cd40l基因修饰的hbeag多t细胞表位dna疫苗的实验研究

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1、答辩委员会主席：吕宾教授答辩委员会成员：郑亮主任医师金嵘教授论文答辩日期：2013年5月26日温州医学院硕士学位论文目录一、缩略词词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2二、摘要1、中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32、英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5三、论文正文1、前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯102、第一部分(1)材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯-12(2)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．23(3)附图1⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯23(4)分析与讨论⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯402、第二部分(1)材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．12(2)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．23(3)附图2⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯23(4)分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．403、，3、结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯，484、参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．495、附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．526、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯537、综述及参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．54温州医学院硕士学位论文APCCD40LCTLCDDCDNAecdELISAEBEDTAFCSFITCFIGM-CSFGFPHBVHBeAgHBsAgHLAILIFNIgGMAbMHCMLR0RFPCRPBSPEPBMCSRTSIT2cellThTNF1tisAntigen-presentingcellCD40ligandCytotoxicityTlymphocyteClusterofdifferentiationDendriticcellDeoxyribonucleicacidExtracellulardomainEnzymelinkedimmunosor

4、bentassayEthidiumbromideEthylenediaminetetraaceticacidFetalcalfserumFluoresceinisothiocyanateIntensityof?uorescenceGranulocyte·-macrophagecolony--stimulatingfactorGreenfluorescentproteinHepatitisBvirusHepatitisBeantigenHepatitisBsurfaceantigenHumanleucocyteantigenInterleukinInterferonImmunoglo

5、bulinGMonoclonalantibodyMajorhistocompabiiitycomplexMixedlymphocytereactionOpenreadingflamePolymerasechainreactionPhosphateBufferSalinePhycoerthrinPeripheralbloodmononuclearcellsReversetranscriptionStimulationindexTAP．cellHelperTlymphocyteTumournecrosisfactorTris(hydroxymethyl)aminomethane抗原提呈

6、细胞CD40配体细胞毒性T淋巴细胞分化抗原树突状细胞脱氧核糖核酸胞外段酶联免疫吸附试验溴化乙锭乙二胺四乙酸胎牛血清异硫氰酸荧光素荧光系数粒。巨噬细胞集落刺激因子绿色荧光蛋白乙型肝炎病毒乙型肝炎e抗原乙型肝炎表面抗原人类自细胞抗原白细胞介素干扰素免疫球蛋白G单克隆抗体主要组织相容性复合物混合淋巴细胞反应开放读码框聚合酶链式反应磷酸盐缓冲液藻红蛋白外周血单个核细胞逆转录刺激指数人TAP．缺陷型细胞株辅助T淋巴细胞肿瘤坏死因子三羟甲基氨基甲烷2温州医学院硕士学位论文CD40L基因修饰的HBeAg多T细胞表位DNA疫苗的实验研究中文摘要目的：l、通过各种筛选方法筛选出乙肝病毒e抗原(HBe

7、Ag)来源的HLA．A0201限制性CTL表位并鉴定其具有免疫原性，为HBeAg多T细胞表位的特异性治疗性疫苗的开发奠定基础。2、利用分子生物学技术构建CD40L基因修饰的HBeAg多T细胞表位DNA疫苗。3、探讨HBVE—ecdCD40L融合基因对树突状细胞(DC)功能的影响。方法：1、选择中国人群最常见的B基因型中的adw血清型的乙肝病毒e抗原序列，通过网络在线表位筛选服务，分析得到分数比较高，而且是一样的表位，然后采用量化基序方案、延展基序方案以及超基序方案等通