/cprimeatweek050ugDNAboosttwiceatweek3,62-3wafterprime4-6wafterboost1-2wafterboosttoobservetheeffectofprimeimmunizationtoobservetheeffectofboostimmunizationtoobservetheeffectoflongtermimmunization:mousesacrificed50ugDNAi.mi.m3.单细胞

5、悬液的准备淋巴结脾肺剪碎（消化），研磨，200目筛网过滤，裂解红细胞，2×106/ml4.SARS-CoVS蛋白多肽169条,17-19aa,10aa重叠(NIHNIAIDVRC)P1S1-17P2S8-25P3S16-22P168S1200-1216P169S1207-12551.S抗原刺激以后IFN-（图A）和IL-2的产生（图B）结果与讨论Theemptycirclesrepresenttheresultsintheabsenceofpeptidesandsolidcirclesrepresenttheresultsinthepresenceofpeptides.232

6、4Fig.2.VerificationofpotentialSARSCoVSepitopesPotentialSARSCoVSepitopesP50,P51,P59andP60inpool3,andP141,P144,P151andP152inpool8wereusedtostimulatesplenocytesfromSARSCoVSDNAimmunizedBALB/cmice.IFN-γproductionwasdetectedbyELISA(A)andELISPOT(B),respectively.Eachsymbolrepresentstheresultsofanind

7、ividualexperiment(n=3~7).Inaddition,intracellularcytokinestaining(C)wasperformedtodetermineCD4+orCD8+Tcellpopulation.“0”representsthenon-peptidestimulatedcontrol.Numbersatthecornerineachsamplerepresentthepercentageofpositivecells.Representativeresu