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《海带多糖对肾上腺素致血管内皮细胞损伤的防护作用_谢露》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、中国应用生理学杂志,2007;23(2)143*海带多糖对肾上腺素致血管内皮细胞损伤的防护作用1213谢露,刘爱群,黎静,陈蒙华(1.广西医科大学生理学教研室,广西南宁530021;2.广西医科大学肿瘤医院,广西南宁530027;3.广西医科大学附属医院心血管病研究所,广西南宁530027)摘要目的:探讨海带多糖L01对肾上腺素(Adr)致血管内皮细胞(VEC)损伤的保护作用。方法:采用注射Adr法建立VEC损伤大鼠模型,主动脉切片免疫组化检测血管内皮受损情况,ELISA法测定大鼠血浆血管性血友病因子(vonWillebrandfactor
2、,vWF)含量;体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),ELISA法测定HUVEC培养液vWF含量,观察L01对VEC损伤大鼠和Adr刺激HUVEC后vWF生成的影响。结果:造模第4d和第5d主动脉切片免疫组化检测完整内皮层长度(Lm)显示,L01高剂量(50mg/kg)、低剂量(10mg/kg)组长度明显高于模型组(P<0.05);造模第4d,L01高剂量组大鼠血浆vWF水平低于模型组,两者比较有显著性差异(P<0.05),第5dL01高、低剂量组大鼠血浆vWF水平均低于模型组(P<0.05)。在HUVEC培养实验中,终浓度为0.01mg
3、/ml和0.1mg/ml的L01均能降低24h培养液vWF水平,终浓度为0.1mg/mlL01还能降低48h培养液vWF水平,与Adr组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:L01对VEC具有保护作用。关键词:海带;多糖;内皮细胞;血管性血友病因子(vonWillebrandfactor,vWF);肾上腺素中图分类号:R151;R331.3文献标识码:A文章编号:1000-6834(2007)02-0143-05血管内皮细胞(VEC)形态和功能的完整是维持调净化设备有限公司)。XSB-1A倒置显微镜(梧州正常血管生理活动的重要基础,VEC
4、受损或功能障光学仪器厂产品)。BD-211电子天平(SATORI-[1]碍是血管疾病发病机制中的一个重要因素,与心OUS,德国)。450(96wellPlateReader)酶标仪(Bio-[2]Rad公司,美国)。DMP+Q550病理图像分析系统血管疾病临床危险事件的发生密切相关。因而保护和调整VEC功能对心血管疾病的预防和治疗(德国)。具有极为重要的临床意义。海带多糖L01是本课1.3实验动物题组从海带中分离得到一种多糖组分,实验证明其健康成年SD大鼠,年龄24个月,体质量400~有抗凝血、抑制血小板功能和抗血栓形成作用[2],500g
5、,雌雄兼用,清洁级,常温常湿,自由饮水。由广西医科大学实验动物中心提供,动物合格证:在此基础上本文研究大剂量肾上腺素对VEC的伤SCXK桂2003-0003。害性影响及L01对VEC的保护作用。1.4VEC大鼠模型制备与给药1材料与方法采用背部皮下注射大剂量Adr法制备VEC损伤大鼠模型,每日三次,分别于10、16、20时在相同1.1海带多糖制剂部位皮下注射,连续注射多日。分5个时段:1d、2采用酶解-碱消化-醇沉淀提取法、DEAE-纤维[3]d、3d、4d和5d。各时段组大鼠分4个实验组:高素柱层析分离法获得海带多糖L01,经纸层析和剂量
6、L01(H-L01,50mg/kg),低剂量L01(L-L01,葡聚糖柱层析法鉴定为均一组分。10mg/kg),模型组和正常组。高、低剂量L01组于1.2实验试剂与仪器每日上午9时和下午15时分别腹腔注射高、低剂量肾上腺素注射液(广州明兴制药厂)。vWF测L01,模型组和正常组于同一时间分别注射等量生定药盒(上海太阳生物技术公司)。兔抗人Factor理盐水,药后1h,高、低剂量L01组和模型组分别Ø-relatedAntigen(福州迈新生物技术公司)。EliV-皮下注射Adr,正常组注射生理盐水;每日20时,前TMisiomplusPol
7、yerHRP(Mouse/Rabbit)IHCKit(福州迈新生物技术公司);DABKit(福州迈新生物技术公司)。人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)株**基金项目:广西自然科学资金资助课题(0229033);广西卫生厅ECV304(上海午立公司)。DMEM培养基干粉课题(Z2006057)(Gibico公司)。小牛血清(杭州四季清生物工程公收稿日期:2005-08-01;修回日期:2006-09-25作者简介:谢露(1959-),女,广西玉林人,教授,博士,从事司)。胰蛋白酶(DIFCO公司)。3111CO2培养箱生理学和海洋药物药理研究
8、。(ThermoForma)。1450超净工作台(苏州市黄浦空144ChinJApplphysiol2007;23(2)3组同法注射Adr,正常组依旧注射生理盐水。各Lg/mlA
