最新1-2.1-微生物的实验室培养ppt课件.ppt

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1、1-2.1-微生物的实验室培养基础知识（一）培养基人们按照微生物对营养物质的不同需求，配置出供其生长繁殖的营养基质称培养基1.培养基的种类液体培养基（一般用锥形瓶盛装）。固体培养基（一般用试管或培养皿盛装），在液体培养基的基础上再添加琼脂。最早进行微生物培养的科学家是：巴斯德液体培养基消毒无菌技术的种类灭菌使用较为温和的方法（酒精、紫外线）来杀死部分对人体有害的微生物。使用较为强烈的理化因素杀死物体内外的所有微生物（包括芽孢和孢子）。常用的消毒方法煮沸消毒法巴氏消毒法酒精擦拭双手氯气消毒水源紫外线或化学药品（石碳酸或煤酚皂溶液）消毒不包括芽孢和孢子不耐高温的70-75度

2、30分钟或80度15分钟先用消毒液，再用紫外线，消毒液即可加强紫外线的消毒效果1.灼烧灭菌：常用的灭菌方法2.干热灭菌：3.高压蒸汽灭菌：接种用具和接种过程中的_______或______放在酒精灯火焰的___________中进行灼烧灭菌。将玻璃器皿、金属用具等能耐高温并需要保持干燥的物品放到干热灭菌箱内，在___________中加热________即可。将需灭菌的物品放到盛有水的高压灭菌锅内______，待______排尽后，密闭继续加热至锅内压力到______，温度到______后，维持15～30min即可。试管口瓶口充分燃烧层160～170OC1～2h煮沸冷空

3、气100kPa121OC实验操作（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1.牛肉膏蛋白胨固体培养基配方物质牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂水重量5g10g5g20g定溶至1000mL2.称量按比例称取各种物质，注意事项：牛肉膏要放在称量纸上称量，牛肉膏、蛋白胨都易______，称取时动作要_______，称后________________。吸潮迅速及时盖上瓶盖先将牛肉膏连同称量纸一起放入烧杯，加少量水，加热至牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸。加入蛋白胨和氯化钠，用玻璃棒搅拌使之溶解，最后加入琼脂，搅拌，待溶解后，加自来水定溶至1000mL。将配制好的培养基放到锥形瓶中，

4、瓶口加棉塞，包上牛皮纸，连同培养皿（5～8套，用几层报纸包好）一起放到高压锅内灭菌。待培养基冷却到__________左右时，在___________________倒平板50OC酒精灯火焰附近3.溶化4.灭菌5.倒平板讨论1.培养基灭菌后要冷却到50OC时倒平板。用什么办法来估计培养基的温度？用手触摸锥形瓶，温度下降到刚刚不烫手时即可开始倒平板。2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？通过__________，防止瓶口的_______污染培养基。灼烧灭菌微生物3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？平板冷凝后，皿盖上会凝结______，凝固后的培养基表面的_____也比较高

5、，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分__________，又可以防止皿盖上的水珠____________，造成污染。4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？_______________可能在_______________的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。空气中的微生物皿盖与皿底之间水珠湿度更好地挥发落入培养基（二）纯化大肠杆菌微生物接种方法常见的有_____________________1.平板划线法通过_______在琼脂固体培养基表面___________的操作，将________

6、____逐步稀释分散到培养基的表面在数次划线后可以分离到由__________繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体称_______。平板划线法稀释涂布平板法聚集的菌种接种环连续划线菌落一个细胞1.为什么在操作的第一步以及划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环？操作的第一步灼烧接种环是为了____每次划线前灼烧接种环是为了杀死____划线结束后仍然要灼烧接种环，能____讨论避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；上次划线结束后，接种环上残留的菌种。及时杀死接种环上残留的菌种，避免____________和___________细菌污染环境感染操作者2.在

7、灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？划线后，线条末端细菌的数目比____________要少，每次从上一次划线的末端开始，能使___________随着________________而逐步________，最终能得到由_____________繁殖而来的________。以免接种环温度太高，杀死菌种。线条起始处细菌的数目划线次数的增加减少单个细菌菌落2.稀释涂布平板法将菌液进行一系列的__________，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到________