选修一 2.1 微生物的实验室培养课件.ppt

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1、专题2:微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养课题背景19世纪中期，法国的酿造业遇到毁灭性的打击：葡萄酒变酸、变味。引发了巴斯德等人的研究，发现是发酵物中混入了杂菌，自此微生物学科开始快速发展。因此防止杂菌污染，获得纯净培养的微生物成了微生物应用的关键。到目前为止，几十项Nobel生理学和医学奖，化学奖都与微生物学有关那么在实验室培养微生物的关键技术是什么呢？1.获得纯净的微生物，并确保其他微生物不混入。2.为微生物的生长提供适应的营养和环境条件。内容提要：微生物特点及其分类培养基与各类营养物质无菌技术菌落大肠杆菌的纯化

2、培养了解有关培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。1、课题目标：掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。无菌技术的操作。2.课题重点和难点：3、技能目标：结构都相当简单，个体多数十分微小，通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构。2、类群1、特点一、微生物特点及分类病毒（无细胞结构、寄生生活）细菌电子显微镜下的结核杆菌放线菌真菌青霉菌酵母菌原生生物微生物包括哪五类：病毒细菌放线菌真菌原生动物原核生物界原生生物界真菌界病毒界二、

3、微生物的培养基1.培养基概念人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。（1）按物理状态来分：培养基可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基。其中固体培养基用于菌种分离、鉴定等。（2）按功能来分，可分为选择培养基和鉴别培养基。（3）按成分来分，可分为天然培养基和合成培养基。2.培养基的类型和用途按物理状态不同划分固体培养基液体培养基在液体培养基中加入一定量凝固剂，使其成为固体状态，琼脂含量一般为1.5%-2.0%琼脂含量一般为0.2%-0.7%不加任何凝固剂半固体培养基固体培养基常用来进行微生物的分离

4、、鉴定、活菌计数及菌种保藏观察微生物的运动特征、分类鉴定大规模工业生产固体培养基：菌落液体培养基：表面生长均匀混浊生长沉淀生长半固体培养基：无动力有动力(弥散)(是否运动)按用途不同划分基础培养基鉴别培养基含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基（牛肉膏蛋白胨培养基）用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基用于鉴别不同类型微生物的培养基选择培养基微生物产生某种代谢产物，与培养基中的特殊化学物质发生特定的化学反应，产生明显的特征变化在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质，抑制不需要的微生物的生长，

5、有利于所需微生物的生长延伸：分离酵母菌、霉菌等真菌分离金黄色葡萄球菌分离固氮菌分离自养型微生物分离导入了目的基因的受体细胞鉴别培养基:加入伊红美蓝琼脂培养基（EMS培养基）鉴别大肠杆菌现象：蓝紫色金属光泽按成分不同划分天然培养基合成培养基化学成分不恒定的天然有机物牛肉膏蛋白胨培养基、麦芽汁培养基。用于工业生产化学成分完全了解的物质配制而成的培养基用于分类和鉴定4、培养基的营养构成（1）碳源：凡能为微生物提供生长繁殖所需碳元素的营养物质都称为碳源。（2）氮源：凡是能为微生物提供所需氮元素的营养物质都称为氮源。（3）水：（4）无

6、机盐：（5）生长因子：微生物生长不可缺少的微量有机物质叫生长因子。包括维生素、氨基酸和碱基。C元素构成细胞中有机物的骨架C元素是大多数微生物代谢所需的能量来源无机碳源：CO2、碳酸盐。（只能被自养微生物利用）有机碳源：各种糖类，其次是有机酸、醇类、脂类和烃类化合物（异养微生物）碳源是异养微生物的主要能源物质。碳源功能和种类为微生物提供合成细胞物质代谢产物的原料1.分子态氮（氮气）：固氮微生物的氮源2.无机态氮（硝酸盐、铵盐）：几乎所有微生物能利用3.有机态氮（蛋白质及其降解产物）：a实验室常用牛肉膏、蛋白胨、酵母膏做氮源b生

7、产用玉米浆、豆饼、葵花饼、花生饼等有机氮还能作为碳源和能源物质。氮源功能和种类构成微生物细胞的组成成分；调解微生物细胞的渗透压，PH值；有些无机盐如S、Fe还可做为自养微生物的能源构成酶活性基的组成成分，维持酶活性。如：Mg、Ca、K是多种酶的激活剂Cncnc-micro无机盐功能水Cncnc-micro是细胞中生化反应的良好介质；营养物质和代谢产物都必须溶解在水里，才能被吸收或排出体（细胞）外。水的比热高，能有效的吸收代谢过程中放出的热量，不致使细胞的温度骤然上升。维持细胞的膨压（控制细胞形态）。牛肉膏蛋白胨培养基（应用最

8、广泛和最普通的细菌基础培养基）1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方凝固剂提供碳源、氮源、能源、生长因子碳源、氮源、生长因子、能源无机盐水、溶剂4.培养基要满足微生物对环境条件的需求：真菌微酸性（5.0-6.0）细菌中性（6.5-7.5）放线菌微碱性（7.5-8.5）大多数微生物适宜生长的温