上课 2.1 微生物的实验室培养.ppt

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1、变酸？巴斯德法国，微生物学家失败的原因：发酵物中混入了杂菌课题1微生物的实验室培养1.何为培养基？3.各种培养基的具体配方不同，但其基本成分都相同，都包括哪些营养成分？自主学习:2.按照物理形态、化学成分，培养基的种类有哪些？基础知识(一)培养基人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。(一)培养基1.概念：液体培养基固体培养基据物理性质分2.类型及应用：常用于工业生产用于微生物的分离、鉴定、计数加琼脂半固体培养基琼脂：液体培养基：表面生长均匀混浊生长沉淀生长1.培养基：微生物生存的环境和营养物质1.基本成分：思考：微生物“吃”什么？碳源、氮源、水

2、、无机盐⑴碳源无机碳源：有机碳源：CO2、CO32-、HCO3-牛肉膏、蛋白胨等自养微生物异养微生物⑵氮源无机氮源：有机氮源：NH4＋、NO3-牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等注：含C、H、O、N的有机物是异养型微生物的：碳源、氮源、能源。(一)培养基3.营养要素还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、碱基)并非所有微生物都需添加特殊营养物质此外：牛肉膏蛋白胨培养基配方牛肉膏5.0g蛋白胨10.0gNaCl5.0g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1000ml。配方中的各成分为微生物提供

3、了哪些营养？(一)培养基3.营养要素：碳源、氮源、磷酸盐和维生素氮源和维生素无机盐H2O天然培养基（含有天然成分：如：牛肉膏、蛋白胨等）合成培养基据化学成分分2.类型及应用：常用于工业生产常用于分类、鉴定液体培养基固体培养基据物理性质分天然培养基合成培养基据化学成分分选择培养基鉴别培养基据用途分2.类型及应用：(一)培养基常用于工业生产用于微生物的分离、鉴定、计数加琼脂常用于工业生产常用于分类、鉴定培养、分离出特定微生物鉴别不同种类的微生物在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长。根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学

4、药品配制而成。练习下列有关培养基的叙述正确的是（）A.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质B.培养基只有两类：固体培养基和液体培养基C.固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D.微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌A要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用（）A.固体培养基B.液体培养基C.加入青霉素的培养基D.加入高浓度食盐的培养基A练习下列叙述错误的是（）A.培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素B.培养霉菌时需将培养基中的pH调至碱性C.培养细菌时需将pH调至中性或微碱性D.培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件B练习碳源、氮源、生长因子的比较含义

5、功能碳源氮源生长因子凡能提供所需碳元素的物质凡能提供所需氮元素的物质生长必不可少的微量有机物构成细胞物质和一些代谢产物，有些还是异养生物的主要能源物质合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物酶、核酸等的组成成分1、何为无菌技术？无菌技术包括哪些方面？2、消毒和灭菌的区别？3、常用的消毒方法有哪些？4、常用的灭菌方法有哪些？自主学习：(二)无菌技术1.获得纯净培养物的关键：防止外来杂菌的入侵2.无菌技术包括：1、对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；2、用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；(二)无菌技术P15思考题3、为避免周围环境中微生物的污染，实验

6、操作应在酒精灯火焰附近进行；4、实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品接触。练习下列操作与无菌技术无关的是（）A.接种前用肥皂洗双手，再用酒精擦拭双手B.接种前用火焰烧灼接种针C.培养基在50℃左右时搁置斜面D.在酒精灯火焰旁边完成C消毒使用较为温和的物理或化学方法，杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。3.消毒与灭菌灭菌使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。理化因素的作用强度消灭微生物的数量芽孢和孢子能否被消灭(1)定义1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min，日常生活中广泛应用2、巴氏消毒法：70-75℃煮30min或80

7、℃煮15min，牛奶、啤酒等不宜进行高温消毒的3、化学药剂消毒法:75%酒精、氯气、石炭酸、煤酚皂溶液等4、紫外线消毒法：用于接种室空气消毒……(2)消毒的方法：3.消毒与灭菌1、灼烧灭菌：用于微生物接种工具，如：接种环、接种针或其他金属用具等，及接种过程中试管口或锥形瓶口的灭菌(3)灭菌的方法：3.消毒与灭菌2、干热灭菌：160-170℃下加热1-2h。用于玻璃器皿、金属用具等能耐高温、需保持干燥的物品。3、高压蒸气灭菌：100kPa、121℃下维持15-30min.广泛用于培养基及多种器材、物品。(3)灭菌的方法：3.消毒