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时间:2018-05-23
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1、Chapter6MicrobialGrowthandItsControl微生物的生长繁殖及其控制第一节生长的定义及测定方法微生物生长(Growth):是指细胞物质有规律地、不可逆增加的生物过程。微生物繁殖(Reproduction):是微生物生长到一定阶段由于细胞内各种细胞结构的复制和重建导致产生新的生命个体,即引起生命个体数量增加的整个生物学过程。一、测生长量(一)直接法:测体积法;称干重法(二)计繁殖数1、比浊法2、生理指标法1、比浊法菌液浓度吸光值(OD值)2.生理指标测定法测含氮量法蛋白质总量=含氮量×6.25细胞总量=蛋白质总量/(50%~80%(或65%))=蛋白总量×1.54测含
2、碳量以及测磷、DNA、RNA、ATP、DAP(二氨基庚二酸)、几丁质等。产酸、产气、耗氧、粘度和产热等。二、计繁殖数1、直接计数法2、间接计数法1、直接计数法:指用计数板在光学显微镜下直接观察细胞并进行计数的方法。2、间接计数法(1)平板菌落计数法(2)膜过滤法(1)平板菌落计数法:浇注平板或涂布平板(2)膜过滤法第二节、微生物的生长规律一、纯培养技术1、纯培养的定义:纯培养(Pureculture):微生物学中将在实验室条件下从一个细胞或一种细胞群繁殖得到的后代称为纯培养2、获得纯培养的技术1)稀释平皿分离法2)平皿划线分离法3)单细胞挑取法1)pourplatemethod(稀释倒平板法)
3、10-110-210-310-410-510-610-710-810-92)spreadplatemethod(涂布平板法)3)streakplatemethod(平板划线分离法)3.单细胞挑取法接种针解剖镜………....…同步培养:是一种培养方法,它能使群体中不同步的细胞转变成能同时进行生长或分裂的群体细胞。同步生长:以同步培养方法使群体细胞能处于同一生长阶段,同时进行分裂的生长方式称为同步生长。同步细胞或同步培养物:通过同步培养方法获得的细胞称~。同步培养物常被用来研究在单个细胞上难以研究的生理与遗传特性和作为工业发酵的种子,它一种理想的材料。二、微生物的个体生长和同步生长1、机械筛选方法
4、(1)离心方法(2)过滤分离法(3)硝酸纤维素滤膜法2、环境条件控制技术(1)温度(2)培养基成分控制(3)其他(1)离心方法(2)过滤分离法(3)硝酸纤维素滤膜法2、环境条件控制技术(1)温度:通过适宜与不适宜温度的交替处理之后,通过培养可获得同步细胞。(2)培养基成分控制:将不同步的细菌在营养不足的条件下培养一段时间,然后转移至营养丰富的培养基中培养,能获得同步细胞。(3)其他:光照与黑暗交替培养获得光合细菌的同步细菌;加热杀死芽孢杆菌获得芽孢杆菌的同步细胞。环境条件控制获得同步细胞的机理不完全了解。这种处理可能是导致胞内某些物质合成,它合成和积累可导致细胞分裂,从而获得同步细胞。三、单细
5、胞微生物的典型生长曲线将少量单细胞纯培养接种到一恒定容积的新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养,定时取样测定其细菌含量,可以看到以下现象:开始有一短暂时间,细菌数量并不增加,随之细菌数目增加很快,既而细菌数又趋稳定,最后逐渐下降。如果以培养时间为横坐标,以细菌数目的对数或生长速度为纵坐标作图,可以得到一条曲线,称为繁殖曲线,通常又称为生长曲线。(一)延滞期—停滞期、调整期、适应期(Lagphase)少量细菌接种到新鲜培养基后,一般不立即进行繁殖,生长速度近于零。因此在开始一段时间,细菌数几乎保持不变,甚至稍有减少。这段时间被称为延迟期,又称为迟缓期、调整期或滞留适应期。1、延滞期出现原因2、延
6、滞的特点3、影响延滞期限长短的因素4、缩短延滞期的意义及方法A、微生物接种到一个新的环境,暂缺乏足够的能量和必需的生长因子;B、“种子”老化(即处于非对数生长期)或未充分活化。C、接种时造成的损伤1、延滞期出现原因2、延滞期的特点特点:1)生长速率常数为零;细菌数量不增加或增加很少。2)细胞形态变大或增长,许多杆菌可长成丝状。3)合成代谢十分活跃,核糖体、酶类和ATP的合成加速,易产生各种诱导酶。4)对外界不良条件如NaCl溶液、温度和抗生素等理、理化因素反应敏感。3、影响延滞期时间长短的因素B、接种龄:以对数期接种龄的种子接种,延滞期短C、接种量:发酵工业上通常采用种子:发酵培养基=1:10
7、D、培养基成分:一般要求发酵培养基的成分或种子培养基的成分尽量接近,且应适当丰富些。A、菌种特性4、缩短延滞期的意义及方法(1)意义:可以缩短生产周期,提高设备利用率(2)缩短延滞期的方法A、通过遗传学方法改变种的遗传特性使迟缓期缩短B、接种对数生长期的菌种,采用最适菌龄C、尽量使接种前后所使用的培养基组成不要相差太大D、加大接种量(二)Exponentialphase(指数期)对数期又称指数期。
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