微生物的实验室培养课件（人教版选修一）.ppt

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1、专题重点专题难点①培养基的基础知识②培养基对微生物的选择作用③纤维素酶的种类及作用①无菌技术的操作②微生物的数量测定③从土壤中分离出分解纤维素的微生物专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养培养基1．概念营养物质人们按照微生物对____________的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。2．营养构成碳源特殊营养物质(1)一般都含有水、__________、氮源、无机盐。(2)还要满足微生物生长对pH、________________以及O2的要求。3．分类(1)液体培养基：配制成的液体状态的基质。(2)固体培养基：配制成的固体状态的基质，在液体

2、培养基中加入凝固剂，如琼脂，制成琼脂固体培养基。无菌技术1．消毒温和巴氏(1)特点：使用较为________的物理或化学方法，仅杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。(2)常用方法：煮沸消毒法、________消毒法、化学药剂消毒法。2．灭菌强烈灼烧(1)特点：使用________的理化因素杀死物体内外所有的微生物。(2)常用方法：________灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。微生物培养的基本技术1．配制培养基称量―→混合―→溶化―→调pH―→分装―→包扎2．灭菌加水―→加培养基―→密封―→排冷气―→维持压力―→取出倒平板(或搁置斜面)3．接种

3、稀释涂布平板(1)接种过程：洗净双手→点燃酒精灯→接种→贴标签。(2)接种工具：包括____________、涂布器。接种环(3)接种方法：平板划线法、____________________法。(4)注意事项：整个操作过程要在____________旁完成。4．培养酒精灯火焰接种后的培养皿放入恒温箱内培养。菌种保藏1．临时保藏固体斜面4℃(1)操作：采用______________培养基，菌落长成后，放入______冰箱中保藏，以后每3～6个月，转移一次新的培养基。(2)缺点：保存时间不长，菌种易被污染或产生变异。2．长期保存法甘油管藏采用________

4、________法，放入－20℃的冷冻箱中保存。营养物质定义作用主要来源碳源凡能提供所需碳元素的物质合成生物体的细胞物质和一些代谢产物；有些是异养生物的能源物质①无机化合物：CO2、NaHCO3等。②有机化合物：糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等氮源凡能提供所需氮元素的物质合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物①无机化合物：N2、NH3、铵盐、硝酸盐。②有机化合物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等微生物的营养要素1．微生物的营养物质及功能营养物质定义作用主要来源生长因子生长必不可少的微量有机物酶和核酸的组成成分牛肉膏、酵母膏、动物组织提取液等无机盐矿物质参与酶的组成；调节渗透

5、压——水——作为溶剂和运输的介质；参与生化反应——备注：(1)不同种类的微生物，对碳源的需要差别较大。(2)微生物最常利用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖；最常利用的氮源是铵盐、硝酸盐。(3)对异养微生物来说，含C、H、O、N的化合物既是碳源又是氮源和能量来源。(4)微生物之所以需要补充生长因子，往往是由于缺乏合成这些物质所需要的酶或合成能力有限。营养型碳源氮源生长因子举例自养型微生物CO2、NaHCO3N2、NH3、铵盐、硝酸盐等一般不需要硝化细菌异养型微生物糖类、脂肪酸等铵盐、硝酸盐、蛋白胨等有些种类需要乳酸菌2.不同微生物对营养物质的需求划分标准培养基种类特

6、点用途物理性质液体培养基不加凝固剂工业生产半固体培养基加凝固剂、如琼脂观察微生物的运动、分类鉴定固体培养基微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种化学成分天然培养基含化学成分不明确的天然物质工业生产合成培养基培养基成分明确(用化学成分已知的化学物质配成)分类、鉴定培养基的种类划分标准培养基种类特点用途用途选择培养基在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长培养、分离特定微生物鉴别培养基根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物，如可用伊红－美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否含有大肠杆菌续表：

7、关于微生物培养实验的注意事项1．配制培养基时，按照每个培养基消耗15～20ml的量来估算总用量。2．灭菌后，培养基冷却到55℃后应及时进行倒平板操作。如果不能及时操作，需要将培养基放到55℃左右的电热箱中保温，以防止琼脂凝固。第一次灼烧每次划线之前灼烧划线结束后灼烧目的避免接种环上可能存在其他微生物污染培养物杀死上次划线结束后残留在接种环上的菌种，使每次划线的菌种来自上次划线的末端杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者3．平板划线操作时每次灼烧的目的如下表：4.实验后，所有用过的培养基、培养液等都需要统一进行高压蒸汽灭菌后再丢弃，否则将会造成环

8、境污染。微生物所需的营养要素)【例1】下列关于微生物