微生物实验室培养ppt课件.ppt

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1、到目前为止，几十项Nobel生理学和医学奖，化学奖都与微生物学有关微生物的类群原生生物原核生物真菌病毒如酵母菌单细胞的动植物如草履虫、单细胞藻类等微生物包含了除植物界和动物界以外的所有生物无细胞结构真核细胞细菌、蓝藻原核细胞专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养了解有关培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。一、课题目标：掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。无菌技术的操作。二、课题重点和难点：三、技能目标：基础知识梳理一.培养基培养基

2、（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。（1）按物理状态来分：培养基可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基。（2）按成分来分，可分为天然培养基和合成培养基。（3）按功能来分，可分为选择培养基和鉴别培养基。（一）分类：(微生物生存的环境和营养物质)(1)固体培养基、液体培养基和半固体培养基①固体培养基：（观察菌落和分离提纯微生物）在一般培养温度下呈固体状态的培养基。一类是用天然的固体状物质制成的，如用马铃薯块、麸皮、米糠、豆饼粉、花生饼粉制成的培养基，酒精厂、酿造厂等常用这种培养基；另一类是在

3、液体中添加凝固剂而制成的，如实验室中常用的琼脂固体斜面和固体平板培养基。这种培养基广泛用于微生物的分离、鉴定、保藏、计数及菌落特征的观察等。②液体培养基或培养液或发酵液：（工业大规模培养）呈液体状态的培养基。液体培养基因营养物质分布均匀，与菌体表面接触充分，还能大量溶解微生物的代谢产物等优点，广泛用于微生物的生理、代谢研究以及大规模的工业化生产中。③半固体培养基：（观察微生物的运动）加入少量的凝固剂(如0.2％～0.5％的琼脂)而制成的培养基。这种培养基常用于观察细菌的运动、厌氧菌的分离和菌种鉴定等。几种菌落及其形态几种菌落

4、及其形态（2）天然培养基和合成培养基①天然培养基：（工业生产降低成本）主要取自动物体液或从动物组织分离提取。其优点是营养成分丰富，培养效果良好，缺点是成分复杂，来源受限。天然培养基/液的种类很多，包括生物性液体（如血清）；组织浸液（如胚胎浸液）；凝固剂（如血浆）等。②合成培养基：（菌种的分类，鉴定，营养、代谢，遗传、鉴定和生物测定等定量要求较高的研究）是通过顺序加入准确称量的高纯度化学试剂与蒸馏水配制而成的。其所含的成分（包括微量元素在内）以及他们的量都是确切可知的。（三）选择培养基和鉴别培养基：①选择培养基：配制特点：添加

5、或减少某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需微生物的生长。从而使后者从含有杂菌的标本中分离出。（即筛选你所需要培养的微生物，令其生长，其余微生物不生长）例如：(1)基本的培养基通过加青霉素，实现分离纯化酵母菌、霉菌；（2）加高浓度的食盐分离纯化金黄色葡萄球菌（有高度的耐盐性，可在10~15%NaCl肉汤中生长）（3）无氮培养基可分离纯化固氮菌（固氮细菌）。（4）不含有机碳的培养基可分离纯化自养型细菌如硝化细菌。②鉴别培养基：配制特点：在培养基中加入某种指示剂或化学药品，以鉴别不同种类的微生物。（即只能鉴别出你此种微

6、生物是不是你所需要的微生物，而不能抑制其余种类的微生物生长）例如：伊红美蓝培养基（1）用途：伊红美篮培养基一般用于检测饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌。（2）原理：伊红为酸性染料，美篮为碱性染料。当大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷被染成红色，再与美篮结合形成紫黑色菌落，并带有金属光泽。（二）培养基配制原则：（1）目的要明确：根据微生物的种类、培养目的等确定配制培养基的种类，因为不同的微生物对培养物质的需求不同。（2）营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。（3）pH要适宜：各种微生物适宜生长的pH范围不同。细菌pH

7、为：6.5-7.5（偏碱）；放线菌pH为：7.5-8.5；真菌pH为：5.0-6.0（偏酸）。微生物需要的四大类营养要素物质是：（三）培养基的构成1.碳源2.氮源3.无机盐4.水凡是能为微生物提供所需碳元素的营养物质。①无机碳源：CO2；NaHCO3；碳酸盐等②有机碳源：糖类、脂肪酸、蛋白质、花生粉饼、石油等⑴概念⑵来源：⑶不同微生物所利用的碳源不同：1.微生物的碳源异养型微生物的碳源为：含碳有机物（有机碳）自养型微生物的碳源为：含碳无机物（无机碳）①无机氮源：N2、NH4+氨盐、NO3-硝酸盐、NH3。②有机氮源：尿素、牛

8、肉膏、蛋白胨、氨基酸等凡是能够为微生物提供N元素的营养物质。2.微生物的氮源⑴概念：⑵来源：⑶固氮微生物所利用的氮源是：3.特殊要求培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(微生物生长不可缺少的微量有机物）如维生素、某些氨基酸、碱基)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求