微生物实验室培养课件.ppt

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1、微生物的实验室培养点此播放教学视频点此播放教学视频(1)根据你所掌握的知识，分析导致生产失败的根源是什么?(2)由此可见，研究和应用微生物的前提是什么？根源在于发酵物中混入了杂菌防止杂菌入侵，获得纯净的培养物点此播放教学视频一、基础知识：（一）培养基（1）按物理状态分：（2）按功能分：（3）按成分分：1.培养基的类型和用途固体培养基和液体培养基选择培养基和鉴别培养基天然培养基和合成培养基点此播放教学视频固体培养基常用于菌种保存及分离、鉴定菌落、活菌计数等。微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见

2、的菌落。液体培养基常用于发酵工业。点此播放教学视频选择培养基：从微生物群中选择具有特定表型的细胞，使之进行繁殖所用的培养基。加入青霉素：分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐：分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基：分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基：分离自养型微生物点此播放教学视频天然培养基有血清、血浆和组织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。优点：营养成分丰富，培养效果好。缺点：来源受限；成分复杂，影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析。根据细胞生存所需物质的种类和数量，用人工方法模拟合成的。主要成分

3、是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。优点：标准化生产，组分和含量相对固定；成本低缺点：缺少某些成分，不能完全满足体外细胞生长需要。合成培养基天然培养基点此播放教学视频2.培养基内所含的基本物质(1)水(2)碳源(3)氮源(4)无机盐点此播放教学视频?思考1从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么一般都含有水、碳源、氮源和无机盐这些营养成分？C、H、O、N、P、S是构成细胞原生质的基本元素，约占原生质总量的97％以上。点此播放教学视频(1)pH值如:培养霉菌需酸性、培养细菌需中性或

4、微碱性(2)特殊营养物质如：培养乳酸杆菌需要在培养基中添加维生素(3)氧气的含量如:培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件3.培养基内所需的其他条件点此播放教学视频(二)无菌技术1、获得纯净培养物的关键:2、无菌技术包括的四个方面(自学)3、消毒与灭菌(1)消毒：概念：使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。方法:煮沸消毒法巴氏消毒法：如牛奶的消毒化学药剂消毒：酒精、氯气、石碳酸、煤酚皂溶液等紫外线消毒防止外来杂菌的入侵点此播放教学视频（2）灭菌概念

5、：使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。方法：a灼烧灭菌b干热灭菌c高压蒸汽灭菌灼烧灭菌微生物的接种工具(接种环、接种针)或其他金属用具直接在火焰的充分燃烧层灼烧注意适用范围点此播放教学视频干热灭菌160－170℃；1－2h能耐高温的需要保持干燥的物品(玻璃器皿)高压蒸汽灭菌100kPa121℃15-30min通常用于培养基的灭菌点此播放教学视频思考2无菌技术除了用来防止实验室的培养物被污染外，还有什么目的？?还能有效避免操作者自身被微生物感染点此播放教学视频二、实验操作1.制

6、备牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养细菌）步骤：计算－称量－溶化－灭菌－倒平板点此播放教学视频?思考3①溶化时为什么要将牛肉膏连同称量纸一起加热?②加琼脂的目的是什么?可保证粘附在称量纸上的牛肉膏也能溶于水中,减少误差作为凝固剂点此播放教学视频思考4①在灭菌前,用牛皮纸、旧报纸包紧盛有培养基的锥形瓶的目的是什么？②培养皿能否用高压蒸汽灭菌？?在灭菌时能避免水蒸汽凝结时浸湿棉塞；在取出培养基锥形瓶时也能起到隔绝空气中杂菌污染的作用不能,因为培养皿要保持干燥,应该用干热灭菌点此播放教学视频倒平板点此播放教学视

7、频问题讨论1、为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？讨论1：2、平板冷凝后，为什么要将平板倒置？3、在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？点此播放教学视频2、平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。3、空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。1、通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基

8、。点此播放教学视频2、纯化大肠杆菌最常用的是：平板划线法和稀释涂布平板法平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落。微生物的接种技术点此播放教学视频平板划线操作点此播放教学视频点此播放教学视频单个或者少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，会形成一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。每种细菌在一定条件下所形成的菌落，可以作为菌