RNA干扰mdr1对宫颈癌细胞放射敏感性的影响.doc

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1、RNA干扰mdr1对宫颈癌细胞放射敏感性的影响张玉诺1于江1，俸珊1，刘方欣2（1.解放军第181医院，桂林541002；2..重庆医科大学基础医学院，重庆400016）[摘要]目的：探讨利用RNA干扰技术抑制多药耐药基因1（multidrugresistancegene1，mdr1基因）对宫颈癌细胞放射敏感性的影响。方法：设立空白组、脂质体组（仅加入等量脂质体）、mdr1RNA干扰组作对照，用RT-PCR检测宫颈癌细胞转染shRNA前后mdr1的表达水平变化。用集落形成试验检测各实验组照射后人宫颈癌细胞株的集落形成率。AO/EB荧光检测

2、法检测细胞凋亡率的变化。流式细胞仪测定P-gp的表达，结果：mdr1基因的shRNA能够有效抑制mdr1基因的表达。经过RNAi的放射治疗组，其集落形成率较对照组明显下降，MGMT的表达也下调，统计学差异有显著性（P＜0.05）。结论：RNA干扰技术抑制mdr1的表达，降低了宫颈癌细胞的放射抗性，其辐射增敏作用可能与抑制mdr1基因表达后P-gp的表达下调有关。[关键词]RNAi；宫颈癌细胞；mdr1;放射敏感性中图分类号：R737.31TheeffectsofRNAinterferencetoinhibitingmdr1onradios

3、ensitivityinhumancervicalcarcinomalineHeleZhangYunuo1,GongXu1,ZhouQi,Liu2Fanxing3(1.The181-stHospitalofPLA,Guilin,541002,P.R.China;2.Thedepartmentofgynecologicaltumor，TheTumorResearchInstituteofChongqing,Chongqing400030,China;3.ChongqingUniversityofmedicalSeciences,Chongq

4、ing400016,China)[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheinhibitoryeffectsofRNAiexpressionvectorofmdr1geneonradiosensitivityinHelecellofhumancervicalcarcinoma.MethodsRNAiexpressionvectorformdr1genewasconstructedandtransfectedtoHelecellofhumancervicalcarcinomawithliposomes.RT-PC

5、RandflowcytometerdetectseffectthatittomRNAandproteinexpressionofmdr1CellularresponsetoirradiationwasevaluatedbythecolonyfromingtestApoptosiswas*解放军第181中心医院院内课题observedbyfluorescentstaining.P-gpproteinespressionwasdeterminedbyimmunohistochemicalstaining.ResultsRNAigroupcou

6、ldsignificantlydecreasetheproliferationrateanddownregulatetheexpressionofmdr1ofirradiatedhumancervicalcarcinoma.Conclusionmdr1oligodexynucleotidessensitizetheHelatoionizingirradiationthroughdecreasingtheexpressionofmdr1,whichmightberelatedtodecreasingtheexpressionofP-gp.[

7、KeyWords]RNAinterference;cellofhumancervicalcarcinoma;mdr1gene;Radiosensitivity肿瘤是一种以原癌基因激活和肿瘤抑制基因失活为特征的基因组功能性疾病，其结果限制了肿瘤对传统治疗的有效性，所以从基因水平阻断有害基因的异常表达可以从从根本上解决问题。肿瘤细胞对化疗放疗的反应性存在某些关联，一般而言，化疗不明感的细胞对放疗也不敏感。放疗是治疗宫颈癌的重要辅助手段之一。Mdr1基因（Multidrugresistancegene1,多药耐药基因1）编码的磷酸蛋白P-gp（

8、P-glycoprotein，）的过度表达是产生多药耐药（multidrugresistance，MDR）的重要机制。本文利用RNA干扰（RNAinterfering，RNAi）技术抑制mdr