洋葱花青素合成相关基因(acpal1)的克隆和表达分析

《洋葱花青素合成相关基因(acpal1)的克隆和表达分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、Onlinesystem:http://www.jabiotech.org农业生物技术学报JournalofAgriculturalBiotechnology2014,22(1):47~54DOI:10.3969/j.issn.1674-7968.2014.01.006洋葱花青素合成相关基因(AcPAL1)的克隆和表达分析121*1梁毅刘小义张洪伟谭武平1北京市农林科学院蔬菜研究中心，农业部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室，北京京研益农科技发展中心，北京100097；2中国质量认证中心，北京100070通讯作者，zhwwawzjcx@163.com摘要苯丙氨

2、酸解氨酶(PAL)作为植物苯丙烷类代谢途径中的关键酶，在其生长发育、抗病抗逆等多种生命进程中起重要作用，是花青素生物合成途径中的第一个酶。为了研究洋葱(AlliumcepaL.)PAL基因的生物学功能及其与花青素合成之间的关系，利用不同植物PAL基因设计简并引物，通过RT-PCR和RACE技术克隆洋葱PAL基因全长cDNA序列(GenBank登录号:KF421110)，并对该基因进行序列分析和Real-timePCR表达分析。结果表明，该序列全长2363bp，编码包含708个氨基酸残基的蛋白质多肽；Blast分析和系统进化分析表明，该多肽与大蒜(Allium.sati

3、vum)、石蒜(Lycorisradiate)PAL蛋白相似性很高，因此被命名为AcPAL1。Real-timePCR表达分析结果表明，AcPAL1基因在白皮、黄皮和红皮洋葱中表达量依次增加；而随着鳞茎的不断膨大，其表达量却不断降低。本实验初步证实了所克隆的洋葱AcPAL1基因与花青素合成相关联，为研究洋葱PAL基因同花青素合成积累之间的关系提供了依据。关键词洋葱，花青素，AcPAL1CloningandExpressionAnalysisofanAnthocyaninBio-synthesis-relatedGene(AcPAL1)inOnion(Alliumcep

4、aL.)121*1LIANGYiLIUXiao-YiZHANGHong-WeiTANWu-Ping1BeijingVegetableResearchCenter,BeijingAcademyofAgricultureandForestrySciences,KeyLaboratoryofBiologyandGeneticImprovementofHorticulturalCropsinNorthChina,MinistryofAgriculture,BeijingJingyanyinongSci-TechDevelopmentCenter,Beijing100097,C

5、hina;2ChinaQualityCertificationCenter,Beijing100070,ChinaCorrespondingauthor,zhwwawzjcx@163.comAbstractAsakeyenzymeoftheplantphenylpropanoidpathway,phenylalanineammonia-lyase(PAL),whichplaysanimportantroleinthelifeprocessessuchasgrowthanddevelopment,anddiseaseresistance,isthefirstenzyme

6、intheanthocyaninsynthesispathway.InordertostudythebiologicalfunctionforPALinonion(AlliumcepaL.)anditsrelationshipwithanthocyaninsynthesis,thefulllengthcDNAofPALgene(GenBankaccessionno.KF421110)inonionbulbwasclonedbyRT-PCRandRACEtechnologyusingdegenerateprimersdesignedaccordingtoPALgenes

7、indifferentplants.ThesequenceanalysisandexpressionanalysisusingReal-timePCRwereperformedeither.TheresultsshowedthattheclonedsequencedesignatedAcPAL1hadfulllengthof2363bp,whichencodedaproteinpolypeptideof708aminoacids.Blastandphylogeneticanalysisindicatedthatthepolypeptideshared