第六章 微生物的生长及控制ppt课件.ppt

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1、生长：生物个体物质有规律地、不可逆增加，导致个体体积扩大的生物学过程。繁殖：生物个体生长到一定阶段，通过特定方式产生新的生命个体，即引起生命个体数量增加的生物学过程。第六章微生物的生长及其控制1微生物生长：在一定时间和条件下细胞数量的增加（微生物群体生长），在微生物学中提到的“生长”，一般均指群体生长，这一点与研究大生物时有所不同。微生物生长：单位时间里微生物数量或生物量的变化。2第一节　微生物的生长和测定方法1、测生长量：（1）直接法：测体积、称干重等方法（2）间接法：A比浊法：可用分光光度法对无色的微生物悬浮液进行测定或用带有侧臂的三角烧瓶作原位测定。3B生理指标法：如

2、测含氮量：一般细菌的含氮量为其干重的12.5%，酵母菌为7.5%，霉菌为6.5%，含氮量乘以6.25即为粗蛋白含量。测含碳量以及测磷、DNA、RNA、ATP、DAP（二氨基庚二酸）、几丁质或N－乙酰胞壁酸等含量的；产酸、产气、耗氧、粘度和产热等指标，有时也应用于生长量的测定。42、计繁殖数：细菌酵母菌放线菌和霉菌孢子数（1）直接法：指用计数板（例如血球计数板）在光学显微镜下直接观察细胞并进行计数的方法。5A平板菌落计数法：（2）间接法（菌落计数法）：6采用培养平板计数法要求：每一活微生物单细胞在培养平板上培养后，形成一个单菌落，在科研中一般用菌落形成单位（colonyformi

3、ngunits，CFU）来表示，而不是直接表示为细胞数。技术要求高，烦琐。7C厌氧菌的菌落计数法：一般采用亨盖特滚管培养法进行（第四节）。半固体深层琼脂法8第二节：微生物的生长规律一、细菌的同步生长和二次生长同步培养：使群体中的细胞处于比较一致的，生长发育均处于同一阶段上，即大多数细胞能同时进行生长或分裂的培养方法。同步生长：以同步培养方法使细胞群体中各个体处于分裂步调一致的生长状态。9通过同步培养方法获得的细胞被称为同步细胞或同步培养物。由于细胞的个体差异，同步生长往往只能维持2-3个世代，随后又逐渐转变为随机生长。10二、单细胞微生物的典型生长曲线纯种单细胞微生物接种到恒容

4、积的液体培养基中，定时测定菌体数量，以活菌数对数为纵坐标，以时间为横坐标绘图所得到的曲线，称为生长曲线。整个典型生长曲线可分为四个时期：延滞期、指数期、稳定期和衰亡期。111、延滞期表现：不立即繁殖，，菌数几乎不变，细胞形态变大。特点：生长速率常数为0，分裂迟缓，合成代谢活跃，体积增长快，细胞内RNA含量增高，对外界不良环境敏感，合成各种新的酶系和中间代谢产物。影响延滞期长短的因素：菌种接种龄接种量培养基成分12(1)通过遗传学方法改变种的遗传特性使迟缓期缩短；(2)利用对数生长期的细胞作为种子；(3)尽量使接种前后所使用的培养基组成不要相差太大；(4)适当扩大接种

5、量在生产实践中缩短迟缓期的常用手段：132、指数期：在生长曲线中，细胞数以几何级数增长的时期。表现：代谢活性最强，几何级数增加，代时最短，生长速率最大。特点：细菌数目增加与原生质总量增加，与菌液浊度增加呈正相关性。代时：单个细胞完成一次分裂所需时间，亦即增加一代所需时间。倍增时间：原生质增加一倍所需的时间14影响微生物增代时间（代时）的因素：1）菌种，不同的微生物及微生物的不同菌株代时不同；2）营养成分，在营养丰富的培养基中生长代时短；3）营养物浓度，在一定范围内，生长速率与营养物浓度呈正比；凡是处于较低浓度范围内，可影响生长速率的营养物成分，就称为生长限制因子。4）温度，在

6、一定范围，生长速率与培养温度呈正相关。15大肠杆菌在不同温度下的代时温度（℃）代时（min）温度（℃）代时（min）101520253086012090402935404547.52217.52077163、稳定期表现：新增殖细胞数与老细胞的死亡数几乎相等，活菌数动态平衡。特点：生长速率又趋于0，细胞总数最高。合成各类次生代谢物。原因：养分减少；营养物比例失调，有毒代谢物产生，培养环境条件中pH和氧化还原电位等对细菌生长不利。17应用意义：1）发酵生产形成的重要时期（抗生素、氨基酸等），生产上应尽量延长此期，提高产量，措施如下：补充营养物质（补料）调pH调整温度2）稳定期细胞

7、数目及产物积累达到最高。184、衰亡期表现：出现“负生长”，有些细胞开始自溶。衰亡期特点：细菌代谢活性降低，细菌衰老并出现自溶，产生或释放出一些产物，如氨基酸、转化酶、外肽酶或抗生素等。细胞呈现多种形态，有时产生畸形，细胞大小悬殊，有些革兰氏染色反应阳性菌变成阴性反应等。19三、微生物的连续培养连续培养（continuousculture）：指在微生物的整个培养期间，通过一定的方式使微生物能以恒定的比生长速率生长并能持续生长下去的一种培养方法。又称开放培养，是相对单批培养、封闭培养而言的。单