微生物的生长及控制ppt课件.ppt

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1、单个微生物细胞合适的外界条件，吸收营养物质，进行代谢。同化作用的速度超过了异化作用个体的生长原生质的总量（重量、体积、大小）就不断增加如果各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就会发生繁殖，引起个体数目的增加。群体内各个个体的进一步生长群体的生长个体生长个体繁殖群体群体生长=个体生长+个体繁殖数量量第一节测定生长繁殖的方法一、测生长量二、计繁殖数1、直接法测体积法(粗放)称干重法(精确)2、，间接法比浊法：分光光度法(OD)生理指标法：测含氮量1、直接法：用血球计数板在显微镜下进行计数二、计繁殖数2、间接法：用平板菌落进行的活菌计数菌数/mL=cfuX稀释度X10第

2、二节微生物的生长规律一、微生物的个体生长和同步生长三、微生物的连续培养方法二、微生物的典型生长曲线获得微生物纯培养的方法概念：从一个细胞得到的后代称为纯培养。方法：稀释倒平板法；划线法。一、微生物的个体生长和同步生长同步培养（synchronousculture）：即设法使群体中的所有细胞尽可能都处于同样细胞生长和分裂同期中，然后分析此群体的各种生物化学特征，从而了解单个细胞所发生的变化。同步生长通过同步培养的手段而使细胞群体中各个体处于分裂步调一致的生长状态；二、单细胞微生物的典型生长曲线(growthcurve)将少量纯种单细胞微生物接种到恒容积的液体培养基中后，在适宜的

3、温度、通气（厌氧菌除外）等条件下，它们的群体会有规律地生长起来。每隔一定时间取样，测菌细胞数目。以细胞数目的对数值作纵坐标，以培养时间作横坐标，可以画出一条有规律的曲线即单细胞微生物的典型生长曲线。生长曲线代表了单细胞微生物在新的环境中从开始生长、分裂直至死亡的整个动态变化过程。培养时间(h)I延滞期II指数期III稳定期IV衰亡期0生长速度总菌数活菌数IIIIIIIVlg细胞数(个/ml)微生物的典型生长曲线(growthcurve)Ⅰ延滞期(lagphase)⑤对外界不良条件例如NaCl溶液浓度、温度和抗生素等化学药物的反应敏感。指少量微生物接种到新鲜培养液中后，在开始培

4、养的一段时间内细胞数目不增加的时期。①生长速率常数R等于零。②细胞形态变大或增长。③细胞内RNA尤其是rRNA含量增高，原生质呈嗜碱性。④合成代谢活跃，核糖体、酶类和ATP的合成加快，易产生诱导酶。影响延滞期长短的因素（1）接种龄（2）接种量（3）培养基成分Ⅰ延滞期(lagphase)出现延滞期的原因？把细菌接种到新鲜的培养基中培养时，并不立即进行分裂繁殖，细菌增殖数为0，这时需要合成多种酶，辅酶和某些中间代谢产物，要经过一个调整和适应过程。延滞期出现原因缩短延滞期的意义和方法接种对数生长期的菌种，采用最适菌龄加大接种量用与培养菌种相同组成分的培养基Ⅱ指数期(exponent

5、ialphase)是指在生长曲线中，紧接着延滞期的一段细胞数以几何级数增长的时期。①生长速率常数R最大，代时G最短；②整个群体的生理特性较一致；④酶系活跃，代谢旺盛。③细胞各成分平衡增长，生长速率恒定；三个重要参数（1）繁殖代数(n)（2）生长速率常数(R)（3）代时(G)Ⅱ指数期(exponentialphase)G=(t2-t1)/n=(t2-t1)/3.322(lgX2-lgX1)R=1/G=3.322(lgX2-lgX1)/(t2-t1)X2=X1·2n两边取对数：lgX2=lgX1+nlg2（lg2=0.301）n=3.322(lgX2-lgX1)Ⅱ指数期(expo

6、nentialphase)x2x1t1t2影响代时长短的因素（1）菌种（2）营养成分（3）营养物浓度（4）培养温度细胞数或菌体量时间8.0mg/ml6.0mg/ml4.0mg/ml2.0mg/ml1.0mg/ml0.5mg/ml0.2mg/ml营养物浓度对生长速度和菌体产量的影响Ⅱ指数期(exponentialphase)指数期的实践意义指数期的微生物具有整个群体的生理特性一致、细胞各成分平衡增长和生长速率恒定等优点。（1）用作代谢、生理等研究的良好材料；（2）是增殖噬菌体的最适宿主；（3）是发酵工业中用种子的最佳材料。（4）进行染色、形态观察等的良好材料。Ⅲ稳定期(stat

7、ionaryphase)又称恒定期或最高生长期。处于稳定期的微生物，新增殖的细胞数与老细胞的死亡数几乎相等，整个培养物中二者处于动态平衡，此时的生长速度又逐渐趋向零。出现原因营养的消耗营养物比例失调有害代谢产物积累PH值等理化条件不适Ⅲ稳定期(stationaryphase)①生长速率常数R=0，即新繁殖的细胞数与衰亡的细胞数相等；②菌体产量达到最高点，且产量与营养物质的消耗出现有规律的比例关系，用生长产量常数Y表示；Y=(X-X0)/C0-C=(X-X0)/C0X：稳定期的细胞干重(g/ml培养液）X