微生物的生长ppt课件.ppt

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1、第六章微生物的生长及其控制生长:原生质与细胞组分的增加;繁殖:菌体细胞数量的增加。微生物的生长伴随体积增大和细胞分裂,所以,生长的概念中包含着繁殖。第一节测定生长繁殖的方法测定细胞干重法单位体积培养物中细胞物质的干重(一)直接法(二)间接法比浊法生长指标法含氮量测定法微生物细胞中蛋白质的含量是比较稳定的,测出微生物细胞中的含N量后再换算出蛋白质的含量,可用凯氏定N法。蛋白质的含量=氮量×6.25DNA含量的测定ATP含量的测定代谢活性法二、计繁殖数法(一)直接法血球计数板平板菌落计数法简单易行,但易造成机械损伤(二)间接法一、微生物个体生长和同步生长同步培养法:能获得处于同一

2、生长阶段 的群体细胞的培养方法同步生长:运用同步培养技术,控制微 生物生长,使之处于同一生长 阶段并同时分裂。第二节微生物的生长规律获得同步生长的方法:1.机械法—收集同样大小的细胞密度梯度离心:选择性滤膜法:2.调整生理条件法:温度、光、限制因子等例:温度开始很低,使其均处在 仅活着的状态——升高温度—— 同步生长3.抑制DNA生长法:加入代谢抑制剂,阻遏DNA复制——解阻遏——同步生长曲线:将少量单细胞的纯培养,接种到一恒定容积的液体培养基中,在适宜条件下培养,定时取样,测菌量。以培养时间为横坐标,以细菌增长数目的对数为纵坐标,绘制所得的曲线。二、单细胞的典型生长曲线(1

3、)延滞期(lagphase)1.现象:活菌数没增加,曲线平 行于横轴。2.原因:由于细胞进入新环境, 细胞数目无增长,甚至有所下 降有一个适应过程,进行大量 的酶(诱导酶)的生成。3.细胞特点:细胞的新陈代谢非 常旺盛,个体体积显著增大, 为细胞分裂作准备。4.此期长短:与菌种遗传特性、菌龄、接种量、培 养条件有关。5.意义:在实际工作中,缩短lagphase的措施:1)加大接种量(群体优势----适应性增强)2)选用对数期的种子(此时细胞分裂旺盛)3)调整培养基的成分,使种子基含有发酵培养基的成分4)选用繁殖快的菌种(2)指数期(exponentialphase)1.现象:

4、细胞数目以几何级 数增加,其对数与时间 呈直线关系。2.细胞特点:此时细胞的 大小、组成、生理特征等 均趋于一致,代谢活跃, 生长速率高,代时稳定。2.代时(世代时间Generationtime,G):单个细胞完成一次分裂所需要的时间3.意义:(1)代谢、生理研究的好材料(2)生产中用其作种G=t/n=t2—t13.3(lgx2—lgx1)(1)G与菌种有关;(2)受培养条件(温度、营养成分、营养物浓度)的制约;同一菌种在不同培养条件下代时不同(3)稳定期(stationaryphase):2.特点:细胞的菌体形态典型, 芽孢形成,细胞内开始 贮藏物质。1.现象:活菌数目不增

5、不 减,生长速率趋于0,曲 线有一下降的趋势。3.出现原因:4.意义:1)营养物质大量消耗;2)有毒代谢产物大量积累;3)营养物比例失调 4)外界条件影响(pH、高细胞浓度,氧化还原电位等)1)发酵生产形成的重要时期(抗生素、氨基酸等),生产上应尽量延长此期,提高产量,措施如下:补充营养物质(补料)调pH调整温度2)稳定期细胞数目及产物积累达到最高。3)生长产量常数:概念:表示微生物对基质利用效率的高低Y=菌体干重/消耗营养物质的浓度根据产量常数可确定微生物对营养物质的需要量如:Y=0.5,表示要得到5g菌体,需某营养物(葡萄糖)10g。(4)衰亡期1.现象:细胞死亡速率大于

6、生长速率。一般总菌数不变,活菌数曲线下降。2.特点:菌体变形,大小 不一,细胞出现自溶,生理代 谢活动停滞。三、微生物的连续培养单(分)批培养:指微生物在一定容积的培养基中,在特定培养条件下只完成一个生长循环(最后一次收获)的培养方法。(封闭系统)连续培养:指微生物在整个生长时间,以一定的方法(恒浊、恒化)使微生物持续的以较恒定的生长速率生长的培养方法。(开放系统)(一)按控制方式分 1.恒浊培养概念:在恒浊器内,调节培养基流速,使细菌培养液浊度保持恒定的连续培养方法。原理:维持菌浓度不变。特点:基质过量,菌以最高速率生长;但工艺复杂,烦琐。以获得菌体或与菌体生长相平行的代谢

7、产物2.恒化培养概念:以恒定流速使营养物质浓度恒定而保持细菌生长速率恒定的方法。原理:恒化器中动态平衡的稳定性,是以某种生长限制因子(如碳、氮源;生长因子;无机盐等)的浓度来控制菌的生长速度。特点:维持营养成分的低浓度,控制微生物生长速率。主要用于科学研究(二)按培养器级数分单级连续培养微生物代谢产物的产生速率与菌体生长速率相平行2.多级连续培养微生物代谢产物不与菌体生长速率相平行连续培养的优点1、缩短发酵周期,提高设备的利用率;2、便于自控。降低动力消耗及劳动强度;3、产品均一;4、节约资源连续培养的

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