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1、白细胞介素—1α与白细胞介素—6基因多态性和椎间盘退变症相关性探究 [摘要]目的研究白细胞介素-1α和白细胞介素-6基因多态性与椎间盘退变症相关性。方法选择2009年6月~2012年1月乌兰察布医学高等专科学校附属医院外科手术治疗的椎间盘退变症患者42例为病例组,选择同期因骨折和外伤行手术治疗的非椎间盘退变症患者85例为对照组。采用PCT-RFLP分析IL-1α-rs1800587和IL-6-rs1800797基因频率分布;采用多变量Logistic回归分析模型分析IL-1α-rs1800587和IL-6-rs1800
2、797基因多态性对椎间盘退变的影响。结果①病例组IL-1α-rs1800587基因型中C/C、C/T和T/T基因型分布百分比为52.4%、40.5%和7.1%,而对照组相应基因型分布百分比为55.3%、38.8%和5.9%,两组比较,差异无统计学意义(P=0.87)。病例组IL-6-rs1800797基因型中A/A、A/G和G/G基因型分布百分比为50.0%、33.3%和16.7%,对照组相应基因型分布百分比为64.7%、28.2%和7.1%,两组比较,差异无统计学意义(P=0.17)。②IL-1α-rs1800587基
3、因多态性并不能增加椎间盘退变的概率,携带IL-1α-rs18005879C/T和T/T基因型调整后的OR值(95%CI)分别为1.28(0.18~7.27)和1.43(0.27~8.06)。多变量Logistic回归分析表明,IL-6-rs1800797A/G基因多态性与椎间盘退变有相关关系。携带IL-6-rs1800797G/G基因型的个体患椎间盘退变的概率显著高于携带IL-6-rs1800797A/A基因型的个体,调整后的OR值(95%CI)为5.52(1.24~18.21)。结论IL-6rs1800797基因多态性
4、对椎间盘退变发病过程有显著影响,检测基因多态性的可以预测椎间盘退变发病风险。[关键词]白细胞介素-1α;白细胞介素-6;椎间盘退变;发病风险[中图分类号]R681.5[文献标识码]A[文章编号]1673-7210(2013)06(b)-0037-039椎间盘退变症是临床上患者腰痛的重要原因,而椎间盘退变的发病机制到目前为止尚不十分清楚。国外有研究结果表明,细胞因子在椎间盘退变中起到了重要的作用[1]。在这些细胞因子中,包括了促进细胞合成的蛋白多糖,或者在细胞凋亡过程中起抑制作用和细胞代谢过程中起到调节和恢复作用的因子,例
5、如转化生长因子-β(TGF-β)、成纤维细胞因子(FGF)、骨骼形态发育蛋白-7(BMP-7)、胰岛素生长因子(TGF)、白细胞介素-1α(IL-1α)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等。此类炎症细胞因子可以调节细胞显性的改变,致使部分纤维环和髓核细胞出现噬菌细胞的表达[2]。本研究的目的在于采用病例对照研究评价IL-1α-rs1800587和IL-6-rs1800797的多态性与椎间盘退变症的关系。1资料与方法1.1一般资料选择2009年6月~2012年1月乌兰察布医学高等专科学校附属医院外
6、科因腰椎间盘突出症行手术切除的患者42例为病例组,并通过病理检查证实为椎间盘退变症,其中男27岁,女15例,平均年龄(46.5±7.3)岁。选择同期因骨折和外伤行手术治疗的患者85例为对照组,其中男51例,女34例,平均年龄(48.3±7.7)岁;对照组患者排除腰痛、腿痛或有椎管手术病史者,除外椎间盘退变症患者。两组患者性别、年龄等一般资料比较,差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性。1.2DNA提取所有研究对象采取空腹静脉血2mL,2h内采用3000r/min离心10min,提取血清冷冻于-20℃备用。1.3I
7、L-1αrs1800587和IL-6rs1800797基因多态性检测采用TIANampbloodDNAkit(天根生化科技有限公司,北京)试剂盒提取DNA。IL-1αrs1800587位点PCR扩增上游引物5’-GGGGTACCAGGTCTATGACCAGGAGAATT-3’、下游引物5’-CCAAGCTTTAATAGCCAGAGATGTGAGG-3’。IL-69rs1800797位点PCR扩增上游引物5’-CAAATCCTCCAGTTCACAG-3’、下游引物5’-TGCTCTACGTTAGTTCCCT-3’。聚合酶链
8、反应-限制性片段长度多态性(PCT-RFLP)基因分析方法的反应条件:94℃预变性3min,94℃变性30s、56℃退火30s、72℃延伸1min,35次循环,完成后再在72℃延伸5min;反应体系:DNA2μL、2×Taqmastermix10μL、sybgreen0.8μL、引物0.8μL、去离子水6.4μL。取
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