辣椒素对水浸—束缚应激大鼠胃动力的作用及机制研究.docx

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1、辣椒素对水浸—束缚应激大鼠胃动力的作用及机制研究目的：通过研究辣椒素（capsaicin，CAP）对水浸-束缚应激（waterimmersion-restraintstress，WIRS）大鼠胃酚红排空率的影响，检测血浆胃动素（motilin，MTL）水平，胃窦组织辣椒素受体（transientreceptorpotentialvanilloidsubtype1，TRPV1）、P物质（substanceP，SP）及酪氨酸激酶受体（c-kit）的表达，胃窦组织c-kitmRNA及干细胞生长因子（stemcellfactor，SCF

2、）mRNA的转录水平，探讨CAP对大鼠胃动力的作用及机制。方法：（1）自制CAP饲料：精确称取95％的CAP105.3mg（含CAP100mg），完全溶解于30ml的食用油中，再加入食用面粉100g，混匀，所得即为CAP含量为1mg/g的饲料。（2）WIRS大鼠模型的建立：SD大鼠20只，随机分为正常组与模型组。模型组每日WIRS1小时，连续4周，正常组自由进食，连续4周。（3）CAP干预实验动物分组：SD大鼠40只，随机分为4组：A组（正常对照组），B组（WIRS组），C组（WIRS+CAP组），D组（CAP组）。（4）具体方

3、法：A组自由摄食进水，连续4周；B组每日WIRS1小时后自由摄食进水，连续4周；C组每日WIRS1小时后喂食CAP饲料（CAP含量为1mg／g）5g／kg／只，待CAP饲料食用完后，再给予普通饲料喂养，连续4周；D组每日喂食CAP饲料（CAP含量为1mg／g）5g／kg／只，待CAP饲料食用完后，再给予普通饲料喂养，连续4周；4周后所有大鼠禁食24小时，于次日早晨给予浓度为50mg／dL的酚红溶液灌胃，2ml/鼠，灌胃30min后麻醉处死大鼠。（5）检测指标：①收集胃内容物，测定胃酚红排空率。②腹主动脉取血2ml，4℃离心后提取

4、上清液，用Elisa法检测血浆MTL水平。③肉眼观察大鼠胃粘膜损伤指数并进行病理组织学检查。④取胃窦组织包埋、切片后用免疫组化方法检测TRPV1、SP及c-kit的表达。⑤取胃窦组织用RT-PCR方法检测c-kitmRNA、SCFmRNA的转录水平。结果：1.模型验证：（1）动物一般情况：实验过程中，正常组大鼠一般状态好，活动灵活，进食正常，大小便正常，无死亡；模型组大鼠精神状态差，行动迟缓，进食较少，大便干结，但无死亡。（2）大鼠胃酚红排空率：正常组、WIRS模型组大鼠胃酚红排空率分别为：61.76%±1.22%，53.07%

5、±2.19%，WIRS模型组胃酚红排空率显著低于正常组（P＜0.05）。2.CAP干预的结果：（1）动物一般情况：实验过程中各组大鼠无死亡，其中A组大鼠一般状态好，活动灵活，进食正常，大小便正常；B组大鼠精神状态差，行动迟缓，进食较少，大便干结；C组大鼠一般状态良好，活动稍迟缓，进食正常，大小便正常；D组大鼠一般状态好，活动灵活，进食较多，大小便正常。（2）大鼠胃酚红排空率：A组62.91%±1.10%，B组55.33%±1.79%，C组61.88%±2.07%，D组70.78%±2.42%，其中B组胃酚红排空率显著低于A组、C

6、组、D组（P＜0.05），D组胃酚红排空率显著高于A组（P＜0.05），A组胃酚红排空率与C组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。（3）大鼠血浆MTL水平：A组190.30±1.68pg/ml，B组179.75±1.72pg/ml，C组200.06±2.06pg/ml，D组201.37±1.45pg/ml，其中B组血浆MTL水平显著低于A组、C组及D组（P＜0.05），A组血浆MTL水平显著低于C组、D组（P＜0.05），C组血浆MTL水平与D组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。（4）免疫组化方法检测结果：①大鼠胃窦组织T

7、RPV1表达积分结果：A组2.30±0.48分，B组2.20±0.42分，C组3.30±0.48分，D组3.60±0.52分，其中A组TRPV1表达水平显著低于C组、D组（P＜0.05），B组TRPV1表达水平显著低于C组及D组（P＜0.05），A组TRPV1表达水平与B组差异无统计学意义（P＞0.05），C组TRPV1表达水平与D组差异无统计学意义（P＞0.05）。②大鼠胃窦组织SP表达积分结果：A组为2.00±0.47分，B组为1.20±0.42分，C组为3.20±0.63分，D组为3.50±0.53分，其中B组SP表达水平

8、显著低于A组、C组及D组（P＜0.05），A组SP表达水平显著低于C组及D组（P＜0.05），C组SP表达水平与D组差异无统计学意义（P＞0.05）。③大鼠胃窦组织c-kit表达积分结果：A组1.30±0.48分，B组0.80±0.42分，C组1.50±0.53