(上课用)微生物的实验室培养.ppt

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1、专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养二实验操作二实验操作（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基二实验操作（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基二实验操作（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基计算称量溶化灭菌倒平板二实验操作（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基称量溶化灭菌倒平板①溶化时为什么要将牛肉膏连同称量纸一起加热?计算二实验操作（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基称量溶化灭菌倒平板①溶化时为什么要将牛肉膏连同称量纸一起加热?可保证粘附在称量纸上的牛肉膏也能溶于水中，减少误差。计算二实验操作（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基称量溶化灭菌倒平板②加琼脂的目的是什么?计算二实验操作（一）制备牛肉膏

2、蛋白胨固体培养基称量溶化灭菌倒平板②加琼脂的目的是什么?作为凝固剂计算二实验操作（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基称量溶化灭菌倒平板③在灭菌前,用牛皮纸、旧报纸包紧盛有培养基的锥形瓶的目的是什么？计算二实验操作（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基称量溶化灭菌倒平板③在灭菌前,用牛皮纸、旧报纸包紧盛有培养基的锥形瓶的目的是什么？在灭菌时能避免水蒸汽凝结时浸湿棉塞，在取出培养基锥形瓶时也起到隔绝空气中杂菌污染的作用。计算二实验操作（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基称量溶化灭菌倒平板④培养皿能否用高压蒸汽灭菌？计算二实验操作（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基称量溶化灭菌倒平板④培养皿能否用高压蒸

3、汽灭菌？不能，因为培养皿要保持干燥，应该用干热灭菌。计算倒平板讨论讨论用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。讨论用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。讨论讨论平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。讨论平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。空气中的微生物

4、可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。二实验操作（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基称量溶化灭菌倒平板计算（二）纯化大肠杆菌二实验操作（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基称量溶化灭菌倒平板接种方法有：计算（二）纯化大肠杆菌二实验操作（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基称量溶化灭菌倒平板接种方法有：平板划线法和稀释涂布平板法计算（二）纯化大肠杆菌1.平板划线法讨论讨论1.操作的第一步灼烧接种环：每次划线前灼烧接种环：划线操作结束后灼烧接种环：讨论1.操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，

5、接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线操作结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。讨论2.以免接种环温度太高，杀死菌种。讨论2.以免接种环温度太高，杀死菌种。3.划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。2.稀释涂布法2.稀释涂布法（1）系列稀释操作：平板划线接种法2.稀释涂布法（1）系列稀释操作：（2）涂布平板操作讨论讨论

6、提示：应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围；等等。（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基称量溶化灭菌倒平板接种方法有：平板划线法和稀释涂布平板法计算（二）纯化大肠杆菌（三）将接种后的培养基和一个未接种的培养基放入37℃恒温箱中培养12h和24h后，观察并记录接种：将微生物的培养物或含有微生物的样品移植到培养基上的操作技术。无论微生物的分离、培养、纯化或鉴定以及有关微生物的形态观察及生理研究都必须进行接种。接种的关键是要严格的进行无菌操作。1.平板划线法2.稀释涂布平板法3.斜面接种法4.穿刺种法常用接种方法

7、：3、斜面接种法图2-1斜面培养基接种法4、穿刺接种法图2-3穿刺接种法接种：将微生物的培养物或含有微生物的样品移植到培养基上的操作技术。无论微生物的分离、培养、纯化或鉴定以及有关微生物的形态观察及生理研究都必须进行接种。接种的关键是要严格的进行无菌操作。1.平板划线法2.稀释涂布平板法3.斜面接种法4.穿刺种法常用接种方法：纯化纯化计数三课题延伸菌种的保藏三课题延伸1.斜面保藏菌种的保藏三课题延伸1.斜面保藏菌种的保藏斜面保藏三课题延伸1.斜面保藏临时保存菌种的保藏斜面保藏三课