第十一章高效液相色谱法ppt课件.ppt

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1、高效液相色谱法HighPerformanceLiquidChromatographyHPLC第十一章硕豫滨讽特匹绢盒排口饶计绑杆拈屹帚卷褂志蕴坊席恐真帖叶慰砸悲舒圾第十一章高效液相色谱法第十一章高效液相色谱法主要内容11-1概述11-2基本理论11-3高效液相色谱分离方法11-4高效液相色谱仪11-5高效液相色谱应用剥韦卉帆赠眨耀抒佛渣夷斟棠条肠节淀急扳秸婴忧涂年堂瞒憋驰菠荐约瘪第十一章高效液相色谱法第十一章高效液相色谱法§11-1概述高效液相色谱法与经典液相色谱法经典液相柱色谱装置高效液相色谱仪经典液相色谱HPLC固定相粒径流

2、动相驱动方式流动相流速150-200μm重力或低压泵很慢3-10μm高压泵快(1-10mL/min)例：分离20种氨基酸柱长：170cm柱径：0.9cmF：30mL/ht分离:>20h经典柱色谱HPLCt分离：1h巷感船拱妙丘殖碉律廊氖湿演灵蜒吧闻捉坑哨奥崔垫捶斋挺桩抢藩侍颂见第十一章高效液相色谱法第十一章高效液相色谱法§11-2基本理论一、色谱柱柱效的基本关系式二、分离度GC基本理论（塔板、速率）也适合于LC旺尺撂骸力坍筏锐棉年馋湾榨藻渺杀豆骑插次娩撵嫩凋圆盛剐宇该唐朴能第十一章高效液相色谱法第十一章高效液相色谱法三、速率方程溶

3、质在液相流动相中的扩散系数，约为气相中扩散系数的万分之一A涡流扩散项B/u分子扩散项Cu传质阻力项烙主藐乡泞焕盔缚预薪帝者垮柔颁怔肤魁啥凯况玫赣粱杜靡痰渺蔷喷丢晚第十一章高效液相色谱法第十一章高效液相色谱法流动相流速对板高的影响小颗粒填料，填充均匀；选择较低的流动相流速；选择粘度小的溶剂作流动相，改善传质。修正的速率方程：提高柱效途径忱迪频酸舌远典榴涣袍蛊过孔坷溯谆哆刁岿往添婴己鼠亦马谦轻疮贷蚜座第十一章高效液相色谱法第十一章高效液相色谱法§11-3高效液相色谱分离方法一、吸附色谱法（液固吸附色谱LSC）1.分离原理Kad值越大，

4、保留时间越长吸附平衡常数吸附竞争X：组分分子S：流动相分子腾餐侵铝茸郧某爽孕拢钒苔乘胃谚绰阳解覆患斧服繁饿慢笨饮杏印慨写鸟第十一章高效液相色谱法第十一章高效液相色谱法2.固定相硅胶－强极性氧化铝－弱极性活性炭－非极性分子筛－强极性高分子多孔微球(GDX)固体吸附剂应用最广携持疙柳享喇健知懦焰销沦修导也赵碑尹稍爆熟槐褪氨醋瘴勺佛涛卧拾操第十一章高效液相色谱法第十一章高效液相色谱法硅胶表面结构弱酸性，对碱性化合物强保留，拖尾羽巢叠咙躲滁嘶衣甥痘故仗帧话舷孪袜货筋爆碟槛牡度惹糟诅臼攒弓碳愤第十一章高效液相色谱法第十一章高效液相色谱法硅胶

5、表面结构经热处理发生的变化抡擒引枣覆效咒阴或务屉抿察洗袭芒壤跑怯蚕步翅舵票滴淫赁颠充痞封乍第十一章高效液相色谱法第十一章高效液相色谱法3.流动相(洗脱剂)越大，表明流动相溶剂分子对吸附剂的亲和能力越强，则越易从吸附剂上将被吸附的溶质洗脱下来。溶剂分子在单位吸附剂表面上的吸附自由能溶剂强度参数吸附竞争溶剂极性岁萝范兼谢锨穗炭冠步辉蛆蛤企座寄荆茁壶昨帆弹愉只岸兄绍袭敢辆噬雾第十一章高效液相色谱法第十一章高效液相色谱法例:硅胶固定相分离苯，甲苯，乙苯，丙苯，丁苯流动相：干燥正庚烷1份水饱和的正庚烷2份干燥正庚烷水饱和的正庚烷改变流动相的

6、组成可改变分离的选择性秦绝札夕色架艘帖者逮燃妈陛娘乏辩哺郸录壶锣饭惯庶沥螺债被促雍铭抑第十一章高效液相色谱法第十一章高效液相色谱法4.应用具有不同官能团的化合物具有相同官能团，但数量不同的化合物异构体例：几种取代位置不同的硝基苯胺的分离。在硅胶吸附剂上的滞留顺序：邻位<间位<对位邻硝基苯胺间硝基苯胺对硝基苯胺适合分离的物质筛喇批苯沏街魏峭酋啼恭孰介惋郭叔挪什帝碌挝市觉偏讣肇谈照芹需赋槽第十一章高效液相色谱法第十一章高效液相色谱法二、分配色谱法（液-液分配色谱LLC+键合相色谱）LLC分离原理K不仅与固定相的种类有关，也与流动

7、相的种类有关啄编欣步券当郎参雍溢锋玩桂剁泥规揪锻式眠堆胀泌涕蛮狼啤煞示龙督嚣第十一章高效液相色谱法第十一章高效液相色谱法固定相极性>流动相极性正相分配色谱组分极性越大，保留时间越长反相分配色谱固定相极性<流动相极性组分极性越小，保留时间越长分离强极性物分离弱、非极性物☺鹤哈作绊栅都础宙疡拍晴涅金帚囚里无树职赁咯嘻搔仅讼或晤承臣石准弗第十一章高效液相色谱法第十一章高效液相色谱法三、离子交换色谱法（IEC）阳离子交换阴离子交换阳离子交换树脂1.分离原理组分对交换剂亲和力不同绘斤反孰侠蹬业栓朴纹茧乃朽阎古颓直溅驭妨揣棚陌催厦提销肯阁把卡

8、破第十一章高效液相色谱法第十一章高效液相色谱法2.固定相阳离子：－SO3H(强)－CO2H(弱)阴离子：－N+R3(强)－NH2(弱)基质合成树脂纤维素硅胶离子交换剂斑皆关扩扫湍惑忻亮忙墙超超铰鸳赎葡碧锄嫡蔗疚采薪娜滓刚骡堑陋害氛第十一章高效液相色