血液常用检查一.ppt

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1、血液常用检查一、红细胞计数二、血红蛋白测定三、红细胞形态学检查四、白细胞计数五、白细胞分类计数六、白细胞形态学检查七、血小板计数八、血小板形态学检查红细胞计数一血红蛋白测定二红细胞形态检查三第二节血液常用检查（一）教学目标掌握红细胞计数、血红蛋白方法熟悉红细胞形态特点了解红细胞计数、血红蛋白测定临床意义红细胞的发育过程造血干细胞→早幼红细胞→中幼红细胞→晚幼红细胞脱核→网织红细胞→成熟红细胞EPO红系祖细胞→原始红细胞（有丝分裂）48h成熟红细胞铁→铁代谢原卟啉→胆色素代谢珠蛋白→蛋白质代谢衰老红细胞红细胞的发育过程120天6检测方法1.手工显微镜法2.血液分析仪法一、

2、红细胞计数71.手工显微镜法（1）血液分析仪的校正（2）适用基层医疗单位和分散就诊患者（3）费时、重复性差，准确性取决操作者技术水平2．血液分析仪法操作简便、重复性好，适用大批量集中检测准确性取决于仪器性能及工作状态，定期校准、质控方法学评价手工显微镜法8定义：用等渗稀释液将血液稀释一定倍数后，滴入改良Neubauer计数板，在显微镜下计数一定范围内的红细胞数，经换算即可求得每升血液中的红细胞数。9改良牛鲍计数板计数板压线细胞的计数原则：数左不数右，数上不数下12血细胞计数室各计数区的计数对象、范围和单位换算计数区域计数细胞种类换算方式（以细胞个数/L计）四角4个大方格

3、白细胞N/4×10×稀释倍数×106四角及中央5个中方格红细胞、血小板N×5×10×稀释倍数×106两侧计数室四角及中央嗜酸性粒细胞、体N×稀释倍数×1065个大方格共10个大方格腔液细胞、精子13红细胞稀释液组成与作用稀释液组成作用备注Hayem液NaCl、Na2SO4、HgCl2调节渗透压、增加红细胞悬浮性和防腐作用高球蛋白血症时，蛋白质沉淀致红细胞凝集枸橼酸钠稀释液NaCl、枸橼酸钠、甲醛NaCl和枸橼酸钠调节渗透压，枸橼酸钠具抗凝，甲醛防腐生理盐水生理盐水急诊时用1%甲醛生理盐水甲醛、生理盐水急诊时用141.准备计数板2.加稀释液：2ml3.加血：10μl混匀4

4、.充池5.计数6.计算：红细胞数=N/5*25*10*200*106/L结果报告方式：X.X×1012/L红细胞计数操作15成年：男性（4～5.5）×1012/L女性（3.5～5.0）×1012/L新生儿：（6.0～7.0）×1012/L参考值161.分析前质量控制患者准备、标本采集、存储温度和时间2.分析中质量控制计数误差（技术误差和固有误差）、白细胞影响3.分析后质量控制结合临床资料质量控制血红蛋白(血色素，Hb或HGB)组成二、血红蛋白测定珠蛋白：4条，种属特异性亚铁血红素：4个，无种属特异性珠PrNNFeNN亚铁血红素结构示意图O2HbA：α2β2成人占95%以

5、上HbA2：α2δ2成人约占2～3%HbF(胎儿Hb)：α2γ2成人1%以下每个Hb分子由2条α类肽链和2条非α类肽链组成，每条珠蛋白肽链含有1个亚铁血红素HbO2(氧合血红蛋白)各种血红蛋白衍生物(据铁原子第六配位键的结合情况)Hbred(还原血红蛋白)HbCO(碳氧血红蛋白)Hi(高铁血红蛋白)SHb(硫化血红蛋白)主要成分少量与氧结合未结合与CO结合Fe2＋→Fe3＋与S结合21氰化高铁血红蛋白(HiCN)测定法十二烷基硫酸钠血红蛋白（SDS-Hb）法叠氮高铁血红蛋白(HiN3)法碱羟血红蛋白法叠氮高铁血红蛋白测定法溴代十六烷基三甲胺血红蛋白测定法（CTAB）检测

6、方法一.原理Hb＋CN－氧化HiCN为棕红色，最大吸收峰540nm。根据标本的吸光度可知Hb浓度。HiCNHi氰化高铁血红蛋白测定法(HiCN法)注：硫化血红蛋白(SHb)不能被转化氰化钾0.05g高铁氰化钾0.2g磷酸二氢钾0.14g非离子表面活性剂1.0ml蒸馏水加至1000ml二.试剂HiCN转化液(文齐液)调pH7.0～7.4，置棕色玻璃瓶中密封保存。氧化调节pH促溶,防混浊提供CN-氰化高铁血红蛋白测定法(HiCN法)三.方法4.实际工作中，可用HiCN参考液，按生化方法绘制标准曲线，或求出K值后计算。K＝∑Hb（g）/∑A1.5.0mlHb转化液＋血20ul

7、,混匀,静置5min。2.分光光度计比色，波长540nm，以空白转化液调零，测定吸光度“A”。3.如用符合WHO标准的光度计，则可据“A”直接计算Hb浓度。氰化高铁血红蛋白测定法25血红蛋白浓度计算公式：Hb(g/L)=Aג540HiCN/44×64458/1000×251=A×367.7Aג540HiCN：测定管吸光度44：毫摩尔消光系数64458/1000：1mmol/LHb溶液中所含Hb克数251为稀释倍数三.方法4.实际工作中，可用HiCN参考液，按生化方法绘制标准曲线，或求出K值后计算。K＝∑Hb（g）/∑A1.5.0mlHb转