甜菜碱对同型半胱氨酸致血管内皮细胞损伤的保护作用

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1、目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”3符号说明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5前言·⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯···⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯6刖舌一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一“⋯⋯⋯”“⋯⋯⋯”“⋯⋯⋯”⋯⋯⋯””⋯⋯⋯⋯一“⋯⋯⋯一⋯⋯”材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”12结果··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯·⋯·

2、“⋯”⋯⋯“·”·⋯⋯-”·⋯····⋯“⋯··⋯⋯“-⋯””⋯⋯”．．22讨论····⋯⋯·⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯””···⋯“⋯⋯““·⋯⋯”⋯⋯”⋯”··⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯．⋯⋯．31结论⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯”⋯⋯⋯⋯-⋯⋯⋯⋯··“⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯．··⋯⋯⋯”⋯⋯⋯⋯．⋯⋯．38I村图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。39参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42综述⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯··“⋯-·⋯⋯⋯⋯⋯···-“⋯⋯⋯··⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯．⋯

3、⋯．48致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．59攻读学位期间发表的学术论文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．60原创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．61甜菜碱对同型半胱氨酸致血管内皮细胞损伤的保护作用研究生：陈姗瑶专业：药理学导师：高允生教授中文摘要目的研究甜菜碱(Bet)对高浓度同型半胱氨酸(Hey)诱导的血管内皮细胞(HUVECs)损伤是否具有保护作用：探讨其对凋亡相关蛋白Bcl一2和Bax表达的影响；测定Bet对SOD活性、MDA含量及上清

4、液中NO含量的影响，探讨Bet是否通过抗氧化作用来拮抗Hcy诱导的HUVECs损伤。方法用含15％胎牛血清的RPMI一1640培养液培养HUVECs细胞株，当细胞融合至80％时，用免疫荧光技术鉴定并传代。培养至第三代后，取对数生长期的细胞分成5组：(1)正常对照组：加入等体积的培养液：(2)Hey损伤组：lmmol／LHcy；(3)Bet低浓度组：lmmol／LHcy+lOmmol／LBet；(4)Bet中浓度组：lmmol／LHcy+25mmol／LBet；(5)Bet高浓度组：lmmol／LHcy+50mmol／LBet。各组孵育2

5、4h后，采用形态学观察法和MTT法检测细胞的增殖存活；以流式细胞技术检测细胞凋亡率；利用免疫细胞化学法和Western-Blotting法检测细胞内凋亡相关蛋白Bcl一2和Bax蛋白表达量的变化；用相应的试剂盒分别检测细胞中SOD活性、MDA含量以及细胞培养液中NO含量。结果免疫荧光化学法检测显示，细胞呈阳性反应，确保了细胞株来源的可靠性。高浓度的Hcy可明显抑制HUVECs的生长，诱导细胞凋亡。Bet可以降低损伤细胞的生长抑制率和凋亡率，提高Bcl一2蛋白的表达而使Bax的表达明显减少，免疫细胞化学结果与Western—blottin

6、g法的结果一致。此外，Bet对高浓度Hcy诱导的HUVECs损伤具有保护作用。Bet可以显著升细胞中SOD的活性、降低MDA的含量，升高NO的含量。结论1高浓度的Hey可抑制细胞生长，促进细胞凋亡；Bet能够降低凋亡率、增加细胞活性，降低Hey造成的损伤。2Bet能够升高Bd一2蛋白表达、降低Bax蛋白表达，通过调控凋亡相关蛋白来抑制Hey造成的HUVECs凋亡。3Bet可以提高SOD活力，降低MDA含量，增加NO含量，通过抗氧化作用来拮抗Hcy诱导的HUVECs损伤。关键词：同型半胱氨酸；甜菜碱；人脐静脉内皮细胞；细胞凋亡；抗氧化2I

7、NJlJRIESoFHOMOCYSTEINEoNHUⅣIANUⅣⅡ；II麟I．VEINENDoT玎ELIALCELLSANDTHEPRoTECTIoNOFBETAJNEStudent：ChenShanyaoMajor：PharmacologySupervisor：ProfessorGaoYunshengABSTRACTObjectiveT0studywhetherBetaine(Bet)couldprotectthehumanumbilicalvascularendothelialcells(HUVECs)injuredbyhighle

8、velofhomocysteine(Hcy)；ToobservetheinfluenceoftheBcl一2andBaxproteins’expressionsunderBet；ToprovewetherB