高中生物选修一2.1-微生物的实验室培养课件.ppt

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1、听写:1、果酒、果醋、腐乳、泡菜制作过程中的微生物类型及其代谢方式、生殖类型?2、果酒、果醋、腐乳、泡菜制作过程的原理?3、泡菜盐水清水和盐的比例?为什么要将盐水煮沸后又冷却?加盐有何作用?4、哪些因素会导致泡菜腌制过程中的亚硝酸盐含量变化?5、为什么泡菜坛内有时会长一层白膜,这层白膜是怎么形成的?6、测定亚硝酸盐含量的方法是?测定亚硝酸盐含量的原理?(条件、试剂、颜色)7、氯化镉和氯化钡作为提取剂的作用?加氢氧化铝乳液的作用?课题1微生物的实验室培养专题2:微生物的培养与应用一、基础知识:(一)培养基人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。

2、(1)按物理状态分:固体培养基、液体培养基和半固体培养基。(2)按功能分:选择培养基和鉴别培养基。(3)按成分分:天然培养基和合成培养基。1.培养基的类型和用途固体培养基:(在培养液中加了琼脂,一种凝固剂,在44度以下都呈凝固状)用于菌种保存及分离、鉴定菌落、活菌计数等液体培养基:表面生长均匀混浊生长沉淀生长常用于发酵工业。选择培养基:在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长。加入青霉素的培养基:分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基:分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基:分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基:分离自养型

3、微生物鉴别培养基:根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成,用以鉴别不同种类的微生物。例如,在培养基中加入伊红和美蓝,可以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌:如果有大肠杆菌,其代谢产物就与伊红和美蓝结合,使菌落呈深紫色,并带有金属光泽。天然培养基有血清、血浆、和组织提取液(如鸡胚和牛胚浸液)。优点:营养成分丰富,培养效果好缺点:来源受限;成分复杂,影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析;易发生支原体污染;根据细胞生存所需物质的种类和数量,用人工方法模拟合成的。合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质

4、。优点:标准化生产,组分和含量相对固定;成本低缺点:缺少某些成分,不能完全满足体外细胞生长需要。合成培养基:天然培养基:3.不管哪种培养基,一般都含有水、碳源、和氮源、无机盐、等营养物质,另外还需要满足微生物生长的特殊要求:1)特殊营养物质如:维生素、氨基酸、碱基等如培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素。营养物质定义作用主要来源碳源凡能提供所需碳元素的物质构成生物体的细胞物质和一些代谢产物,有些是异养生物的能源物质无机C源:CO2、碳酸盐,只能被自养微生物利用有机C源:各种糖类,其次是有机酸、醇类、脂类和烃类化合物营养物质定义作用主要来源氮源凡能提供所需氮元素的物质

5、合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物无机化合物:N2、NH3、铵盐、硝酸盐有机化合物:尿素、牛肉膏、蛋白胨等生长因子生长必不可少的微量有机物酶和核酸的组成成分维生素、氨基酸、碱基等2)pH细菌pH为:6.5-7.5;放线菌pH为:7.5-8.5;真菌pH为:5.0-6.0。3)氧气培养厌氧微生物时则需要提供无氧条件另外还需要满足微生物生长的特殊要求:二、无菌技术1.无菌技术的概念无菌操作泛指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。无论是随后将要学到的倒平板、平板划线操作,还是稀释涂布平板法,其操作中的每一步都需要做到“无菌”,即防止杂菌污染。只有熟练、规范地进行无

6、菌操作,才可能成功地培养微生物。芽孢有些细菌在一定的条件下,细胞里面形成一个椭圆形的休眠体,叫做芽孢。芽孢的壁很厚,对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如,有的细菌的芽孢,煮沸3小时以后才死亡。芽孢又小又轻,可以随风飘散。当环境适宜(如温度、水分适宜)的时候,芽孢又可以萌发,形成一个细菌.孢子在生物体的一定部位产生一种特殊的生殖细胞叫孢子。孢子的特点是能直接长成新个体。比较项理化因素的作用强度消灭微生物的数量芽孢和孢子能否被消灭消毒较为温和部分生活状态的微生物不能灭菌强烈全部微生物能消毒与灭菌的比较1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min2、巴氏消毒法:7

7、0-75℃下煮30min或80℃下煮15min3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源4、紫外线消毒照射前,适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液可以加强消毒效果。(1)消毒的方法:3.常用的消毒与灭菌的方法1、灼烧灭菌接种环、接种针、试管口2、干热灭菌:160-170℃下加热1-2h。3、高压蒸气灭菌:100kPa、121℃下维持15-30min.(2)灭菌的方法:最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌,它可以杀灭所有的生物,包括最耐热的某些微生物的休眠体,同时可以基本保持培养基的营养成分不被破坏。有些玻璃器皿如吸管、培养皿和金属

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