不同检测方法对新生儿期先天性梅毒诊断价值比较探究

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1、不同检测方法对新生儿期先天性梅毒诊断价值比较探究　　【摘要】目的：探讨比较梅毒螺旋体-酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）、甲苯胺红不加热血清学实验（TRUST法）、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA法）和19S-IgM-TPELISA检测4种不同方法对可疑新生儿期先天性梅毒诊断价值。方法：选取80例拟诊为新生儿期先天性梅毒患儿为研究对象，分别应用上述4种方法进行梅毒血清学检测，同时对罹患梅毒患儿进行抗病毒治疗2周，分析4种方法在治疗前后检测结果并进行随访观察。结果：四种检测方法检测的阳性率比较差异具有统计学意义（P0.05）。1.2检测方法所有患儿均由两名主治医师进行严格病史采集和

2、体格检查。两组患儿都行血、尿常规和B超等检查。两组患儿均同期进行梅毒螺旋体-酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）、甲苯胺红不加热血清学实验（TRUST法）、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA法）和19S-IgM-TPELISA检测。1.2.1TRUST检测取250μl未灭活的患儿血清，逐滴加入TRUST试剂，摇匀后静置2min后观察是否出现红色凝块或絮状的颗粒物，阳性为梅毒感染，阴性则认为无感染。81.2.2TP-ELISA检测采用人梅毒螺旋体（TP）ELISA试剂盒检测梅毒感染情况，试剂盒购于北京万泰生物科技有限公司，操作过程严格按照试剂盒说明书进行检测。1.2.319S-IgM-

3、TPELISA检测取10μl患儿血清加入可去除IgG和类风湿因子的吸附剂，室温静置中10min；加入相应的标准品，水浴、洗板、拍干后采用酶标仪进行吸光度检测，读取血清标本光密度值和标准品的光密度值并计算其比值，以比值大于1.1判定为阳性，小于0.8认为阴性，而0.8～1.1则认定为可疑。1.2.4TPPA法TPPA试剂盒由日本富士株式会社购买，检测方法严格按照试剂盒说明书进行操作。阴性：反应物成纽扣状聚集，边缘光滑；阳性：粒子环变大，外周边缘不均匀且杂乱凝集；强阳性：均一凝集，颗粒布满孔底，边缘不规则。1.3治疗所有罹患梅毒的患儿均进行综合性治疗，针对病情予以相应的抗感染、营养支持、对

4、症治疗等综合治疗措施，总疗程持续2周。对照组患儿则依据病情进行相应的对症治疗。1.4统计学分析研究数据均采用均数±标准差表示，并应用SPSS813.0软件进行分析。计量资料的比较采用独立样本的student-t检验，计数资料比较采用χ2检验，P0.05）。见表1。表180例拟诊新生儿期先天性梅毒检测结果对比＼[n（%）＼]检测方法阳性　　患儿数阴性患儿数阳性率（%）χ2值P值TRUST法512963.7510.360.05。见表2。3讨论8梅毒血清学试验是当前诊断梅毒感染与否的最重要的检测手段，其检测的原理可依据抗原类型的不同区分为非螺旋体抗原和螺旋体抗原两类＼[5，6＼]。本研究使用

5、的四种检测方法中，TRUST是典型的螺旋抗原的梅毒常规筛查法，其主要通过心磷脂、卵磷脂和胆固醇的混合物与梅毒患儿血清中的反应素结合，以是否形成凝集颗粒物判断感染情况。但是，由于血清中的白蛋白可对凝聚颗粒形成亲水保护薄膜进而影响吸附免疫球蛋白的功能，导致检测时较难形成较大的凝聚颗粒物，使得检测结果中的假阴性率升高＼[7，8＼]。本研究结果发现，TRUST法检测新生儿期先天性梅毒的阳性率仅仅为63.75%，阳性率明显低于其它三种方法，这与既往的报道结果基本一致＼[9，10＼]，也充分反映了TRUST法存在的不足之处。因此，在临床检验实践中，仅依靠TRUST法检测可能并不能正确诊断先天性梅毒

6、。与TRUST相比，TPPA法使用梅毒螺旋体毒株制成抗原，检测的原理与TRUST则相似，其检测的特异度和灵敏度都较高，是目前较为可靠的梅毒血清学实验。该法的优点和TRUST一样，都是操作简便的检测方法，但是其缺点也十分明显，即试剂昂贵、检测时需将标本进行梯度稀释、检验时间较长、结果同样是通过肉眼判定，主观性强，容易造成假阳性＼[11＼]。因此本次研究的结果也显示两种方法的检出阳性率比较差异具有统计学意义，肯定了TPPA在验证梅毒螺旋体感染方面的优势。同时，从这些方面也进一步表明，单一形式的检测方法对于早期诊断新生儿期先天性梅毒并不是良好的检测方式，探求联合检验的有效方案是未来对先天性梅

7、毒早诊断、早治疗的主导方向之一。TP-ELISA法是一种检测lgG抗体的螺旋体抗原检测法，是目前确诊梅毒的重要依据，但是其只能在新生儿3～4周时才能检出，因而TP-ELISA法检测极可能会错过早期诊断的最佳时机，而且由于母体的梅毒IgG抗体可通过胎盘屏障进入胎儿，加之IgG的半衰期较长，因此新生儿体内IgG能长时间维持，导致TP-ELISA法多数情况下存在假阳性＼[8＼]。本研究结果中TP-ELISA法的检出阳性率也相对较高，可高达97.5%，